новая папка / Лекция 5 (2) ИММУНКА-2
.doc
Реакция агглютинации
РА (от лат. склеивание) – происходит связывание антителами корпускулярных антигенов (бакт., эритр.и др.клеток, нерастворимых частиц с адсорбированными на них антигенами, а также макромолекулярных агрегатов). Реакция протекает при наличии электролитов (изот. р-р NaCl – 0.85%).
Варианты: развернутая, ориентировочная, непрямая и др. Образуются хлопья или осадок (клетки, склеенные антителами, имеют 2 или более антигенсвязывающих центра) (стр.284, рис.13.1).
РА используют для:
1). определения антител в сыворотке крови больного, например, при бруцеллезе (р.Райта, Хеддельсона), брюшном тифе и паратифах (р.Видаля) и др.инф.бол.;
2). определения возбудителя, выделенного от больного;
3). определения групп крови с использованием моноклональных антител против аллогенов эритроцитов.
Развернутая РА – для определения у больного антител: к разведениям сыворотки крови больного добавляют диагностикум (взвесь убитых микробов) и через несколько часов инкубации при 370 С отмечают наиб. разведение сыворотки (титр сыворотки), при котором произошла агглютинация, т.е. образуется осадок.
Характер и скорость агглютинации зависят от вида антигена и антител.
Реакция агглютинации с О – диагностикумом (бактерии, убитые нагреванием, сохранившие термостаб. О – антиген) происходит медленнее в виде мелкозернистой агглютинации.
Реакция агглютинации с Н – диагностикумом (бактерии, убитые формалином, сохранившие термолабильный жгутиковый Н – антиген) – крупнохлопчатая и протекает быстрее.
Ориентировочная РА – для определения возбудителя от больного применяют диагн. антитела (агглют. сыворотку), т.е. проводят серотипирование возбудителя. Ставят реакцию на предметном стекле: к капле диагностической агглютинирующей сыворотки в разведении 1:10 или 1:20 добавляют ч.к. возбудителя, выделенного от больного (контроль – вместо сыворотки капля
р – ра хлорида). В капле с сывороткой и микробами появляется хлопьевидный осадок.
Развернутая РА (при положительной реакции на стекле) ставится в пробирках с разведениями агглютинирующей сыворотки, к которым добавляют по 2-3 капли взвеси возбудителя. Реакцию считают (+), если агглютинация отмечается в разведении, близком к титру диагностической сыворотки. В контроле – нет осадка, равномерная муть.
РНГА, РПГА – реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации – основана на использовании эритроцитов с адсорбированными на их поверхности антигенами или антителами (стр.285, рис.13.2). РОНГА – для обнаружения ботулин. токсина.
Реакция коагглютинации. Клетки возбудителя опр.с помощью стаф., предварительно обработанных иммунной диагн. сывороткой. Стафилококки, содержащие белок А, имеют сродство к Fс – фрагменту иммуноглобулинов, неспецифически адсорбируют антимикробные антитела, которые взаимодействуют активными центрами с микробами, выделенными от больных. Образуются хлопья, состоящие из стаф., антител диагнос. сыворотки и определяемого микроба.
РТГА – основана на блокаде, подавлении антигенов вирусов антителами иммунной сыворотки, вирусы теряют способность агглютинировать эритроциты (рис. 13.3.). прим.для диагностики вирусных инфекций (грипп, корь, краснуха, клещевой энцефалит и др.).
РА – для определения групп крови системы АВО и резус – фактора.
РА – для определения антирезусных неполных антител (непрямая реакция Кумбса) при внутрисосудистом гемолизе.