
- •Тема 1 Морфология микроорганизмов. Бактериоскопический метод диагностики.
- •Предмет и задачи медицинской микробиологии.
- •Вклад отечественных ученых в развитие микробиологии и иммунологии
- •Оснащение и режим работы бактериологической лаборатории.
- •Стерилизация и дезинфекция.
- •4. Строение микроскопа.
- •Бактериоскопия.
- •Принципы классификации микроорганизмов.
- •Морфология микробов:
- •Структура бактериальной клетки
- •9.Методы окраски микроорганизмов.
- •10.Приготовление препарата для микроскопии
- •Лекция 2 Тема: Физиология бактерий. Методы культивирования бактерий. Бактериологический метод диагностики. План
- •Питательные среды, классификация и требования, предъявляемые к ним.
- •Материал для бактериологического исследования и правила его забора.
- •Выделение и идентификация чистой культуры бактерий. Принципы культивирования аэробных, факультативно-анаэробных и анаэробных бактерий.
- •4. Бактериологический метод диагностики инфекционных заболеваний.
- •5. Методы выделения чистой культуры.
- •6.Идентификация микроорганизмов.
- •7.Методы изучения биохимической активности бактерий.
- •8. Факторы агрессии.
- •9. Методы определения чувствительности к лекарственным препаратам
- •10. Применение антибиотиков.
- •11. Принципы рациональной антибиотикотерапии:
- •Тема 3. Генетика микробов
- •1.Строение и репликация генома бактерий
- •2.Изменчивость генома бактерий
- •3. Особенности генетики вирусов
- •4. Применение генетических методов в диагностике инфекционных болезней
- •5. Генная инженерия. Методы генной инженерии. Практическое использование.
- •Тема 4. Диагностические препараты
- •1.Диагностические препараты.
- •2.Антигены микроорганизмов
- •3.Получение и использование антигенов для диагностики
- •4. Получение и использование сывороток для диагностики
- •Тема 5. Серологический метод лабораторной диагностики
- •Реакции антиген-антитело и их практическое применение. Виды серологических реакций
- •Реакции агглютинации (ра), их применение.
- •3. Реакции преципитации (рп), их виды, применение
- •4. Реакция нейтрализации (рн)
- •5. Реакции лизиса (рл) и связывания комплимента (рск), их применение
- •Тема 6. Молекулярно-генетический метод лабораторной диагностики инфекционных заболеваний
- •1. Метод молекулярной гибридизации
- •2. Этапы постановки пцр. Применение пцр в диагностике бактериальных и вирусных инфекций
- •Тема 7. Общая вирусология. Методы лабораторной диагностики
- •1. Строение и классификация вирусов
- •Медицинское значение фагов
- •2. Основные методы диагностики вирусных инфекций
- •3. Вирусологический метод лабораторной диагностики
- •4. Методы идентификации выделенных вирусов
- •Тема8: Частная вирусология
- •2.Реакция торможения гемагглютинации ртга для серодиагностики гриппа.
- •3. Орви – острые респираторные вирусные инфекции.
- •4. Характеристика энтеровирусов.
- •5. Характеристика дерматропных вирусов
- •6. Характеристика арбовирусов
- •7.Вирус бешенства.
- •8.Вирусы гепатитов (а в с д е g).
- •9. Ифа иммуноферментный анализ
- •10.Возбудители медленных вирусных инфекций (мви)
- •11. Онкогенные вирусы и ретровирусы
- •Частная бактериология
- •Тема 9: Возбудители гнойно-септических процессов. Клостридиозы. План
- •1. Этиологическая структура внутрибольничных инфекций.
- •2.3.Энтерококки
- •2.4. Эшерихии.
- •2.5. Протеи
- •2.7. Нейссерии
- •2.8. Серрации
- •2.9. Бактериоиды.
- •2.10. Пептококки.
- •2.12. Кандиды (род Candida)
- •2.13. Аспергиллы (род Aspergillus)
- •2.14. Пенициллы (род Penicillium)
- •2.15. Мукор (род Mukor).
- •3. Лабораторная диагностика
- •4. Факторы агрессии микроорганизмов (факторы патогенности , вирулентности).
- •Факторы агрессии грибов
- •5. Источники и пути передачи инфекции
- •Пути заражения человека
- •Способы заражения
- •Определение чувствительности бактерий к антибиотикам (см. Тема 2., вопр.9).
- •Специф. Профилактика и лечение
- •8. Клостридиозы
- •Тема 10.Возбудители острых кишечных инфекций и пищевых отравлений. Дисбактериоз кишечника.
- •2. Возбудители пищевых токсикоинфекций и интоксикаций
- •3.Возбудители кишечных инфекций
- •3.1. Возбудители эшерихиозов
- •3.2Возбудители дизентерии
- •3.3. Возбудители брюшного тифа и паратифов.
- •3.5. Возбудители кишечного иерсиниоза и псевдотуберкулеза
- •3.6. Возбудители холеры
- •4.Дифференциально – диагностические и элективные питательнае среды
- •Тема11. Возбудители капельных инфекций
- •2. Возбудитель коклюша
- •Тема12. Возбудители туберкулеза и актиномикоза
- •Возбудители туберкулеза
- •Возбудители актиномикоза
- •1. Возбудители туберкулеза
- •2. Возбудители актиномикоза
- •Тема13 Возбудители венерических болезней
- •2.Возбудитель гонореи
- •3.Хламидии. Возбудитель урогенитального хламидиоза
- •4.Возбудитель мягкого шанкра
- •5.Возбудитель трихомониаза (трихомоноза)
- •Тема14 Возбудители зоонозных инфекций: чумы, туляремии, бруцеллеза, сибирской язвы,боррелиозов, лептоспироза.
- •1.Возбудитель чумы
- •2.Возбудитель туляремии
- •3.Возбудители бруцеллеза.
- •4.Возбудитель сибирской язвы
- •5.Возбудители боррелиозов –
- •6.Возбудители лептоспироза
- •Тема 15. Медицинская микология
- •2. Факторы агрессии.
- •3. Способы культивирования.
- •5. Серологическое, аллергологическое, биологическое, гистологическое исследование.
- •8. Микозы, вызываемые условно – патогенными грибами.
- •Тема 16. Санитарная микробиология.
- •1. Санитарно-показательные микроорганизмы.
- •2. Санитарно – бактериологическое исследование воды, воздуха, пищевых продуктов , лекарств, лпу.
- •2. Номенклатура санитарно-бактериологического исследования воды, воздуха, пищевых продуктов, лекарств, лпу.
- •2.1. Вода.
- •2.2. Воздух.
2.2. Воздух.
Санитарно-микробиологические показатели воздуха нормируются в зависимости от назначения помещений и определяются седиментационными или аспирационными методами.
Методы исследования.
Аспирационный метод отбора проб – принудительное осаждение микробов из воздуха с помощью пробоотборника аэрозоля бактериологического (ПАБ – 1) или аппарата Кротова.
Седиментационный метод - осаждение микробов на поверхность плотной питательной среды. Чашку Петри с питательной средой ставят на горизонтальную поверхность и оставляют открытой на определенное время. Затем чашку закрывают и инкубируют в термостате. С помощью этого метода определяют обсемененность воздуха, используя формулу Олялянского: на 100 см2 поверхности агара за 5 минут оседают бактерии из 10 л воздуха (10 дм3).
Общее микр. число ОМЧ воздуха - КОЕ в /м3 подсчитывают колонии, выросшие на агаре при посеве определенного объема воздуха и инкубации в течение 24 ч при 37 0С и 24 ч при комнатной температуре.
Присутствие St. aureus. В определенном объеме воздуха определяют наличие золотистого стафилококка (воздух засевают на желточно-солевой агар, вырастают характерные колонии гр(+) кокков). В операционном блоке стафилококков не должно быть!
Присутствие грибов. Определяют в воздухе наличие в воздухе дрожжеподобных и плесневых грибов по количеству колоний, выросших на среде Сабуро за 96 ч при 22 - 28 0С.
Состояние воздуха в отделении стационара в табл.11.3 (стр. 422).
2.3. Почва. Санитарно-микр. исследования почвы регламентируются инструкциями по предупредительному и текущему надзору.
Предупредительный надзор осуществляют при планировке, строительстве и реконструкции вновь заселяемых участков, при выборе мест для строительства ЛПУ, санаториев, детских учреждений, при решении вопросов водоснабжения и канализации, санитарной оценке пляжей, мест отдыха и др.
текущий сан. надзор осуществляют:
а) при оценке сан. состояния почвы, ее способности к самоочищению после загрязнения (н., почву детских садов, больниц, зон отдыха исследуют 2 раза в год);
б) при контроле за сточными водами и отбросами (1 – 4 раза в месяц);
в) по эпидемиологическим показаниям для выяснения возможного пути передачи инфекционных заболеваний.
При текущем надзоре рекомендуется сокращенный анализ. Включает: определение ОМЧ, БГКП, титра строгих анаэробов, термофильных бактерий и нитрифицирующих бактерий.
По эпидемиологическим показаниям в ходе исследований проводят обнаружение пат м-ор-ов (табл.11.2).
Отбор проб. «Метод конверта» - отбирают пробы с прямоугольного участка 5х5 из 5 точек с глубины 20 – 25 см в условиях асептики для приготовления смешанной пробы в 1 кг.
Методика исследования. ОМЧ пробы определяют глубинным посевом (на плотной среде) из 10-кратных разведений или методом прямой микроскопии.
При невысокой степени фекального загрязнения, БГКП в почве определяют методом бродильных проб или мембранных фильтров; при высокой степени – прямым посевом почвенной суспензии (1 : 10) на среду Эндо. Способность почвы к самоочищению определяет перфрингенс-титр (минимальное количество почвы, в котором определяются Clostridium perfringens). При фекальном загрязнении почвы эшерихии исчезают через 4 – 5 мес., а клостридии обнаруживают в титре 0,01 г. Перфрингенс-титр определяют глубинным посевом на среду Вильсона-Блера (среда Вильсона Блера – железосульфитный агар) из 10-кратных разведений почвенной суспензии (среда окрашивается в черный цвет, если есть клостридии). Определяют число термофильных бактерий (инкубируют при 60 0С 72 часа). Для определения навозного загрязнения титр нитрифицирующих бактерий определяют посевом 10-кратных разведений почвенной суспензии на жидкую среду Виноградского (указывает на процессы самоочищения). На самоочищение почвы указывает также присутствие бацилл, грибов, актиномицетов.
Титр БГКП и перфрингенс-титр для сильнозагрязненных почв соответственно 0,009 и ниже, 0,00009 и ниже; для чистых почв коли-титр – 1,0 и выше, перфрингенс-титр – 0,01 и выше.
Требования к микроб. чистоте почв в табл.11.2 (стр. 421).
2.4. Пищевые продукты.
Санитарный контроль пищевых продуктов предусматривает оценку по следующим показателям:
- величине ОМЧ;
- наличию БГКП;
- присутствию условно-патогенных бактерий (кишечной палочки, золо- тистого стафилококка, протеев, клостридий);
- наличию пат. микробов (сальмонелл и др.);
- наличию специфических возбудителей микробной порчи продукта.
Основными показателями качества продуктов являются ОМЧ и наличие патогенных микробов.
Отбор проб. Пробы отбирают стерильно (жидкие, твердые, сыпучие).
Методика исследования. Пробы гомогенизируют и готовят из них серийные разведения (1:10, 1:100, 1:1000 и т.д.) Иногда используют для этого ИХН с добавлением твина – 80 или 0,1% пептонную воду.( ИХН – изот. р-р. хлорида натрия 0,85%)
Определение ОМЧ. (Методика, как для воды, так и для почвы). Посевы инкубируют при 30 0С 72 часа.
Определение БГКП (как для воды, как для почвы) – кишечную палочку, энтерококк, золотистый стафилококк, протей, клостридий.
Определение St. aureus. Материал засевают на солевой бульон в пробирку с 5 мл среды, для накопления St. aureus инкубируют при 37 0С 24 ч. При наличии роста (помутнении среды) делают высевы на желточно- солевой агар для получения изолированных колоний, которые затем идентифицируют по культ. свойствам, морфологии (в мазке по Граму), биохимическим свойствам.
Определение сальмонелл. Исследуемый материал вносят в селенитовый бульон для обогащения и инкубируют при 37 0С.
Через сутки делают высевы на плот. дифф. среды (висмут-сульфитный агар) и идентифицируют подозрительные колонии по культ., биохимическим свойствам.
Требования к некоторым продуктам по микробиологическим показателям в табл.11.4, стр. 426.
2.5. Санитарный режим ЛПУ.
ЛПУ – больницы, роддомы, лечебно-диагностические стационары и центры. Для того, чтобы свести к минимуму возможности возникновения и распространения ВБИ в учреждениях необходимо поддерживать санитарный режим.
Санитарный режим ЛПУ включает организационные меры:
- (контроль за поступлением, пребыванием и выпиской пациентов, службой крови и ее препаратов, инвазивными манипуляциями и антимикробными средствами, за режимом стерилизации и дезинфекции в ЛПУ;
- медицинские осмотры и обследование персонала;
- работа только в спецодежде;
- соблюдение сроков хранения стерильных материалов;
- соблюдение правил личной гигиены;
- влажную уборку помещений с использованием дезинфицирующих средств;
- дезинфекцию УФ воздуха в операционном блоке, процедурных и др. каб.;
- соблюдение правил использования и сроков хранения дезинфицирующих и антисептических средств;
- дезинфекцию использованных материалов;
- проведение сан.- микробиологических исследований.
Проводят исследование рук хирургов, кожи операционного поля, перевязочного и шовного материала, инструментов, воздуха, поверхностей оборудования в различных палатах. Проводят микробиологическое исследование оборудования, рук и спец, одежды персонала. Пробы отбирают методом смыва стерильным ватным тампоном, помещенным в пробирки со стерильным ИХН или пептонной водой.
Перед исследованием смывную жидкость с тампоном встряхивают в течение 10 минут и высевают. Определяют БГКП, St. aureus, (как при исследовании пищевых продуктов). В смывах не должно быть БГКП, синегнойной палочки, протеев, стафилококка.