2 курс / Микробиология 1 кафедра / Доп. материалы / Общая_микробиология_Иллюстрированное_учебное_пособие_Н_В_Литусов

371

термотесты (рисунок 12.20).

Рисунок 12.20 – Биологический индикатор для воздушной стерилизации.

Автоклавирование – это способ стерилизации с использованием горячего (перегретого) пара под высоким давлением. При автоклавировании термоустойчивые споры микроорганизмов погибают в течение 15 минут. На практике применяют автоклавы с горизонтальной или вертикальной загрузкой разных объемов. Текучий пар нельзя применять для стерилизации сред, содержащих углеводы, молоко и желатин. Автоклавированием стерилизуют стеклянную посуду, перевязочный материал, белье, вату, марлю, водные растворы различных веществ и питательные среды, устойчивые к воздействию горячего пара. Чаще всего используют следующие режимы автоклавирования: 132О – 2 атм – 20 минут; 120О – 1,1 атм – 45 минут. При выборе режима автоклавирования учитывают зависимость температуры от избыточного (выше атмосферного) давления пара (таблица 12.1).

Таблица 12.1 - Зависимость температуры от давления пара

Аппарат, предназначенный для стерилизации паром под давлением, называют автоклавом. Он представляет собой цилиндрический толстостенный горизонтальный или вертикальный сосуд, выдерживающий давление. Схема вертикального автоклава представлена на рисунке 12.21.

373

а б Рисунок 12.23 – Биксы без антибактериального фильтра (а) и с антибактериальным

фильтром (б).

Режим автоклавирования контролируется по термометру, таймеру и с помощью химического или биологического индикаторов - термотестов (рисунок

12.24).

Рисунок 12.24 - Индикаторы паровой стерилизации: а – химический, б – биологический.

Сроки хранения стерильного материала после автоклавирования:

-бикс простой – 3 суток;

-бикс с бактериальным фильтром – 20 суток;

-крафт-пакет, заклеенный с двух сторон – 20 суток;

-бязевая упаковка – 3 суток.

Стерилизация паром при атмосферном давлении (стерилизация горячим водяным паром, стерилизация текучим паром). Объекты,

повреждаемые паром под давлением, стерилизуют при менее жестком режиме - текучим паром при атмосферном давлении (100°С). Для стерилизации текучим паром при атмосферном давлении используют автоклав с открытым краном выпуска пара. При этом внутренняя полость автоклава соединена с внешней средой (крышка не завинчена). При таком режиме стерилизации погибают вегетативные формы микробов и не погибают споровые формы. При таком методе стерилизации процесс можно проводить в течение нескольких дней подряд по 15-30 минут. При первом сеансе погибают вегетативные формы микробов, а оставшиеся споры прорастают при хранении стерилизуемого объекта в условиях комнатной температуры. Последующие сеансы обеспечивают стерилизацию объекта.

Тиндализация - это способ дробной стерилизации, предложенный английским физиком Д. Тиндалем (рисунок 12.25).

375

На практике используются также другие методы тепловой стерилизации. Например, в стоматологических клиниках используют стерилизацию в среде нагретых стеклянных шариков диаметром 3 мм при температуре 250ОС в течение 15-20 секунд - гласперленовый или шариковый метод стерилизации (рисунок 12.26).

Рисунок 12.26 – Прибор для гласперленового метода стерилизации.

Контроль тепловой стерилизации осуществляют следующими методами:

-по показаниям приборов (мановакуумметров, термометров, таймеров);

-с использованием физико-химических тестов (вместе со стерилизуемым материалом в автоклав закладывают ампулы с кристаллами веществ или специальные бумажные термохимические индикаторы; при нужной температуре вещества расплавляются, а индикаторы меняют цвет);

-биологические тесты - в аппарат помещают флакончики со взвесью термостойкого спорообразующего микроба (B. stearothermophilus для контроля автоклавов или В. licheniformis для контроля воздушных стерилизаторов). После стерилизации их инкубируют в термостате. При гибели спор во время автоклавирования среда после инкубирования остается прозрачной.

Стерилизация лучами (холодная стерилизация). Объекты, повреждаемые

377

Так как поры таких фильтров очень малы, фильтрация осуществляется посредством “проталкивания” через них жидкостей под давлением или с помощью вакуума (разрежения). Методы фильтрации широко применяются в биотехнологическом производстве при изготовлении антибиотиков, бактериофагов

идругих препаратов, не выдерживающих тепловых методов стерилизации. С помощью мембранных фильтров возможно удаление из жидкостей не только бактерий и вирусов, но и крупных молекул.

Химическая стерилизация (стерилизация с помощью химических веществ). Этот метод является вспомогательным, так как невозможно подвергнуть стерилизации упакованные изделия. Кроме того, по окончании стерилизации химическими веществами изделия необходимо промыть стерильной жидкостью, что может привести к вторичному обсеменению изделий. Химические методы применяют для стерилизации тех предметов, которые нельзя стерилизовать другими методами, например, оптических приборов, изделий из полимеров, стекла, металлов.

Химическую стерилизацию проводят с помощью веществ в газообразном состоянии (пары раствора формальдегида в этиловом спирте, β-пропиолактон, смесь ОБ – смесь окиси этилена с бромистым метилом) или с помощью растворов химических веществ – стерилянтов (дезоксон, 6% перекись водорода, 2,5% глутаровый альдегид). Смесью ОБ наполняют стационарные или портативные газовые стерилизаторы. Для упаковки стерилизуемых изделий используют полиэтиленовую пленку или специальный упаковочный материал. Стерилизацию проводят в течение нескольких часов. После стерилизации изделия выдерживают в течение нескольких суток в вентилируемом помещении. Контроль эффективности химической стерилизации проводят с помощью биотестов.

При использовании стерилянтов используют следующие режимы стерилизации:

-6% раствор перекиси водорода, экспозиция 6 часов (изделия из полимерных материалов, стекла, металлов);

-4,8% раствор первомура, экспозиция 15 минут (лигатурный шовный материал).

Обязательными условиями являются: полное погружение изделия в раствор

итемпература раствора не менее 18°С. Если изделия используют не сразу после стерилизации, то их помещают в стерильную коробку и хранят не более 3 суток.

Контроль стерильности изделий медицинского назначения. Контроль изделий, простерилизованных в лечебном учреждении, проводят в специально оборудованных боксах с предбоксниками, соблюдая асептические условия, исключающие возможность вторичной контаминации изделий микробами. В боксах используют бактерицидные облучатели, поверхности обрабатывают моющими и дезинфицирующими средствами, воздух подают в бокс через бактериальные фильтры. Перед входом в бокс сотрудники лаборатории тщательно моют руки, надевают в предбокснике стерильную спецодежду (халаты, бахилы, шапочки, перчатки, маски). В процессе работы в боксе проверяют обсемененность воздуха: на рабочем столе на 15 минут открывают две чашки с питательным агаром, которые затем инкубируют 48 часов при 32°С (допускается рост не более трех колоний неспорообразующих сапрофитов). Контроль стерильности проводят путем прямого посева (погружения) изделий в питательные среды (мелкие изделия или детали

379

+ полное уничтожение микробов в объектах

-обработка объекта дезсредствами

-обработка рук спиртом

5. Фламбирование – это:

-обработка объекта дезсредствами

-обработка рук спиртом

-обработка сухим жаром

+ прокаливание в пламени - обработка поверхности формалином

6.Автоклавирование – это: - обработка сухим жаром

+ обработка паром под давлением - прожигание - прокаливание

- выдерживание в сухожаровом шкафу

7.Пастеризация – это:

+ прогревание при температуре ниже 100ОС

-обработка в автоклаве

-обработка в сухожаровом шкафу

-кипячение

-метод стерилизации

8. Тиндализация – это:

+ метод дробной стерилизации

-метод дезинфекции

-прокаливание

-метод асептики

-метод антисептики

9. Автоклав – это:

-сухожаровой шкаф

-воздушный стерилизатор

+ аппарат для стерилизации паром под давлением

-прибор для дезинфекции

-прибор для дезинсекции

10. К дезинфектантам относятся:

-дистиллированная вода + щелочи

+ хлорсодержащие препараты

-физраствор

+ спирты