17. Реакции агглютинации (ра), их применение.

При РА происходит склеивание антителами корпускулярных антигенов (бактерий, эритроцитов, частиц латекса и др.). Образуется осадок (агглютинат) или хлопья. В РА участвуют антитела, относящиеся к IgG и IgM. РА используют для определения антител в сыворотке крови или бруцеллезе (реакция Райта, Хеддельсона), брюшном тифе и паратифах (реакция Видаля) и др. инфекционных болезнях, а также для определения возбудителя, выделенного от больного, для определения групп крови.

Варианты реакции агглютинации: развернутая, ориентировочная, непрямая и др.

Развернутая РА — для определения у больного антител: к разведениям сыворотки крови больного добавляют диагностикум (взвесь убитых микробов), инкубируют при 37⁰С и отмечают наибольшее разведение (титр) сыворотки, при котором призошла агглютинация, т.е. образовался осадок.

Характер и скорость агглютинации зависят от вида антигена и антител.

Реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации (РНГА, РПГА) основана на исспользовании эритроцитов (или латекса) с адсорбированными на их поверхности антигенами и антителами, взаимодействие которых с соответствующими антителами или антигенами сыворотки крови больных вызывает склеивание и выпадение эритроцитов в осадок (в пробирке или ячейке). Эритроциты участвуют пассивно.

Реакция торможения гемагглютинации (РТГА) основана на блокаде, подавлении вирусов антителами иммунной сыворотки и вирусы теряют свойство агглютинировать эритроциты. РТГА применяют для диагностики вирусных болезней, вирусы которых (вирусы гриппа, краснухи и др.) могут агглютинировать эритроциты различных животных.

3. Реакции преципитации (рп), их виды, применение

Преципитация — процесс, когда происходит агрегация с растворимыми антигенами; если же антиген представлен корпускулами, специфическая агрегация таких антигенов называется агглютинацией.

В РП осадок комплекса антиген-антитело называется преципитатом. Реакцию провоят в пробирках, наслаивая растворимый антиген на иммунную сыворотку. На границе двух растворов образуется непрозрачное кольцо преципитата (реакция кольцепреципитации). Если в качестве антигенов в реакции кольцепреципитации используют прокипяченные и профильтрованные водные экстракты органов или тканей, такая реакция называется реакцией термопреципитации (реакция Асколи).

Реакция двойной иммунодиффузии по Оухтерлони выполняется на агаровых пластинках, в лунках которых диаметром 2-3 мм раздельно помещают антигены и иммунные сыворотки, они диффундируя в агар, в месте «встречи» образуют преципитат в виде полосы.

При постановке реакции радиальной иммунодиффузии вносится сыворотка в агаровый гель. В лунки геля коллоидный раствор антигена, который диффундируя в гель, образует кольцевые зоны преципитации вокруг лунок. Диаметр кольца преципитации пропорционален концентрации антигена. Используют для определения содержания в крови иммуноглобулинов различных классов, компонентов системы комплемента и др.

Иммуноэлектрофорез — сочетание метода электрофореза и иммунопреципитации: смесь антигенов разделяется в геле электрофорезом, затем паралельно зонам электрофореза вносят иммунную сыворотку, антитела которой диффундируют в гель и в месте «встречи» с антигеном образуют линии преципитации.

Реакция флоккуляуии (по Рамону) — появляется опалесценция или хлопьевидная масса (иммунопреципитация) при реакции токсин-антитоксин или анатоксин-антитоксин. Применяется для определения активности анатоксина или антитоксической сыворотки.