- •1. Основные этапы развития микробиологии. Работы Коха, Пастера, Мечникова, Гамалеи. Цели и задачи медицинской микробиологии, ее связь с другими науками.
- •2. Особенности химического состава клеточных стенок Грам(+) и Грам(-) бактерий. Методы выявления клеточной стенки. Кислотоустойчивые бактерии.
- •3. Капсулы у бактерий. Химический состав, способы синтеза капсул. Источники, используемые для построения капсул. Примеры. Методы выявления капсул.
- •4. Строение цитоплазматической мембраны у бактерий. Особенности химического состава, функции.
- •5. Жгутики у бактерий, расположение. Химический состав. Особенности строения базального тельца у грамположительных и грамотрицательных бактерий. Характер движения у бактерий. Методы выявления жгутиков. Примеры патогенных бактерий.
- •6. Споры, химический состав, ультраструктура. Процесс спорообразования у бактерий, методы выявления спор.
- •7. Классификация бактерий по типам питания. Питательные вещества, условия роста, факторы роста.
- •8. Размножение микробной популяции, кривая роста при периодическом культивировании, определение показателей кривой роста, коэффициенты. Диауксия, триауксия. Понятие о непрерывных и синхронизированных бактериальных культурах.
- •10. Организация дыхательной цепи у аэробов и факультативных анаэробов. Примеры. Нитратное и сульфатное дыхание. Особенности дыхательных цепей у бактерий.
- •11. Молочнокислое брожение и семейство лактобацилл.
- •12. Муравьинокислое брожение и семейство энтеробактерий.
- •13. Спиртовое брожение. Примеры микроорганизмов.
- •14. Маслянокислое брожение и семейство клостридий.
- •15. Антимикробные препараты. Классификация, спектры действия. Методы определения чувствительности бактерий к антимикробным препаратам. Показания к применению антибиотиков. Селективная деконтаминация.
- •16. Морфологические группы фагов. Ультраструктура, химический состав. Стадии взаимодействия фага с клеткой. Характеристика каждой фазы.
- •17. Практическое применение вирулентных и умеренных фагов.
- •18. Фаг лямбда. Специфическая трансдукция. Дефектные фаги. Генерализованная трансдукция. Происхождение трансдуцирующего агента. Фаговая конверсия.
- •19. Генетические аспекты лизогении у бактерий. Лизогенизация клетки и ее генетическая регуляция. Репрессор. Операторы и промоторы ранних и поздних генов. Индукция фага. Зиготная индукция.
- •20. Спонтанные мутации у бактерий, их частота и механизм. Тест Лурия и Дельбрюка.
- •21. История открытия трансформации. Природа и размер трансформирующего начала. Эффективность трансформации и компетентность реципиента. Механизм интеграции ДНК при трансформации.
- •23. F-плазмида. Генетическая характеристика. Молекулярный механизм интеграции плазмиды в хромосому бактерий. Образование Hfr-штаммов. Направление переноса хромосомы при конъюгации.
- •24. Стадии конъюгации. Эффективное соединение пар. Мобилизация хромосомы. Конъюгативная репликация и перенос хромосомы. Рекомбинация.
- •25. Микрофлора человека в норме и патологии. Значение индигенной микрофлоры в поддержании здоровья человека.
- •26. Восстановление микрофлоры с помощью бактерийных препаратов. Виды препаратов-пробиотиков.
- •27. Определение понятия инфекция и инфекционное заболевание. Инфекционный процесс. Условия развития инфекционного процесса.
- •28. Инфекционное заболевание. Отличительные черты, стадии. Рецидив, реинфекция, суперинфекция, токсинемия, бактериемия, септикопиемия. Исходы инфекционного заболевания.
- •29. Понятие об антигенах. Антигены полноценные и гаптены. Синтетические антигены.
- •30. Строение О-антигена сальмонелл. Генетическая детерминация синтеза О-антигена. Особенности О-антигена у шигелл, эшерихий.
- •31. Компоненты комплемента и их свойства. Пути активации комплемента. Пропердиновая система и ее роль.
- •32. Классы иммуноглобулинов, их характеристика.
- •33. Антитоксические сыворотки, получение, единицы измерения и применение. Иммуноглобулины общего и направленного действия.
- •34. Реакция агглютинации. О- и Н- агглютинация. Пассивная гемагглютинация. Механизм, практическое применение.
- •35. Реакция преципитации. Механизм, практическое применение. Метод двойной диффузии в агаре по Оухтерлони. Иммуноэлектрофорез.
- •36. Реакция связывания комплемента, цель, ингредиенты, фазы реакции, механизм, учет.
- •37. Иммунофлюоресценция, прямой и непрямой методы. Цель постановки, значение для диагностики инфекционных заболеваний.
- •38. ИФА, цель постановки, ингредиенты, механизм, учет.
- •39. Инвазивность. Ферменты инвазии и методы их определения.
- •40. Факторы патогенности бактерий с антифагоцитарной активностью. Классификация, свойства, химический состав, локализация.
- •41. Фагоцитоз, его стадии и характеристика каждой стадии. Незавершенный фагоцитоз. Примеры.
- •42. Источники энергии у бактерий. Дыхание, типы, ферменты. Особенности катаболизма и анаболизма у бактерий.
- •43. Источники энергии у облигатных анаэробов. Классификация клостридий по способам получения энергии. Реакция Стикленда.
- •44. Выделение чистых культур облигатных анаэробов. Особенности идентификации. Роль анаэробов патологии человека.
- •45. Этапы бактериологической диагностики инфекционных заболеваний. Выделение чистой культуры аэробов и факультативных анаэробов, идентификация возбудителей. Роль аэробов в патологии человека.
- •46. Стафилококки-возбудители гнойно-септических инфекций. Морфология, культуральные свойства, факторы патогенности, патогенез стафилококковой инфекции. Принципы микробиологической диагностики, терапия стафилококковых инфекций.
- •47. Стрептококки-возбудители гнойно-воспалительных, септических и раневых заболеваний. Принципы микробиологической диагностики и терапии стрептококковых инфекций.
- •48. Возбудитель коклюша: особенности морфологии, физиологии, факторы патогенности и патогенез заболевания. Микробиологическая диагностика, специфическая профилактика и лечение.
- •49. Возбудитель менингококковых менингитов: особенности морфологии, физиологии, факторы патогенности и патогенез заболевания. Микробиологическая диагностика, специфическая профилактика и лечение.
- •51. Возбудитель туберкулеза: морфология, физиологические свойства, факторы патогенности. Инфекционный процесс при туберкулезе. Микробиологическая диагностика, специфическая профилактика.
- •53. Сальмонеллы-возбудители брюшного тифа и паратифов. Особенности антигенной структуры, принципы классификации (схема Кауфмана-Уайта). Патогенез брюшного тифа. Этапы бактериологической диагностики.
- •55. Бруцеллы-возбудители бруцеллеза. Морфология, физиология. Патогенез бруцеллеза, методы микробиологической диагностики. Специфическая профилактика и лечение.
- •56. Возбудитель чумы. Морфология, физиология, инфекционный процесс, патогенез заболеваний. Специфическая профилактика и лечение. Принципы микробиологической диагностики.
- •57. Возбудитель сибирской язвы, морфология, физиология, факторы патогенности, инфекционный процесс, патогенез заболевания. Специфическая профилактика и лечение. Принципы микробиологической диагностики.
- •58. Патогенные лептоспиры. Таксономическое положение возбудителя лептоспироза. Особенности морфологии и ультраструктур, факторы патогенности. Патогенез заболеваний. Принципы микробиологической диагностики. Лечение и профилактика.
- •59. Патогенные спирохеты. Возбудитель сифилиса. Морфология, культуральные свойства. Инфекционный процесс при сифилисе. Стадии заболевания. Микробиологическая диагностика, профилактика и лечение.
- •60. Хламидии-возбудители инфекционных заболеваний. Особенности морфологии. Стадии внутриклеточного развития. Патогенез заболеваний. Диагностика хламидийной инфекции, лечение и профилактика.
- •61. Микробиология гонореи. Морфология, физиология возбудителя, факторы патогенности. Инфекционный процесс. Диагностика острой и хронической гонореи. Лечение и профилактика.
- •62. Принципы универсальной классификации вирусов. Ультраструктура простых и сложных вирусов.
- •63. Методы культивирования вирусов: животные, куриные эмбрионы, культуры тканей. Типы клеточных культур, применяемые в вирусологии. ЦПД вируса на клетку.
- •64. Принципы диагностики вирусных инфекций. Вирусная гемагглютинация. Гемадсорбция. Цветная реакция. Метод бляшек. Типирование вирусов по реакциям торможения (нейтрализации).
- •65. Семейство вирусов герпеса. Строение вируса простого герпеса, репродукция, патогенез заболевания.
- •66. Семейство ортомиксовирусов. Строение, репродукция, патогенез, клиника и профилактика заболевания.
- •67. Пикорнавирусы. Строение вируса полиомиелита. Особенности взаимодействия с чувствительной клеткой. Инфекционный процесс при полиомиелите, патогенез заболевания. Диагностика. Профилактика полиомиелита.
- •68. Вирус гепатита В. Особенности морфологии, типы взаимодействия с чувствительной клеткой, патогенез заболевания. Диагностика, лечение и профилактика.
- •69. Семейство ретровирусов. Вирус СПИДа. Строение, репродукция, патогенез. Профилактика заболевания.
- •70. Основные препараты, применяемые для профилактики и лечения вирусных инфекций.
● Метаболическая активность отсутствует.
Ультраструктура
● Центр (ядро) — ДНК, Ca–ДПК, белки. ● Цитоплазма — рибосомы, ферменты. ● Клеточная стенка и мембрана.
● Оболочка — белковый защитный слой. ● Кора — пептидогликан.
● Экзоспориум — наружный белково-липидный слой. Процесс спорообразования 1 Асимметричное деление клетки. 2 Поглощение малой клетки крупной.
3 Формирование мембран, оболочек, накопление Ca–ДПК. 4 Обезвоживание, компактизация ДНК, прекращение метаболизма. 5 Созревание → устойчивая спора.
Методы выявления
● Ожешко — HCl + окраска по Цилю — Нильсену: споры красные, клетки голубые.
● Шеффер — Фултон — малахитовый зелёный + нагрев → споры зелёные, клетки красные (сафранин).
● Фазово-контрастная микроскопия — споры светлые, плотные тельца.
● Косвенные методы — устойчивость после воздействия (температура, УФ и др.).
Примеры спорообразующих бактерий
● Bacillus anthracis — центральные/субтерминальные споры. ● Clostridium tetani — терминальные споры.
● Clostridium botulinum — субтерминальные споры.
● Clostridium perfringens, Bacillus cereus — центральные споры.
7. Классификация бактерий по типам питания. Питательные вещества, условия роста, факторы роста.
Питание бактерий — это поглощение и использование веществ из среды для получения энергии, роста и синтеза клеточных компонентов.
Классификация по типам питания
По источнику энергии
● Фототрофы — используют свет
• Фотоавтотрофы (Cyanobacteria)
• Фотоорганотрофы (пурпурные, зелёные бактерии)
● Хемотрофы — используют химическую энергию
• Хемоавтотрофы (окисляют неорганику — нитрифицирующие, серобактерии)
• Хемоорганотрофы (питаются органическими веществами — большинство патогенов)
По источнику углерода
● Автотрофы — углерод из CO
● Гетеротрофы — органические соединения (углеводы, аминокислоты)
По отношению к кислороду
● Аэробы (облигатные, факультативные)
● Анаэробы (облигатные, факультативные, аэротолерантные) ● Микроаэрофилы (растут при пониженном O )
Питательные вещества Бактерии используют:
● Макроэлементы: C, H, O, N, P, S, K, Mg, Ca, Fe ● Микроэлементы: Mn, Zn, Cu, Co, Mo
● Источники углерода: углеводы, аминокислоты ● Источники азота: аммоний, нитраты, аминокислоты
● Фосфаты, сера — для биосинтеза нуклеиновых кислот, АТФ, аминокислот Факторы роста Органические вещества, которые бактерии не синтезируют, но нуждаются в них:
● аминокислоты ● витамины (биотин, рибофлавин, тиамин)
● пурины, пиримидины ● нуклеотиды
Бактерии:
● Ауксотрофы — требуют факторов роста.
● Прототрофы — синтезируют всё необходимое сами.
Условия роста
Температура
● Психрофилы: 0–20 °C
● Мезофилы: 20–45 °C (патогены) ● Термофилы: 45–80 °C
pH
● Нейтрофилы: pH 6.5–7.5 ● Ацидофилы: pH 3–5
● Алкалофилы: pH 8–10 Осмотическое давление
● Умеренные галофилы: 2–10% NaCl
● Экстремальные галофилы: >20% NaCl Высокая влажность обязательна для роста.
8. Размножение микробной популяции, кривая роста при периодическом культивировании, определение показателей кривой роста, коэффициенты. Диауксия, триауксия. Понятие о непрерывных и синхронизированных бактериальных культурах.
Бактерии размножаются бинарным делением: из одной клетки образуются две идентичные дочерние.
Деление включает репликацию ДНК, рост, образование септы и разделение цитоплазмы. Скорость
деления зависит от состава среды, температуры, pH, кислорода и др.
Кривая роста при периодическом культивировании
В замкнутой системе (периодическая культура) рост идёт в 4 фазы: 1 Лаг-фаза — адаптация, синтез ферментов, делений почти нет. 2 Лог-фаза — экспоненциальный рост, максимальная скорость деления, определяют время генерации (удвоение численности). 3 Стационарная фаза — истощение
питательных веществ, накопление токсинов, деление = гибель.
4 Фаза отмирания — гибель превышает деление, популяция сокращается.
Показатели и коэффициенты роста
● Мутность культуры — спектрофотометрия, визуальные стандарты.
● КОЕ (колониеобразующие единицы) — посев разведений на плотные среды, подсчёт колоний:
КОЕ/мл = число колоний × обратное разведение × 10 (если брали 0,1 мл).
Используется для анализа воды, воздуха, почвы, продуктов.
Диауксия и триауксия
● Диауксия — двухфазный рост при двух источниках углерода: сначала потребление
предпочтительного (например, глюкоза), затем после лаг-фазы — второго (например, лактоза). ● Триауксия — трёхфазный рост при трёх источниках питания.
Непрерывные и синхронизированные культуры
● Непрерывная культура — постоянный приток свежей среды и удаление отходов (хемостат,
турбидостат). Популяция удерживается в стадии лог-фазы.
● Синхронизированная культура — клетки делятся синхронно. Используется для изучения клеточного цикла. Получают отбором клеток определённого размера, голоданием, температурными методами.
9. Энергетический обмен у бактерий. ФДФПФ- и КДФГ-пути. ЦТК у бактерий. Особенности энергетического обмена.
Энергетический обмен (катаболизм) — это совокупность процессов, обеспечивающих разложение органических субстратов с выделением энергии, аккумулируемой в форме АТФ и восстановленных коферментов (NADH, FADH и др.).
Основной путь — гликолиз (анаэробный) + дыхательная цепь (аэробный) или брожение (анаэробный).
Гликолиз
Пути катаболизма глюкозы
1 ФДФ-путь (Фосфофруктокиназный)
● Основной путь.
● Глюкоза → 2 пирувата → 2 АТФ + 2 NADH.
● Даёт больше энергии, участвует в синтезе метаболитов. 2 ПФ-путь (пентозофосфатный)
● Даёт NADPH и рибозо-5-фосфат (синтез нуклеотидов, жирных кислот).
● Важен при активном анаболизме.
3 КДФГ-путь (Кето-дезокси-глюконатовый)
● Характерен для аэробных грамотрицательных бактерий (например, Pseudomonas). ● Меньше энергии: 1 АТФ + 1 NADPH + 1 NADH на 1 глюкозу.
Цикл трикарбоновых кислот (ЦТК, цикл Кребса)
● Аэробные и факультативные бактерии: пируват → ацетил-КоА → ЦТК. ● Выход: 3 NADH + 1 FADH + 1 GTP + CO .
● У облигатных анаэробов часто неполный (только до α-кетоглутарата или с восстановительными ветвями).
Особенности энергетического обмена у бактерий
● Нет митохондрий: все реакции идут в цитоплазме и на ЦПМ. ● Используются разные акцепторы: O , NO , SO ² и др.
● Брожение у анаэробов с разными продуктами (молочная, уксусная кислота, этанол, H , CO ). ● Высокая гибкость метаболизма → адаптация к разным условиям.
10. Организация дыхательной цепи у аэробов и факультативных анаэробов. Примеры. Нитратное и сульфатное дыхание. Особенности дыхательных цепей у бактерий.
Аэробное дыхание Дыхательная цепь — это система белков-оксидоредуктаз, локализованных в цитоплазматической
мембране, осуществляющих перенос электронов от NADH/FADH на конечный акцептор (кислород). Этапы:
● Донор: NADH → перенос электронов через комплексы (убихинон, цитохромы)
● Акцептор: O → H O
Образуется протонный градиент (протонный мотивирующий потенциал), энергия которого используется АТФ-синтазой.
Эффективность: 1 молекула глюкозы → до 38 АТФ.
Факультативные анаэробы
Могут переключаться между аэробным и анаэробным дыханием в зависимости от наличия кислорода.
Примеры: Escherichia coli, Salmonella, Pseudomonas.
Анаэробное дыхание
Нитратное дыхание (денитрификация)
● Электроны передаются на NO → NO → NO → N O → N ● Характерно для Pseudomonas, Paracoccus, Bacillus.
● Энергетическая эффективность ниже, чем при использовании кислорода
