Полезные материалы за все 6 курсов / Ответы к занятиям, экзаменам / 2_Физиология_и_экология_микроорганизмов

лудка обнаруживаются спириллы рода Helicobacter, количество которых резко увеличивается при этой патологии.

Микробиота тонкого кишечника. В верхних его отделах присутствуют те же виды симбионтов, как в желудке, в нижних отделах – как в толстом ки-

шечнике.

Микробиота толстого кишечника. Общая масса микрофлоры этого био-

топа составляет от 1 до 5 кг и представлена более чем 500 видами микроорга-

низмов. 1 г фекалий содержит около 1011 бактерий. Более 90% фекальной мик-

рофлоры составляют анаэробы. Наиболее значимые микроорганизмы представ-

лены в Таблице 4.

Таблица 4 – Качественный и количественный состав микрофлоры толстой кишки у здоровых людей*

*– отраслевой стандарт «Протокол ведения больных. Дисбактериоз кишечника». ОСТ 915000.11.0004-2003, Приказ МЗ РФ № 231 от 09.06.2003.

**– представители родов Klebsiella, Enterobacter, Hafnia, Serratia, Proteus, Morganella, Providencia, Citrobacter и др.

41

До недавнего времени считалось, что кишечник новорожденного стерилен, а

заселение его бактериями происходит после рождения. В конце прошлого века появились данные о наличии в первичном кале (меконии) некоторых видов бактерий. В настоящее время существует доказательная база о нестерильности плода, что свидетельствует о внутриутробной бактериальной транслокации

(проникновении бактерий из кишечника матери к плоду).

После рождения процесс колонизации толстого кишечника микроба-

ми включает четыре этапа:

Первый этап происходит от момента рождения до двух недель жизни (ча-

ще обнаруживают стрептококки, кишечные палочки, бактероиды, клостридии и другие бактерии). При естественном вскармливании преобладают бифидобак-

терии, при искусственном – лактобактерии.

Второй этап продолжается до введения прикорма. В этот период увеличи-

вается количество бактероидов.

Третий этап длится до завершения грудного вскармливания и характеризу-

ется повышением количества бактероидов, пептококков и пептострептококков.

Четвертый этап соответствует окончанию грудного вскармливания и со-

храняется в течение жизни.

У детей, находящихся на искусственном вскармливании, завершение фор-

мирования микробиоты кишечника происходит в более ранние сроки.

42

Микробиота мочеполового тракта. До недавнего времени считалось, что почки, мочевой пузырь, матка, простата – стерильны. В настоящее время в моче здоровых женщин идентифицированы 45 родов бактерий с преобладанием лакто-

бактерий и бактероидов. В моче здоровых мужчин обнаружены 72 рода бактерий с доминированием коринебактерий, стрептококков и лактобактерий. В мочевом пу-

зыре могут присутствовать до 14 родов бактерий с преобладанием лактобактерий.

Микробиота влагалища и ее значение для становления микробиоты но-

ворожденных. Микробиота влагалища представляет собой динамическую экоси-

стему. Влагалище при рождении стерильно. Затем, в течение нескольких дней за-

селяется преимущественно грамположительной флорой (анаэробные бактерии,

стафилококки, коринебактерии). В это период рН влагалища нейтральна – 7,0. В

период полового созревания под влиянием половых гормонов (эстрогенов) ваги-

нальный эпителий утолщается и накапливает гликоген. Это, в свою очередь, сти-

мулирует размножение лактобактерий, которые активно расщепляют гликоген с образованием молочной кислоты. рН влагалища снижается до 4,0. Подкисление лактобактериями влагалищного секрета и продукция ими перекиси водорода ведут

кподавлению роста посторонней микрофлоры.

Уженщин репродуктивного возраста молекулярно-генетическими методами выявлены более 265 видов бактерий. Микробный спектр влагалища отличается у женщин различных возрастных категорий и этнических групп. Основными (рези-

дентными) представителями микробиоты данного биотопа являются различные виды лактобактерий. Во влагалище в норме преобладают анаэробные микроор-

ганизмы. Соотношение анаэробы/аэробы составляет 10/1. Анаэробы представлены бифидобактериями, бактероидами, пропионибактериями, пептострептококками и др., аэробы – коринебактериями, стафилококками, стрептококками и др. Реже в со-

ставе микробиоты обнаруживают гарднереллы (грамотрицательные анаэробные коккобактерии), микоплазмы, мобилюнкусы (грамотрицательные палочки в виде полумесяца).

43

В период беременности бактериальное разнообразие уменьшается с преобла-

данием лактобактерий. Ребенок, проходя через родовые пути, контаминируется нормальными представителями микробиоты матери, что в дальнейшем положи-

тельно влияет на формирование его микрофлоры.

Положительная роль нормальной микрофлоры для организма

1.Представители резидентной микрофлоры формируют своеобразную биопленку на поверхности кожи и слизистых оболочек. Это препятствует заселению их бо-

лезнетворными бактериями, попадающими извне. Способность нормальной микрофлоры ограничивать рост патогенов называется колонизационной рези-

стентностью. В частности, для толстого кишечника колонизационную рези-

стентность создают бифидо- и лактобактерии, для влагалища – лактобактерии.

2.Обеспечивает иммуномодулирующую и иммуностимулирующую функции: ока-

зывает постоянное антигенное стимулирующее действие, что способствует раз-

витию лимфоидной ткани кишечника, синтезу секреторных IgА, активации фа-

гоцитоза. Это приводит к формированию и нормальному функционированию иммунной системы.

3.Обладает анатагонистическим действием по отношению к болезнетворным бак-

териям. В частности, кишечная палочка является антагонистом возбудителей

брюшного тифа и дизентерии.

44

4.Инактивирует токсические вещества и способствует их выведению из организма.

5.Участвует в энтеральном синтезе витаминов группы В, К, никотиновой кислоты.

6.Участвует в липидном, водно-солевом обмене, обмене желчных кислот.

7.Улучшает перистальтику кишечника и процессы всасывания питательных веществ в кишечном тракте.

Эубиоз и дисбиоз.

Организм человека и колонизирующие его микробы представляют единую экологическую систему, находящуюся в состоянии динамического равновесия.

Эубиоз – относительно стабильные видовые и количественные соотношения микробов, населяющих организм.

Дисбактериоз или дисбиоз – (от греч. dis – приставка отрицания и «bacteria») состояние микробного дисбаланса организма. Дисбактериоз не является болезнью, но может быть следствием какого-либо заболевания. В России под дисбактериозом обычно понимают дисбактериоз кишечника – это «клинико-лабораторный синдром, связанный с изменением качественного и/или количественного состава микрофлоры толстого кишечника» (Отраслевой стандарт «Протокол ведения больных. Дисбактериоз кишечника». ОСТ 915000.11.0004-2003, Приказ МЗ РФ №

231от 09.06.2003).

Вофициальных международных классификациях болезней (МКБ-10), заболевания с названием «дисбактериоз» не существует.

За рубежом существует диагноз «синдром избыточного бактериального роста». Он ставится при обнаружении в 1мл содержимого тонкой кишки >105 микроорганизмов и/или появлении в ней флоры, характерной для толстой кишки.

Вариантами дисбиоза влагалища являются бактериальный вагиноз и аэробный вагинит.

Бактериальный вагиноз характеризуется истощением лактофлоры, повыше-

нием pH, увеличением доли анаэробных микроорганизмов и отсутствием вы-

раженного воспаления.

45

Аэробный вагинит характеризуется истощением лактофлоры, повышением pH, увеличением доли аэробных микроорганизмов и наличием выраженного

воспаления.

Зависимость патологической реакции от преобладающих во влагалище микроорганизмов (рисунок заимствован из учебного пособия Ворошилиной

Е.С. с соавт., 2018 г.)

ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА

1. Выделение чистой культуры аэробов (продолжение).

III этап исследования. Через 24 часа на скошенном МПА обнаруживают одно-

родный рост в виде сплошного налета желтоватого цвета, а в МПБ – диффузно-

мутящий рост. С целью проверки чистоты выделенной культуры готовят мазок,

окрашивают по Граму и микроскопируют. Для оценки чистоты культуры необ-

ходимо просматривать не менее 10 полей зрения. Обнаружение в мазках со ско-

шенного МПА только гроздьевидно расположенных грамположительных кокков,

а в мазках из МПБ – грамотрицательных палочек свидетельствует о чистоте выде-

ленных культур.

46

Для биохимической идентификации грамотрицательных палочковидных бакте-

рий до вида используют набора реагентов «Мультимикротесты». Планшеты с тест-

системами помещают в термостат при температуре 370С на 24 часа.

IV этап исследования. Учет биохимических свойств выделенной культуры:

Вывод: из смеси бактерий выделены две культуры. Первая культура иден-

тифицирована как E.coli на основании морфо-тинкториальных (грамотрицательные палочки), культуральных (полупрозрачные, гладкие колонии средних размеров) и

биохимических свойств. Вторая культура идентифицирована как Staphylococcus spp.

на основании морфо-тинкториальных (грамположительные гроздьевидно располо-

женные кокки) и культуральных (гладкие выпуклые колонии золотистого цвета)

свойств.

2. Санитарно-бактериологическое исследование чистоты воздуха в бактериоло-

гической лаборатории.

I этап исследования. Производят посев воздуха аспирационным методом с по-

мощью аппарата Кротова. Для определения микробного числа воздух засевают в объеме 100 л на чашку с МПА. Для определения санитарно-показательного микроба

(S.aureus) воздух засевают в объеме 250 л на чашку с ЖСА. Посевы инкубируют в термостате при температуре 37°С 24-48 часов.

II этап исследования. Подсчет выросших колоний и определение микробного числа и количества S.aureus в 1 м3 воздуха.

Микробное число = количество выросших колоний на МПА × 10

Количество S.aureus в 1 м3 воздуха = количество колоний, выросших на ЖСА × 4.

3. Микроскопия мазков чистых культур представителей микробиоты толстого кишечника: бифидобактерии, лактобактерии, бактероиды, эшерихии, энтеро-

кокки, стафилококки, клостридии, протей, клебсиеллы, кандиды.

47

Занятие № 4

Тема. Контрольное занятие по разделу «Физиология и экология микроорганиз-

мов».

Цель занятия. Проверить теоретические и практические знания, полученные на занятиях по разделу «Физиология и экология микроорганизмов», а также на лекциях №№ 2,3.

Контрольное занятие состоит из следующих этапов:

I. Тест-контроль.

II. Устный ответ.

III. Решение ситуационных задач.

Тестовый контроль

1.Связанная вода в бактериальной клетке может находиться в виде

+коллоидносвязанной

-связанной с нуклеоидом + ионносвязанной

-электронносвязанной

-транспозонносвязанной

-антигенносвязанной

2.Функции свободной воды в бактериальной клетке

-обеспечивает энергетику клетки

+является универсальным растворителем

+обеспечивает процессы осмоса и диффузии - определяет специфичность бактерий - определяет устойчивость во внешней среде - предохраняет клетку от фагоцитоза

3.Значение белков для бактериальной клетки - обеспечивают энергетический процесс

- обусловливают устойчивость к УФ-облучению

+являются экзотоксинами

+выполняют строительную и ферментативную функции - обусловливают устойчивость к высоким температурам

+участвуют в транспорте питательных веществ

48

4.Значение углеводов для бактериальной клетки

+обеспечивают энергетику клетки

-обеспечивают процессы осмоса и диффузии + входят в состав эндотоксинов

-участвуют в транспорте питательных веществ

-выполняют строительную функцию

-обеспечивают устойчивость во внешней среде

5.Значение липидов для бактериальной клетки + определяют устойчивость во внешней среде

+ обеспечивают энергетику клетки при недостатке углеводов

-придают жесткость клеточной стенке

+входят в состав эндотоксинов - являются экзотоксинами

- выполняют ферментативную функцию

6.Пирогенными свойствами обладают бактериальные - белки - углеводы

+липиды

-нуклеиновые кислоты

7.Общий тип питания бактерий

-голотрофный + голофитный

-гетеротрофный

-голозойный

8.Механизмы поступления питательных веществ в бактериальную клетку + простая и облегченная диффузия

-пиноцитоз, эндоцитоз

+активный механизм - фагоцитоз - пассивный транспорт

- активная диффузия

9.Бактерии по типу питания классифицируют на

+аутотрофы

-фототрофы + гетеротрофы

-хемотрофы

-микроаэрофилы

-облигатные анаэробы

49

10.Патогенные микроорганизмы-гетеротрофы усваивают углерод и азот из

-неорганических соединений, используя солнечную энергию

-неорганических соединений, используя энергию химических реакций

+сложных органических соединений, используя энергию химических реакций

-сложных органических соединений, используя солнечную энергию

11.Обязательные требования, предъявляемые к питательным средам + стерильность

+ оптимальные значения pH, изотоничность + необходимый набор питательных веществ

-наличие индикатора, гипертоничность

-гипертоничность, отсутствие индикатора

-гипотоничность

12.К плотным питательным средам относят

+ МПА

-селенитовую

-МПБ

+ Эндо

-1% пептонную воду + кровяной агар

13.К жидким питательным средам относят

-Эндо

+МПБ

+1% пептонную воду - кровяной агар - сывороточный агар - МПА

14.По назначению питательные среды бывают

+элективными - жидкими

+дифференциально-диагностическими - полужидкими - плотными

+специальными

15.Транспортные питательные среды предназначены для - изучения отдельных видов и свойств бактерий

+первичного посева и доставки материала в лабораторию - дифференциации отдельных видов микробов - накопления возбудителя

50