Микробиология. Лекции / Zanyatie_4_VChK_2_den_Dykhanie_Sterilizatsia_03-2022_st

Самый доступный метод выращивания анаэробов – посев в высокий столбик агаризованной (тиогликолевой) среды

•Агар необходим, чтобы исключить перемешивание слоев.

•В нижних слоях среды создаются анаэробные условия.

•Недостаток – трудно выделить чистую культуру. Для этого оптимальны плотные среды.

Такой подход будет эффективным только при выделении клостридий

•Возбудители газовой гангрены выделяют сероводород →

•Так как в среде есть соли железа, образуется характерное почернение нижних слоев среды.

Культивирование анаэробов – метод Фортнера

Производят посев на чашку Петри с кровяным агаром, разделённым пополам вырезанной канавкой.

Одну половину засевают культурой аэробных бактерий, другую - анаэробных.

Края чашки заливают парафином и инкубируют в термостате.

Первоначально происходит рост аэробной флоры, а затем (после поглощения О2) рост аэробов прекращается и начинается рост анаэробных бактерий.

Культивирование анаэробов – метод Перетца

В расплавленный и охлаждённый агар вносят материал (или культуру бактерий) и заливают под стекло, лежащее на фрагментах спичек в чашке Петри.

Метод наименее надежен из всех, но достаточно прост в применении.

Более современный подход:

Можно использовать готовые системы для культивирования таких прихотливых микроорганизмов.

На снимке: химические реагенты системы GasPak создают необходимый газовый состав внутри анаэростата.

Стерилизация

Методы стерилизации в микробиологии

определение: Стерилизация – это

полное уничтожение всех форм микроорганизмов, патогенных и условно-патогенных, а также их спор на неживых объектах внешней среды

(основные моменты для ЛПО содержатся в санитарноэпидемиологических правилах и нормативах (СанПиН

2.1.3.2630-10 «Санитарно-

эпидемиологические требования к организациям, осуществляющим медицинскую деятельность»)

Классификация методов стерилизации:

• Физические

-паровой (автоклавирование)

-суховоздушный (в стерилизационных шкафах)

-прокаливание (в пламени спиртовки и проч.)

-фильтрация (бактериальные фильтры)

-лучевой ( γ-лучи, УФО)

-современные (СВЧ-поля, «холодная» плазма…)

• Химические

-погружение в жидкость ( Н2О2, глутаральдегид)

-газовый (окись этилена, озон, формальдегид)

Суховоздушный метод → в сухожаровых шкафах (печах Пастера). Режим стерилизации:

180° в течение 60 мин →

можно стерилизовать термостойкие объекты:

-стеклянную посуду;

-металлические инструменты;

-резиновые пробки (силикон!);

-фарфоровую посуду;

-термостойкие вещества (например, вазелиновое масло, тальк).

Объект должен быть упакован для сохранения стерильности!