2. Определение общего содержания белка, казеинаисывороточныхбелковвмолоке

методомформольноготитрования

Метод формольного титрования применяется для массовогоконтроля при оценке качества молока-сырья, так как он легок ввыполнении и не требует значительных затрат времени на одноопределение.

Метод основан на взаимодействии аминогрупп белков мо-лока с нейтральным формалином, что приводит к повышениюкислотностиобразованиемсоединений,вкоторыхобаатомааминогруппы замешаются метильной группой. При этом образу-ется метиламинокислота и свободная ее карбоксильная группа,котораяоттитровывается щелочью.

При анализе консервированного молока и молока, имеюще-го повышенную кислотность (более 22^оТ), данный метод дает неточные результаты. Погрешность определения значительно воз-растает при фальсификации молока. Метод не используется дляопределения белка в восстановленном или подвергнутом терми-ческойобработкемолоке.

Необходимые приборы, оборудование и реактивы: две кол-бы на 50 или 100 мл, пипетка Мора на 10 мл, 0,1 N раствор щело-чи NaOH или KOH, бюретка с зажимом, 1 % спиртовой растворфенолфталеина в капельнице Шустера, 30–40 % раствор нейтра-лизованногоформалинавдозаторена1мл.

Приготовлениенейтрализованногоформалина

Нейтрализованный формалина необходим для определениябелка в молоке формольным методом. Для приготовления ней-трализованного формалина к 50 мл свежего 30-40%-го формали-на необходимо добавить 0,5 мл 1%-го спиртового раствора фе-нолфталеина и при перемешивании оттитровать однонормальным(1Н)растворомNаОНдо слабо-розовогоокрашивания.

Техникаопределения

1. В колбу на 50–100 мл отмерить 10 мл молока,добавить10 капель 1%-го спиртового раствора фенолфталеина и оттитро-вать 0,1 N раствором щелочи до слабо-розового окрашивания, неисчезающегопривзбалтывании.

2. В колбу с помощью дозатора добавить 2 мл нейтрализо-ванного формалина и размешать, при этом слабо-розовое окра-шиваниеисчезает.

3. Содержимое колбы вновь оттитровать до слабо-розовогоокрашивания. Интенсивность окраски при титровании до добав-ленияформалина ипоследолжнабытьодинаковой.

4. Рассчитать содержание белков в молоке. Для этого коли-чество миллилитров 0,1 Н раствора щелочи, пошедшее на титро-вание молока после добавления формалина, умножают на коэф-фициент 1,94 и находят содержание общего белка в молоке, вы-раженное в процентах, а при умножении на коэффициент 1,51 –находят процентное содержание казеина. Количество сывороточ-ных белков (альбумин + глобулин) находят по разнице между со-держанием общего белка и казеина. Расхождения между повтор-нымиопределенияминедолжнопревышатьболее0,1млили0,19 %общегобелка.

Факторы,влияющиенаточностьанализа

1. Неодинаковая интенсивность окраски при титровании додобавленияформалинаипослеего добавления.

2. Необходимоиспользоватьтольконейтрализованныйисвежеприготовленныйформалин.

3. Определение общего содержания белков в молокерефрактометрическимметодом

Метод основан на установлении разности показателя пре-ломлениялучасвета,проходящегочерезмолокоивыделеннуюиз него безбелковую сыворотку. Анализировать можно молокосыроеи пастеризованное.