Глава2. Компоненты активного ядрышка.

• Ядрышковый организатор (фибриллярный центр)-это хроматин, в котором локализованы гены рРНК. Он является наиболее стабильной частью ядрышка и сохраняется при делении клетки, когда функционирование ядрышек временно прекращается. Ядрышки клеток человека могут содержать до 30 фибриллярных центров. В электронном микроскопе фибриллярные центры выглядят как небольшие округлые образования низкой электронной плотности, состоящие из фибрилл. Эти фибриллы представляют собой нити ДНК, содержащие неактивные гены рРНК. Активно транскрибируемые гены рРНК локализуются по периферии фибриллярных центров. Рибосомные гены представлены в геномах эукариот сотнями и тысячами копий. У человека имеется 540 копий рибосомных генов, но в ядрышке активируется не более 140. У амфибий число копий может достигать 20000. Рибосомные гены собраны в кластеры, локализованные в районах вторичных перетяжек хромосом.Фибриллярные центры отличаются пониженным содержанием гистона НТ и избирательно импрегнируются АgNО3. Это свойство фибриллярных центров обусловлено особыми белками, которые содержат аминокислоту диметиларгинин и сильно фосфорилированы.

• Плотный фибриллярный компонент окружает фибриллярные центры, отличаясь от них повышенной электронной плотностью. Он образован фибриллам.Эти фибриллы состоят из высокомолекулярного предшественника рРНК, который образуется на границе с фибриллярным центром путем транскрипции рибосомных генов РНК-полимеразой I. Они также содержат рибосомные белки, которые связываются с первичным транскриптом. В дальнейшем происходит расщепление предшественника рРНК на более короткие фрагменты при помощи нуклеаз. Специфическими маркерами процессинга рРНК являются белки нуклеолин и фибрилларин.

• Гранулярный компонент состоит из гранул,которые заполняют пространство вокруг фибрилл. Эти гранулы содержат РНК и белки и являются предшественниками субъединиц рибосом различной степени зрелости. Гранулярный компонент возникает в результате расщепления, фибриллярного компонента. Если обработать клетки антибиотиком актиномицином О, который подавляет синтез РНК, то происходит сегрегация фибриллярного и гранулярного компонентов и постепенная деградация последнего. Иногда фибриллярный и гранулярный компоненты ядрышка образуют нуклеолонему.

• Околоядрышковый гетерохроматин окружает ядрышко по периферии, но может также заходить в него между петлями нуклеолонемы. В электронном микроскопе видно, что он состоит из хроматиновых фибрилл диаметром 30 нм. Околоядрышковый гетерохроматин, вероятно, определяет локализацию ядрышка в клеточном ядре.

• Белковый сетчатый матрикс выявляется в ядрышке после экстракции из него РНК, ДНК и белков. Он представлен рыхлой фибриллярной сетью, которая заполняет весь объем ядрышка. Белковый матрикс ядрышка является составной частью ядерного матрикса.

Рис.2 – компоненты активного ядрышка