- •Содержание: введение
- •Введение
- •Глава 1. Организация производства микробных препаратов
- •Глава 2. Производственные помещения и оборудование
- •Глава 3. Методы культивирования микробов
- •Глава 4. Вакцины
- •Глава 5. Токсины и анатоксины
- •Глава 6. Сыворотки
- •Глава 7. Выделение гамма-глобулина
- •Глава 8. Бактериофаги
- •Глава 9. Диагностические препараты диагностикумы и антигены
- •Глава 10. Аллергены
- •Глава 11. Агглютинирующие, преципитирующие, гемолитические и люминисцирующие сыворотки. Комплемент
- •Глава 12. Получение интерферона
- •Глава 13. Контроль препаратов
- •Раздел 2. Препараты, применяемые против бактериальных, риккетсиозных и вирусных заболеваний
- •Часть 1. Препараты, применяемые против бактериальных заболеваний
- •Глава 1. Препараты, применяемые против кокковых инфекций
- •Глава 2. Препараты, применяемые против кишечных заболеваний
- •Глава 3. Препараты, применяемые против дифтерии
- •Глава 4. Препараты, применяемые против коклюша
- •Глава 5. Препараты, применяемые против раневых инфекций
- •Глава 6. Препараты, применяемые против ботулизма
- •Глава 7. Препараты, применяемые против туберкулеза
- •Глава 8. Препараты, применяемые против сибирской язвы
- •Глава 9. Препараты, применяемые против туляремии
- •Глава 10. Препараты, применяемые против бруцеллеза
- •Глава 11. Препараты, применяемые против чумы
- •Глава 12. Препараты, применяемые против спирохетозов
- •Часть 2. Препараты, применяемые для профилактики и лечения дисбактериоза
- •Часть 3. Препараты, применяемые против риккетсиозных заболеваний
- •Часть 4. Препараты, применяемые против вирусных заболеваний
- •Глава 1. Препараты, применяемые против натуральной оспы
- •Глава 2. Препараты, применяемые против бешенства
- •Глава 3. Препараты, применяемые против заболеваний, вызванных вирусами рода flavivirus
- •Глава 4. Препараты, применяемые против полиомиелита
- •Глава 5. Препараты, применяемые против ротавирусных инфекций
- •Глава 6. Препараты, применяемые против вирусных гепатитов
- •Глава 7. Препараты, применяемые против папилломавирусов человека
- •Глава 8. Препараты, применяемые против герпесвирусных инфекций
- •Глава 9. Препараты, применяемые против кори
- •Глава 10. Препараты, применяемые против вируса эпидемического паротита
- •Глава 11. Препараты, применяемые против краснухи
- •Глава 12. Препараты, применяемые против гриппа
- •Список использованной литературы
Часть 4. Препараты, применяемые против вирусных заболеваний
Глава 1. Препараты, применяемые против натуральной оспы
Возбудитель натуральной оспы относится к вирусам семейства Poxviridae, подсемейства Chordopoxviridae, рода Orthopoxvirus. Вирион поксвирусов имеет кирпичеобразную или овальную форму и крупные размеры 220-450×140-260×140-260 нм. Это самый крупный вирус животных. Геном представлен двунитевой ДНК, кодирующей 150-300 белков, из которых около 100 входят в состав вириона. Все антигены поксвирусов можно разделить на структурные, растворимые и гемагглютинин. К структурным белкам-антигенам относится NP-антиген, общий для всего семейства; этот антиген связан с белком нуклеокапсида. Среди растворимых антигенов есть термолабильный и термостабильный. Гемагглютинин является липопротеидным комплексом, содержащим три гликопротеида. Гемагглютинин вызывает агглютинацию эритроцитов в широком диапазоне температур (от 4 до 37 °С) и рН (от 4,6 до 10,0).
В вирионах оспы выявлено 12-13 ферментов. Среди них находится ДНК-зависимая РНК-полимераза и другие ферменты, связанные с транскрипцией ДНК, модификацией иРНК, киназы и протеазы. Репликация вируса осуществляется только в цитоплазме. Зрелые вирионы через аппарат Гольджи доставляются к клеточной поверхности и выходят из клеток путем экзоцитоза. Включения в цитоплазме (в околоядерной области) зараженных клеток являются либо «фабриками» в стадии их функционирования, либо их остатками вместе с неиспользованными продуктами вирусиндуцированного синтеза. Эти включения называются «тельца Гварниери» (1892). Элементарные тельца, обнаруженные в отделяемом везикул Пашеном (1906) «тельца Пашена», имеющие большое диагностическое значение при оспе. Вирус проникает в клетки слизистой оболочки верхних дыхательных путей и после размножения по лимфатической системе переносится в регионарные лимфатические узлы. В них происходит дальнейшее размножение вируса и наступает первичная вирусемия, которая приводит к инвазии ретикулоэндотелиальной системы. Начинается интенсивное размножение вируса, приводящее ко вторичной вирусемии. После этого вирус накапливается в эпидермисе и вызывает поражения кожи. С появлением сыпи больной становится заразен. Основным источником заражения является отделяемое носоглотки. Заболевание развивается после инкубационного периода продолжительностью 8-18 дней и начинается внезапно лихорадкой, головной болью, болями в мышцах, прострацией и появлением характерной сыпи. Сыпь проходит стадии макулы, папулы, везикулы, пустулы и завершается образованием рубца - все это длится 3 недели. С появлением сыпи температура снижается и вновь повышается, когда образуются пустулы. Тяжесть течения варьирует. Известны две формы оспы - натуральная (variola major) с летальностью 20-40 % и «алястрим», малая оспа (variola minor) с летальностью 1-2 %. Перенесенная инфекция, как и вакцинация, приводит к развитию стойкого пожизненного иммунитета. В 1953 г. на XI Всемирной ассамблее здравоохранения В.М. Жданов внес предложение о программе ВОЗ по глобальной ликвидации оспы. В мае 1980 г. ВОЗ объявила о ликвидации заболеваемости оспой в мире. После завершения программы ВОЗ рекомендовала повсеместно прекратить рутинную вакцинацию населения, а с 1991 г. - армейских контингентов. Вакцинацию было рекомендовано проводить исследователям, работающим в лабораториях с вирусом натуральной оспы и оспы обезьян или другими патогенными для человека ортопоксвирусами, членам бригад, обследующих очаги оспы обезьян (каждые 3 года). Оспа относится к числу карантинных инфекций. Основные мероприятия в случае развития угрозы распространения инфекции складываются из карантинных мероприятий и вакцинации. При этом следует учитывать, что практически все население земного шара в настоящее время не имеет иммунитета, а число прививочных реакций будет очень высоким. Обострение эпидемической ситуации по оспе, в т.ч. в результате биотерроризма, будет иметь катастрофические последствия.
Сухая оспенная вакцина Оспенная вакцина приготавливается из оспенного вируса, ослабленного проведением через организм коровы. Накопление вируса производится в коже телят, предпочтительно светлой масти, в возрасте от полутора до двух лет. Животных, предназначенных для производства оспенной вакцины, заготавливают в местностях, свободных от ящура, бруцеллеза, сибирской язвы и других эпизоотий крупного рогатого скота. Доставленные в производственный институт животные подвергаются карантинизации и подробно обследуются ветеринарным врачом. Перед переводом в производственные помещения их тщательно моют теплой водой с мылом. Накануне заражения шерсть выбривается, и операционное поле тщательно дезинфицируется. С помощью специального скарификатора наносят поверхностные надрезы, в которые втирают прививочный материал, представляющий собой вакцину, полученную ранее. К прививочному материалу предъявляют строгие требования. Он должен быть свежим, высоковирулентным и вызывать у животного нормальный вакцинальный процесс. В нем не должно быть гемолитических кокковых форм и других патогенных микробов, а количество сапрофитных должно отвечать норме, принятой для оспенной вакцины. За привитым животным устанавливается круглосуточное наблюдение: измеряется температура, отмечается аппетит, функция кишечника. Обычно вакцинальная сыпь достигает нормального развития к 72-120 часам после прививки. В это время животное обескровливают, тщательно моют теплой водой с мылом, отсепаровывают кожу и разрезанные куски ее замачивают в 1,5 % растворе карболовой кислоты. По истечении 18-22 часов кожа трижды споласкивается стерильной дистиллированной водой, после чего вакцинальная сыпь соскабливается острой ложкой. Сырой соскоб, снятый с кожи телка, растирают в специальной шаровой мельнице до превращения его в тонко измельченную массу и смешивают с сахарозо-желатиновой средой в соотношении 1:3. Тщательно растертая смесь разливается в ампулы в количестве, достаточном для десяти или двадцати прививок, и подвергается сублимационному высушиванию. В процессе приготовления и по окончании его вакцина подвергается сложной проверке. Бактериологический контроль имеет целью установить состав и количество аэробной и анаэробной микрофлоры. Вакцина, содержащая более трехсот бактерий сапрофитов в 0,01 мл, а также патогенные гемолитические стрептококки и стафилококки, протей и патогенные анаэробы, не допускается к выпуску. Безвредность вакцины проверяется подкожным введением ее морской свинке (1 мл) или двум мышкам (0,2 мл). В течение пяти дней у животных не должно наблюдаться патологических явлений. Вакцина должна обладать определенной степенью вирулентности, которая устанавливается на морских свинках и кроликах.
Сухая оспенная вакцина представляет собой хорошо сформированную таблетку, легко отделяющуюся от стенок ампулы. Перед употреблением вакцину разводят стерильным раствором глицерина, приложенным к каждой ампуле вакцины. Препарат применяют накожно. До отмены прививок в СССР существовала схема: 1-я доза - при рождении; 2-я и 3-я (ревакцинации) - через 8 и 16 лет соответственно. Постпрививочные осложнения могут быть: 1) со стороны ЦНС - энцефалиты, энцефалопатии; 2) кожно-слизистые; 3) со стороны других органов и систем. При первой группе летальность у детей 1-3 месячного возраста достигает 30-75 %, 5-14 лет - 10-12 %, значительно снижаясь в случае лечения специфическим иммуноглобулином. При второй группе развивается вакцинальная экзема («прогрессирующая вакцина»). При третьей форме возможны миокардит, перикардит, нефриты, неврозы, пневмонии, остеомиелиты и др., часто заканчивающиеся летально. Сухая оспенная вакцина годна в течение 1 года с момента съемки соскоба. Культуральный оспенный аллерген и контрольный препарат для реакции in vitro Данный препарат был разработан в Томском НИИВС Перетрухиной А.Т. (1976) для изучения иммуно-аллергической перестройки организма при оспенной вакцинации и для экспресс-диагностики поствакцинальных осложнений. Культуральный оспенный аллерген получали путем инактивации вируса вакцины с сохранением его аллергенных свойств, используя ультрафиолетовое облучение. Для стабилизации физических свойств аллергена применяли метод лиофилизации. Полученный аллерген в тесте ППН (показатель повреждения нейтрофилов) позволяет выявлять специфические аллергические реакции у людей, привитых оспенной вакциной раньше, чем появляются специфические антитела.
Противооспенный донорский иммуноглобулин Препарат представляет собой 10 % раствор (в физиологическом растворе) гамма-глобулиновой фракции крови доноров, специально ревакцинированных против оспы. С целью получения препарата отбирают свежепривитых против оспы доноров с наиболее выраженной кожной реакцией на ревакцинацию. Начиная с 14-21 дня после ревакцинации, у доноров берут кровь для приготовления иммуноглобулина. Иммуноглобулин готовят из сыворотки или плазмы методом фракционирования этиловым спиртом при низких температурах. Препарат можно готовить со стабилизатором, в качестве которого используют глицин. Можно добавлять консервант (мертиолят). В готовом виде препарат представляет собой бесцветную или слабо-желтого цвета прозрачную или слегка опалесцирующую жидкость. При хранении в нем может появляться незначительный, легко разбивающийся осадок. Активность препарата измеряется титром содержащихся в нем вируснейтрализующих антител. Минимально допускаемый титр противооспенных антител в препарате должен быть не ниже 1:4000. Иммуноглобулин выпускают стерильным, безвредным и апирогенным. Содержание гамма-глобулиновой фракции должно составлять не менее 97 % количества общего белка. В растворе иммуноглобулина белок должен содержаться в концентрации 10 %. Противооспенный донорский иммуноглобулин выпускают расфасованным в ампулы по 3 мл. Препарат применяли раньше при плановых прививках детям старше 3 лет, а также при лечении всех тяжелых поствакцинальных осложнений. По эпидемическим показаниям его могут использовать для экстренной профилактики оспы в случаях поздней вакцинации после контакта с больным или в случае биотерроризма. Донорский оспенный иммуноглобулин должен сохраняться в сухом помещении при 2-10 °С. Срок годности 3 года с момента выпуска. По истечении его препарат может быть направлен для повторного контроля в институт-изготовитель. В случае, если препарат сохраняет минимально допустимую активность, срок его годности может быть продлен на 6 месяцев.
Иммуноглобулин крови человека, титрованный на содержание противооспенных антител Препарат представляет собой 10 % раствор (в физиологическом растворе) гамма-глобулиновой фракции крови людей. Его получают из плаценты, плацентарной и абортной крови человека. В качестве иммуноглобулина, титрованного на содержание противооспенных антител, отбирают серии нормального (противокоревого) иммуноглобулина с титром вируснейтрализующих антител не менее 1:2000. Препарат применяли с целью профилактики осложнений, которые возможны при вакцинации против оспы. Его также можно использовать для профилактики кори. Срок годности препарата 3 года при хранении в сухом темном помещении при 2-10 °С.
Гетерологичный противооспенный гамма-глобулин Препарат представляет собой гамма-глобулиновую фракцию, выделенную спиртовым осаждением или методом электродекантации из сывороток лошадей или ослов, гипериммунизированных вирусом осповакцины и содержащих антитела к нему. Противооспенный гамма-глобулин предназначен для профилактики заболевания и лечения больных оспой, а также взрослых людей с осложнениями после противооспенных прививок. Препарат контролируется так же, как и все гамма-глобулины. Титр антител определяется реакцией нейтрализации вируса осповакцины на 12-дневных развивающихся куриных эмбрионах. Годным к выпуску считается препарат с титром антител не ниже 1:3125. Лечебно-профилактическая доза противооспенного гамма-глобулина - 3-6 мл. Для десенсибилизации применяется этот же препарат, разведенный 1:100. Препарат вводится однократно; вторичное введение возможно не ранее чем через 10-15 дней. Срок годности препарата - 8 лет.