Гемадсорбция |
Вирусные белки на |
Подтверждение |
|
инфицированных клетках |
вирусной репликации |
Цветная реакция |
Цитопатический эффект |
Жизнеспособность |
|
|
клеток |
Метод бляшек |
Количество инфекционных |
Подсчёт, оценка титра, |
|
вирусов |
активность |
Реакция торможения |
Специфические антитела |
Типирование, |
гемагглютинации |
к вирусу |
эпиднадзор |
Реакция |
Нейтрализация вируса |
Диагностика, |
нейтрализации |
антителами |
типирование, вакцины |
65. Семейство вирусов герпеса. Строение вируса простого герпеса, репродукция, патогенез заболевания.
Herpesviridae
Herpesviridae — семейство крупных ДНК-содержащих вирусов, вызывающих пожизненные латентные инфекции у человека и животных. Известны своей способностью реактивироваться при снижении иммунитета.
Вход -> слияние с мембраной клетки
Вирус простого герпеса Простой герпес - хроническое заболевание, характеризуется полиморфизмом клинических
проявлений. Наиболее частыми симптомами являются везикулярные высыпания на коже и слизистых оболочках. При генерализации инфекции могут поражаться многие органы и системы: ЦНС (энцефалиты, миелиты, энцефаломиелиты), лимфатическая система, внутренние органы.
Геном: линейная двуцепочечная ДНК (~152 тыс. пар оснований), кодирующая ~80 белков.
Капсид (икосаэдрический) – состоит из 162 капсомеров, содержит белки VP5, VP19C, VP23, VP26.
Тегумент – аморфный слой между капсидом и оболочкой, содержит регуляторные белки
(VP16, VP22, UL37).
Суперкапсид (оболочка) – липопротеиновая мембрана с гликопротеинами (gB, gC, gD, gE, gG, gH, gL, gK), обеспечивающими прикрепление и слияние с клеткой.
Репродукция вируса простого герпеса
Процесс включает несколько стадий:
(1)Адсорбция и проникновение
Вирус связывается с рецепторами клетки (гепарансульфат протеогликаны, nectin-1, HVEM) через гликопротеины gB, gC, gD. Происходит слияние вирусной оболочки с клеточной мембраной (зависит от gB, gH/gL).
(2)Проникновение в ядро и деконденсация ДНК
Капсид транспортируется к ядру по микротрубочкам. ДНК высвобождается в ядро через ядерные поры.
(3)Транскрипция и репликация ДНК
Ранние гены (альфа-гены, IE – immediate early) кодируют регуляторные белки (ICP0, ICP4,
ICP27), активирующие транскрипцию.
Бета-гены (ранние) кодируют ферменты репликации (ДНК-полимераза, тимидинкиназа, хеликаза).
Гамма-гены (поздние) кодируют структурные белки (гликопротеины, капсидные белки). Репликация ДНК происходит по полуконсервативному механизму с участием вирусной ДНК-полимеразы (UL30) и белков-праймеров.
(4)Сборка и выход вирионов
Капсиды формируются в ядре, упаковывают ДНК. Вирионы покидают ядро путем почкования через ядерную мембрану, приобретая оболочку. Зрелые вирионы выходят из клетки через экзоцитоз или лизис.
просто для визуала
Пути передачи:
1. Контактно-бытовой (основной для ВПГ-1) – через слюну, поцелуи, общую посуду. 2. Половой (основной для ВПГ-2) – через генитальные выделения.
3. Воздушно-капельный (редко, при герпетическом стоматите).
4. Вертикальный (от матери к плоду при родах или трансплацентарно).
5. Трансфузионный и трансплантационный (при переливании крови, пересадке органов).
Особенность герпесвирусов: После первичного заражения вирус персистирует в нервных ганглиях и может
реактивироваться при снижении иммунитета.
Стадии инфекции:
1. Первичная инфекция
○ Вирус проникает через поврежденные слизистые (рот, гениталии, глаза) или кожу.
○ Связывается с рецепторами (nectin-1, HVEM) и проникает в эпителиальные клетки.
○ Реплицируется → гибель клеток → образование везикул → вскрытие пузырьков
→ язвочки → заживление без рубцов.
2. Латентная инфекция
○ Вирус мигрирует по нервным волокнам в ганглии: ■ ВПГ-1 – тройничный ганглий (Gasseri).
■ ВПГ-2 – пояснично-крестцовые ганглии.
○ В нейронах вирусная ДНК существует в латентной форме (без репликации).
3. Рецидивирующая инфекция
○ При иммуносупрессии (стресс, переохлаждение, УФ-облучение, менструация) вирус реактивируется.
○ По аксонам возвращается к коже/слизистым → новые высыпания.
Эпидемиология
Распространенность: антитела к ВПГ-1 есть у >90% взрослых, к ВПГ-2 – у 20-30% (зависит от половой активности).
Первичное заражение ВПГ-1 обычно происходит в детстве (6 мес – 3 года), проявляется герпетическим стоматитом.
ВПГ-2 чаще передается половым путем, пик заражения – после начала половой жизни.
Клинические формы:
ВПГ-1 |
ВПГ-2 |
● Гингивостоматит |
● Генитальный герпес |
● Лабиальный герпес |
● Неонатальный герпес |
● Кератит |
● Рак шейки матки, простаты |
● Энцефалит |
|
● Герпетическая экзема |
|
Иммунитет После первичной инфекции формируются:
● Гуморальный иммунитет (IgM, IgG). ● Клеточный иммунитет (Т-киллеры).
● Местный иммунитет (IgA на слизистых).
Но! Антитела не предотвращают рецидивы, так как вирус скрывается в нейронах.
Лабораторная диагностика
Материалы для исследования:
Содержимое везикул, соскобы роговицы, кровь, ликвор, моча, сперма, мозговая ткань (при
летальных исходах).
Методы диагностики: 1. Вирусоскопия
○ Обнаружение гигантских многоядерных клеток (синцитий) с внутриядерными включениями Каудри.
○ Не дифференцирует ВПГ-1, ВПГ-2 и VZV.
2. Вирусологический метод
○ Культивирование в клетках HeLa, Hep-2, фибробластах эмбриона. ○ ЦПД: округление и гибель клеток.
3. Серологические методы
○ ИФА – обнаружение антигенов или антител (IgM – острая фаза, IgG – перенесенная инфекция).
○ Иммунодиффузия, РПГА – выявление антител в парных сыворотках. 4. Иммунофлюоресценция (РИФ)
○ Быстрый метод с моноклональными антителами. 5. ПЦР
○ Обнаружение вирусной ДНК в биоматериале (наиболее чувствительный метод).
6. Кожная аллергическая проба
○ Введение герпетического антигена внутрикожно (редко используется).
Лечение и профилактика Противовирусная терапия
● Ацикловир (зовиракс) – ингибирует вирусную ДНК-полимеразу.
● Валацикловир, фамцикловир – пролекарства с лучшей биодоступностью. ● Ганцикловир, фоскарнет – при резистентных штаммах.
Специфическая профилактика ● Вакцины (Витагерпавак, Герповакс) – снижают частоту рецидивов, но не излечивают.