2.15. Мукор (род Mukor).

Мукор – усл. – пат.грибы, низшие, фикомицеты, с несептированным мицелием, зигомицет.

Широко распространен в окружающей среде, в почве, воздухе, на гниющих растениях, овощах, плодах. Вызывают зигомикоз (фикомикоз) у иммунодефицитных лиз (легочный зигомикоз, поражение ЖКТ, кожи, мозга и др.органов). Споры попадают в орг-м аэрогенным, алиментарным и контактным путем. Гифы гриба несептированы, размножение спорами и половое – зигоспорами.

3. Лабораторная диагностика

Микроб. диагн. Исследуют кожу, волосы, ногти, подкожную клетчатку, полипы, отделяемое пазух носа, содержимое абсцессов мозга, соскобы со слизистых оболочек, кал, биоптаты тканей. Материал берут, соблюдая правила асептики.

Для диагностики микозов применяются микроскопические (в том числе гистологические), микологические (культуральные), аллергические, серологические, экспериментальные, молекулярно- биологические и др.методы исследования. Ведущее значение в диагностике микозов имеют морфологические методы.

Параллельно с микологическим проводится бактериологическое исследование патологического материала. Выделение чистой культуры позволяет выявить ее морфол., культ., биохим. и др. признаки, по которым определяют принадлежность возбудителя, идентифицируют его.

При микроскопическом исследовании неокрашенные (нативные) и окрашенные препараты из волос, соскобов с ногтей, чешуек кожи и др.тканей. Нативные препараты обрабатывают 10-30% р-ром КОН для растворения кератина и просветления препарата. Окончательное заключение дают после микологического исследования материала.

Для окрашивания препаратов используют методы окраски: по Граму, по Ром-Гимзе и другие, специфические для разных микозов.

Микологическое (культуральное) исследование направлено на выделение чистой культуры гриба и ее идентификацию. Пит.среды: Сабуро, сусло-агар, Чапека, кукурузный, рисовый и др. Грибы хорошо растут и на средах для бактерий (кровяной, шоколадный агар и др.).

Для первичной дифференциации грибов используют хромогенный агар CHROM. Колонии грибов на агаре CHROM отличаются по цвету: белые, кремовые, желтые, коричневые, черные, розовые, красные и т.д.

Среда Сабуро содержит глюкозу (мальтозу), пептон, агар-агар (бульон Сабуро без агара).

Дифференциальные среды для грибов: кукурузный агар, рисовый отвар, картофельный агар и др.

Культивируют грибы при температуре 22-28⁰С в течение 2-4 нед. Чистые культуры из смешанных получают после рассевов до изолированных колоний на кровяном агаре или после обработки соляной кислотой (для уничтожения бактерий). Выделенные культуры гриба идентифицируют по внешнему виду, форме колоний, их консистенции, цвету, микроскопическому строению – ветвлению мицелия, расположению конидиеносцев, спор, по биохим. и др.признакам, определяют размеры грибов с помощью окуляра – микрометра.

Серологическое исследование. Реакции: РА, РП, РСК, РПГА, ИФА, ИБ, РИФ проводят с антигенами из грибов по обычным методикам для диагностики др.инфекций.

Аллергологическое исследование. Аллергические пробы ставят внутрикожным введением аллергенов (взвеси из убитых грибов, фильтратов культур, полисахаридных и белковых фракций из клеток или клеточных оболочек возбудителей). Учет по 5-ти балльной системе через 20 мин. (немедленные) и через 24-48 час.(замедленные реакции).

Для выявления микотической сенсибилизации орг-ма применяют иммунологические тесты in vitro:дегрануляции базофилов (крови и тканевых), др.тесты ГНТ( подр.1.5.2.,стр.85), для ГЗТ – реакцию торможения миграции фагоцитов РТГА, бласттрансформации лимфоцитов и др.(подр.1.6., стр.89).

Биологическое исследование. Заражение эксперимент. животных проводят для выделения чистой культуры гриба, изучения патогенных св-в возб., испытания новых лекарств. препаратов. Результаты учитывают по характеру выделенной культуры, данным вскрытия, гистологического исследования на наличие гриба и р-ции макроорганизма.

Гистологическое исследование. Позволяет обнаружить гриб в тканях, его морфологию, особенности патол. процесса в организме.

ПЦР. Разработаны тест-системы ПЦР для 40 видов грибов (Candida albiccans), ПЦР-зонды.

3.1. Методы выделения чистых культур.

Основаны на механическом разъединении микроорганизмов на поверхности питательной среды; это позволяет получить их рост в виде изолированных колоний. Исслед. материал из выделенных колоний сеют на среду и инкубируют (см. тема 2).