- •Министерство образования и науки Российской Федерации
- •2014 Лабораторная работа №1 Выделение простых белков и изучение их свойств
- •Лабораторная работа №2 Биуретовая реакция (Пиотровского)
- •Лабораторная работа №3 Нингидриновая реакция на α-аминокислоты
- •Лабораторная работа №4 Ксантопротеиновая реакция на циклические аминокислоты
- •Лабораторная работа №5 Диазореакция на гистидин и тирозин (Паули)
- •Лабораторная работа №6 Реакция на триптофан Адамкевича и Шульца-Распайля
- •Лабораторная работа №7 Осаждение белка при кипячении
- •Лабораторная работа №8 Осаждение белка органическими растворителями
- •Лабораторная работа №9 Осаждение белка концентрированными минеральными кислотами
- •Лабораторная работа №10 Осаждение белка некоторыми органическими кислотами
Министерство образования и науки Российской Федерации
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение
высшего профессионального образования
«Уфимский государственный нефтяной технический университет»
Кафедра «Биохимии и технологии микробиологических производств»
Отчет принят:
Оценка__________
доцент кафедры БТМП
_______ Скорняков А.Н.
Отчет
о лабораторной работе № 3
на тему «Изучение свойств белков»
Студент гр. БТБ-12-02 А.Г. Никитина
Уфа
2014 Лабораторная работа №1 Выделение простых белков и изучение их свойств
Цель работы:
Выделение простых белков и изучение их свойств
Ход работы:
1. Неразбавленный белок куриного яйца. Отделяют белок куриного яйца от желтка, получают около 30 мл неразбавленного раствора белков куриного яйца. Полученный не разбавленный белок куриного яйца представляет примерно 10%-ный раствор белка.
2. Разбавленный раствор яичного альбумина. Белок одного куриного яйца после отделения желтка хорошо взбивают и затем смешивают в колбе при встряхивании с десятикратным объемом дистиллированной воды. Раствор фильтруют через двойной слой смоченной водой марли или кусок стирального полотна, помещенный в воронке. Отфильтрованный раствор яичного альбумина; в осадке остается яичный глобулин.
3. Белки молока. К 5 мл свежего молока добавляют равный объем насыщенного раствора сульфата аммония. При этом выпадают в осадок глобулины и казеин. Отфильтровывают через складчатый бумажный фильтр раствор альбуминов.
4. Растительный альбумин. 10 г пшеничной муки смешивают с 40 мл дистиллированной воды и смесь встряхивают в течение 1 часа с помощью встряхивателя. Взвесь муки центрифугируют в течение 10 мин при 2-3 тыс. об/мин. Надосадочную жидкость фильтруют через складчатый фильтр. Отфильтрованный полупрозрачный раствор содержит преимущественно альбумин пшеничных зерен.
5. Растительный глобулин. 3 г гороховой муки насыпают в колбу и заливают 20 мл 10%-ного раствора сернокислого аммония. Колбу закрывают пробкой, встряхивают 3-5 мин и оставляют стоять. Находящийся в гороховой муке белок из группы глобулинов переходит в раствор. По истечении 30 мин раствор фильтруют через складчатый фильтр, смоченный раствором этой же соли
Раствор глобулина:
1. Данный белок нерастворим в воде. Наливают в пробирку 1 мл полученного раствора белка и приливают избыток воды, появляется муть вследствие выпадения глобулина в осадок. Если прибавить слабый раствор нейтральной соли илиNaCl, муть исчезает.
2. При действии концентрированных растворов нейтральных солей происходит высаливание белков. Для этой цели берут 2-3 мл раствора белка и прибавляют концентрированный раствор какой-нибудь нейтральной соли. Глобулин выпадает в осадок, раствор мутнеет. При уменьшении концентрации раствора прибавлением воды выпавший в осадок глобулин снова растворяется.
3. При кипячении или при действии крепких кислот происходит так называемая денатурация(свертывание белка). Берут в пробирку 2-3 мл раствора белка и нагревают до кипячения. Образовавшийся осадок не переходит в раствор в солевом растворе. К 2-3 мл раствора белка прибавляют немного кислоты, сразу образуется осадок, не растворившийся при прибавлении солевого раствора.
Вывод:
В данной работе мы научились выделять простые белки. Выделение белков из биологического материала начинается с извлечения их соответствующим растворителем. Если надо извлечь альбумин, то ведут экстракцию дистиллированной водой. В последующем из водного раствора белки могут быть переведены в осадок путем насыщения раствора солью или органическими растворителями.