
- •Молекулярно- генетические исследования, ПЦР в диагностике заболеваний
- •МОЛЕКУЛЯРНАЯ
- •МОЛЕКУЛЯРНАЯ
- •МОЛЕКУЛЯРНАЯ
- •МОЛЕКУЛЯРНАЯ ДИАГНОСТИКА
- •ПЦР в диагностике заболеваний
- •ПЦР в диагностике заболеваний
- •ПЦР в диагностике заболеваний
- •Что такое ПЦР
- •Особенности метода
- •Изобретение
- •Механизм ПЦР
- •Стадии постановки ПЦР
- •Пробоподготовка (подготовка пробы биологического материала)
- •На чем основана амплификация
- •Механизм ПЦР
- •Детекция
- •Стадии
- •Как все происходит
- •Экспоненциальная
- •Проблема контаминации
- •Варианты контаминации продуктами амплификации
- •Изобретение флуоресцентной ПЦР
- •Флуоресцентные методы в ПЦР
- •Флуоресцентные методы в ПЦР
- •Флуоресцентные методы в ПЦР
- •Флуоресцентные методы в ПЦР
- •Флуоресцентные методы в ПЦР
- •Флуоресцентные методы в ПЦР
- •Флуоресцентные методы в ПЦР
- •Флуоресцентные методы в ПЦР
- •Флуоресцентные методы в ПЦР
- •Флуоресцентные методы в ПЦР
- •Флуоресцентные методы в ПЦР
- •Флуоресцентные методы в ПЦР
- •Флуоресцентные методы в ПЦР
- •Основы «флуоресцентной» ПЦР
- •Основы «флуоресцентной» ПЦР
- •Варианты флуоресцентной ПЦР
- •Кинетические кривые PCR
- •Сравнение принципов качественного и количественного ПЦР анализа
- •Флуоресцентные методы в ПЦР
- •Особенности «флуоресцентной» ПЦР
- •Тест-системы для “real-time” PCR
- •Организация ПЦР-лаборатории
- •Устройство ПЦР-лаборатории с
- •Устройство ПЦР-лаборатории с
- •Устройство ПЦР-лаборатории с флуоресцентной детекцией (количественный анализ)
- •Основы «флуоресцентной» ПЦР
- •Основы «флуоресцентной» ПЦР
- •Нанодиагностика (обнаружение ДНК)
- •Контроль за прохождением реакции
- •Качественный и количественный анализ
- •Эпоха ПЦР
- •Особенности «классической» ПЦР
- •Особенности «флуоресцентной» ПЦР
- •Применение ПЦР
- •Применение ПЦР
- •Медицина
- •Гемотрансфузионные инфекции
- •ПЦР в диагностике ВИЧ
- •Гемотрансфузионные инфекции
- •Оппортунистические инфекции
- •ИППП
- •ПЦР в диагностике ИППП
- •Заболевания дыхательной системы
- •Диагностика наследственных заболеваний
- •Онкология
- •Иммунология
- •Эпидемические инфекции
- •HLA-типирование
- •Ветеринария
- •ПЦР в ветеринарии
- •ГМО - генетически модифицированные организмы
- •Организация контроля за ГМИ
- •Пострегистрационный мониторинг
- •Современные тенденции развития ПЦР
- •Количественный анализ: ДТ- 322
- •Принципы количественного анализа в real-time ПЦР

Диагностика наследственных заболеваний
ПЦР позволяет проводить пренатальную диагностику наследственных заболеваний, таких как:
Фенилкетонурия
Муковисцидоз
Миодистрофия
Дюшенна/БеккераХорея ГентингтонаГемофилия А, В
Болезнь Вильсона-Коноваловаи др. …

Онкология
Основные направления использования ПЦР в онкологической патологии включают:
ДНК-диагностику наследственных форм рака.
ДНК-диагностику спорадических форм рака.
Определение микрометастазов.
ДНК-диагностику биологических канцерогенов (HPV 16 и 18 типов, ВЭБ-инфекции, HBV и HCV, ретровирусы и т.п.).
Доклиническую диагностику опухолей (определения протоонкогенов).
Прогноз заболевания и успешности назначаемой терапии, а также эффективность проведенного лечения на основе
диагностики функциональной активности онкогенов.
Исследование «архивных» биоптатов с установленным клинико-гистологическим диагнозом. Это важно в оценке диагностической значимости предполагаемого маркера и
правильности терапии.

Иммунология
Оценка уровня экспрессии генов, кодирующих белки иммунного ответа в клетках, тканях, тканевых жидкостях
Определение цитокинового профиля:
диагностика заболеваний
патогенетические
особенности
эффективность терапии

Эпидемические инфекции
Созданы и внедрены в практику по федеральному уровню тест-системы для выявления методом ПЦР возбудителей чумы, сибирской язвы, бруцеллеза и холеры
Разработаны ПЦР-тест-системы для индикации вирусов Западного Нила, Крым-Конго геморрагической лихорадки и идентификации вирусов ГЛПС
Доказана возможность использования ПЦР для
детекции наличия ВГА в окружающей среде

HLA-типирование
Подбор доноров для трансплантации органов
Исследования при привычном невынашивании беременности у супружеских пар
Дифференциальная диагностика и
прогноз аутоиммунной патологии

Ветеринария
Существуют тест-системы для выявления ряда заболеваний животных:
-Сибирской язвы, бруцеллеза
-Туберкулеза
-Лептоспироза
-Вируса классической чумы свиней
-Вируса репродуктивно-респираторного синдрома свиней
- вируса трансмиссивного гастроэнтерита
свиней и вируса респираторного коронавируса свиней
- Вируса чумы плотоядных животных

ПЦР в ветеринарии
Этот метод позволяет быстро, в течение суток (что важно при завозе племенного материала извне), с высокой специфичностью выявлять заболевания крупного рогатого скота:ринотрахеит, хламидиоз, лептоспироз, лейкоз и другие.
Для выявления вирусов, бактерий или простейших, вызывающих заболевание, достаточно нескольких капель крови, спермы, молока, мочи или кусочек ткани животного.
Метод является очень чувствительным и позволяет
выявить 2-5 патогенов в образце. Преимуществом этого метода является также возможность
диагностики заболевания на ранних стадиях развития, в инкубационном периоде и при течении в скрытой, нетипичной форме.

ГМО - генетически модифицированные организмы
ПЦР позволяет осуществлять:
•контроль за использованием ГМ организмов (ГМО)
•контроль за наличием и
процентным содержанием ГМ
ингредиентов (ГМИ) в
пище

Организация контроля за ГМИ
Производитель ГМИ |
(Монсанто) |
Научная экспертиза |
(Научно- |
|
исследовательский |
|
институт) |
Заключение о безопасности, разрешение к использованию (Минздрав)
Пострегистрационный |
|
мониторинг |
(Службы контроля) |
|

Пострегистрационный мониторинг
МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ ЗА ГМИ
ХИМИЧЕСКИЕ |
ИММУНОФЕРМЕНТНЫЕ |
ГЕНЕТИЧЕСКИЕ |
МЕТОДЫ |
МЕТОДЫ |
МЕТОДЫ (ПЦР) |
ОПРЕДЕЛЕНИЕ |
ОПРЕДЕЛЕНИЕ |
ДЕТЕКЦИЯ |
ХИМИЧЕСКОГО |
БЕЛКОВОГО |
РЕКОМБИНАНТНОЙ |
СОСТАВА |
СОСТАВА |
ДНК |