3.Получение и использование антигенов для диагностики

Биологическая промышленность выпускает различные биологические препараты: вакцины, лечебно- профилактические иммунные сыворотки и иммуноглобулины , диагностические антигены и аллергены, бактериофаги. Принцип и методика получения диагностических антигенов аналогичны приготовлению инактивированных вакцин. Антигены содержат убитые целые микробные клетки или экстракты, полученные из соответствующих микроорганизмов.

Аллергены в качестве диагностических препаратов представляют собой экстракты из бактериальной массы. Их используют при аллергических диагностике туберкулеза (туберкулин), бруцеллеза ( бруцеллин) туляремии (тулярин), сибирской язвы (антраксин).

4. Получение и использование сывороток для диагностики

Диагностические иммунные сыворотки получают или от иммунизированных животных (гетерологичные сыворотки), или переболевших, а также вакцинированных людей (гомологичные сыворотки). Гетерологичные сыворотки готовят путем гипериммунизации лошадей и др. животных, т.е. многократного введения животным больших доз антигена по схеме и на пике антителообразования у иммунных животных забирают кровь, освобождают её от форменных элементов и фибрина, фильтруют, стандартизируют по концентрации антител (антитоксинов, агглютининов вируснейтрализирующих антител и т. д.), содержанию белка и др. свойствам. Такая нативная сыворотка содержит много балластных белков и имеет низкую концентрацию антител. Из нее получают иммуноглобулины путем выделения, очистки и концентрирования их ферментативным способом в сочетании с диализом, осаждением, хроматографией.

Для получения гомологичных иммуноглобулинов и их активных фрагментов используют кровь иммунных (вакцинированных, переболевших) людей или специально вакцинированных доноров, плацентарную и абортную кровь.

Иммунные сыворотки, иммуноглобулины, их фрагменты подразделяются на антитоксические, антибактериальные и противовирусные. К антитоксическим относятся сыворотки против дифтерии, столбняка, газовой гангрены, ботулизма, т.е. сыворотки, содержащие в качестве антител антитоксины, нейтрализующие специфические токсины. Антибактериальные сыворотки содержат агглютинины, преципитины, комплементсвязывающие и др. антитела к возбудителям болезней (дизентерия, коклюш, чума). Противовирусные сыворотки (гриппозная, коревая, антирабическая и др.), содержат вируснейтрализирующие, комплементсвязывающие и др. противовирусные антитела.

Тема 5. Серологический метод лабораторной диагностики

План лекции

1. Реакции антиген-антитело и их практическое применение. Виды серологических реакций.

2. Реакции агглютинации, их применение.

3. Реакции преципитации, их виды, применение.

4. Реакция нейтрализации.

5. Реакции лизиса (РЛ) и связывания комплимента (РСК), их применение.

6. Реакции иммунофлюоресценции.

7. Иммуноферментный анализ.

16. Реакции антиген-антитело и их практическое применение. Виды серологических реакций

Взаимодействие антигена с антителом проявляется в форме различных иммунных, или серологических (от лат. Serum — сыворотка) реакций. В связи с их высокой чувствительностью и специфичностью они нашли широкое применение в диагностике болезней. Серологические реакции применяют для двух целей. Во-первых, по известному антигену — диагностикуму, определяют в исследуемой сыворотке наличие и количественное содержание специфических к данному антигену антител титрованием. Титр иммунной сыворотки — максимальное разведение, которое дает положительную реакцию. Во-вторых, с помощью известного антитела, т.е. диагностической иммунной сыворотки, определяют наличие в исследуемом материале специфического микробного антигена или осуществляют серологическую идентификацию выделенного возбудителя.