45. Этапы бактериологической диагностики инфекционных заболеваний. Выделение чистой культуры аэробов и факультативных анаэробов, идентификация возбудителей. Роль аэробов в патологии человека.

Этапы бактериологической диагностики инфекционных заболеваний

Диагностика включает несколько четких шагов. Цель — выделить возбудителя инфекции и определить его свойства.

1 Первичный посев для получения изолированных колоний

-Сначала материал (кровь, гной, мокрота и др.) засевают на питательные среды.

-Нужно, чтобы бактерии выросли в виде отдельных колоний — чтобы можно было выделить чистую культуру.

-Для этого используют:

–Метод Коха Смысл — готовят серию десятикратных разведений материала (например, 1:10, 1:100, 1:1000).

Из последних разведений берут по 0,1 мл и высевают на чашки Петри с питательной средой. Суспензию равномерно распределяют по поверхности с помощью шпателя Дригальского. Чашки переворачивают крышкой вниз и ставят в термостат при 37°C.

Через 1–4 суток появляются изолированные колонии.

–Метод Дригальского

Материал наносят каплей на первую чашку и распределяют шпателем (получается густой посев — «газон»). Тем же шпателем (без добавления материала) переносят микробы на вторую чашку, затем на третью. С каждым разом количество микробов уменьшается → на третьей чашке получаются изолированные колонии.

2 Получение чистой культуры

-Из изолированной колонии делают пересев на свежую питательную среду (например, скошенный агар или бульон).

-Это нужно, чтобы вырастить только один вид бактерий без примесей.

3 Идентификация возбудителя

Определяют:

-к какому роду и виду относится бактерия;

-ее биохимические свойства (какие сахара сбраживает, образует ли газы, ферменты и т.д.);

-чувствительность к антибиотикам; -серотип, фаготип, биовар (если нужно для диагностики).

Выделение чистой культуры аэробов и факультативных анаэробов

-Аэробы и факультативные анаэробы выращивают на обычных питательных средах — плотных (агар) или жидких (бульон).

-Инкубация при 37°C в аэробных условиях (нет необходимости убирать кислород). -Используются те же методы (Коха, Дригальского).

-Главное — аккуратно получить изолированные колонии, а потом пересевать для чистой культуры.

Роль аэробов в патологии человека

Аэробы могут быть причиной многих заболеваний:

-гнойно-воспалительные процессы (стафилококки, стрептококки); -пневмонии (пневмококки, Pseudomonas aeruginosa);

-кишечные инфекции (E. coli, сальмонеллы); -менингиты (Neisseria meningitidis);

-сепсис, бактериемия.

46. Стафилококки-возбудители гнойно-септических инфекций. Морфология, культуральные свойства, факторы патогенности, патогенез стафилококковой инфекции. Принципы микробиологической диагностики, терапия стафилококковых инфекций.

-Staphylococcus aureus (MRSA) -Грам+, шаровидные клетки

-Вызывают гнойно-воспалительные инфекции, пневмонию, сепсис -Спор нет -Некоторые штамы имеют полисахаридные капсулы

-Факультативные анаэробы -Обитают в слизистых носа, также на коже

-Культивируют на среде Чапмана

-Пути передачи: контактно-бытовой, воздушно-капельный, алиментарный

-Факторы патогенности:

1 Факторы адгезии: белки адгезины (обеспечивают прикрепление), тейховые и липотейховые кислоты (встраиваются в клеточную стенку)

2 Капсула - полисахаридная (защищает от фагоцитоза и опсонизации)

3 Ферменты инвазии - фибринолизин (расщепляет фибрин), липазы (липиды), ДНКазы (разжижает гной ДНК)

4 Антифагоцитарные - белок А (связывается с Fc фрагментом IgG), пептидогликан (вызывает

воспаление и активирует комплемент)

-Токсины:

Мембранотоксины - гемолизины (альфа - поры в мембране)

Токсин синдрома токсического шока (суперантигены) - чрезмерно активируют иммунную

систему. Одновременно связываются с MHC II и T-клеточным рецептором что приводит к

выбросу цитакинов Стафилококковые энтеротоксины - эти токсины действуют как суперантигены + напрямую влияют на желудочно-кишечный тракт.

-Входные ворота - поврежденная кожа и слизистые -Патогенез - воспалительные очаги, абсцессы, сепсис

-Иммунитет - гуморальный (антитела), клеточный (Т лимфоциты) -Лаб диагностика - бактериология серология

-Лечение - β-лактамы (при устойчивости — линкосамиды, макролиды); ванкомицин при MRSA

//короче к бета-лактамам устойчив только один штам это MRSA остальные к ним норм относятся..

//прикол: начинают лечить стафилококк обычными антибиотиками и если они не берут, то значит это МРСА и его надо лечить ванкомицином… метод тыка ептвоюмать…

47. Стрептококки-возбудители гнойно-воспалительных, септических и раневых заболеваний. Принципы микробиологической диагностики и терапии стрептококковых инфекций.

-Streptococcus (pyogenus, pneumoniae) -Грам +, неподвижные сферической формы

-Вызывают ангину, скарлатину, пневмонию (ну нихуя же себе да?), ревматизм -Спор нет -Капсула есть у некоторых видов

-Аэротолерантные анаэробы -Обитают на слизистых дых путей, ЖКТ, влагалище -Культивируют - кровяной агар

-Передается воздушно капельным, контактным, фекально-оральным -Факторы патогенности:

1 Факторы прикрепления

–М-белок — защищает от фагоцитоза

–Капсула (гиалуроновая) — «маскируется», иммунитет не видит

–Липо- и тейхоевые кислоты — помогают прилипать к слизистой 2 Ферменты для разрушения тканей

–Стрептокиназа — растворяет фибрин (бактерии легче распространяются)

–Гиалуронидаза — разрушает соединительную ткань

–ДНКаза — разжижает гной 3 Антифагоцитарные трюки

–C5a-пептидаза — мешает иммунным клеткам собираться

–Fc-рецепторный белок — связывает антитела так, что они не работают

4 Токсины

–Стрептолизин O — разрушает клетки крови, вызывает воспаление -Входные ворота - слизистые дых путей, поврежденная кожа -Клиника - ангина, скарлатина, ревматизм

-Иммунитет - гуморальный-клеточный, сенсибилизация (ГЗТ) //гзт - это когда иммунитету надо время подумать

-Лаб диагностика - бактериологический, серология -Лечение - пенициллин, ванкомицин

-Может образовывать L-форму //типа защитная форма

48. Возбудитель коклюша: особенности морфологии, физиологии, факторы патогенности и патогенез заболевания. Микробиологическая диагностика, специфическая профилактика и лечение.

-Bordetella pertussis

-Грам минус, иногда жгутики -Нет спор -Микрокапсула -Облигатные аэробы

-Дых тракт человека -Культивируется кровяной агар

-Передается воздушно капельным путем -Факторы

1 Факторы адгезии - пили (тонкие нитевидные структуры, обеспечивают прикрепление), филаментный гемагглютинин (способствует прилипанию к клеткам хозяина), пертактин (усиливает адгезию)

2 Антифагоцитарные факторы - микрокапсула (препятствует фагоцитам), токсические субстанции (тормозит фагоцитоз)

-Токсины:

Коклюшный токсин (экзо) - АДФ-рибозилирование Ga-белка тем самым повышает уровень цАМФ в клетке Трахеальный цитотоксин (ТСТ) - повреждает реснитчатый эпителий дых путей, вызывая кашель

Эндотоксин - вызывает системное воспаление и лихорадку -Входные ворота - реснички эпителия трахеи и бронхов

-Патогенез - ОРВИ кашель острое заболевание //короче что то говори подойдет (Геннадий) -Иммунитет - гуморальный стойкий

-Лаб диагностика - ПЦР, ИФА -Лечение - АКДС - комбинированная вакцина

49. Возбудитель менингококковых менингитов: особенности морфологии, физиологии, факторы патогенности и патогенез заболевания. Микробиологическая диагностика, специфическая профилактика и лечение.

-Neisseria meningitidis -Грам минус диплококки -Не спорят -Полисахар капсула

-Строгие аэробы //жить не могут без кислорода… прям как я без одного человека…

-Обитают в носоглотке -Растут на шоколадном агаре

-Передаются воздушно-капельным -Факторы патогенности

1 Факторы адгезии - пили (4 типа способны удлиняться и укорачиваться) 2 Факторы инвазии - гиалуронидаза, протеаза 3 Антифагоцитарные факторы - полисахар капсула, плазмокоагулаза

-Токсины - эндотоксин (лихорадка, септический шок, поражение сосудов и тканей) -Входные ворота - слизистая носоглотки

-Острая респираторная инфекция, острый фарингит, менингит, сепсис, но чаще бессимптомно -Иммунитет - гуморальный -Лаб диагностика - культура, микроскопия, ИФА