книги из ГПНТБ / Вопросы экспериментальной и клинической терапии и профилактики промышленных интоксикаций сборник научных трудов

ГИСТОХИМИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЩЕЛОЧНОЙ ФОСФОТАЗЫ В ПОЧКАХ

ПРИ ОСТРОЙ ХРОМОВОЙ ИНТОКСИКАЦИИ

ИЛЕЧЕНИИ УНИТИОЛОМ

А. М. Шахназаров

(Кафедра патологической анатомии Дагестанского медицинского института)

Литературные данные свидетельствуют о том, что соедине­ ния хрома относятся к нефрогенным ядам (Я. М. Грушко, 1953; Т. П. Самойлова, 1963, 1964; В. А. Явлинский, А. М. Ша­ банов, 1964; Мозингер и Фиорентини, и др.). Однако тонкий механизм повреждения почек до сих пор полностью не рас­ крыт. Поэтому мы решили изучить окислительно-восстанови­

ного внутрибрюшинного введения бихромата в дозах 0,1—1— 10—50 мг/кг в сопоставлении с гистологическими изменения­ ми в нефроне. В качестве антидота применяли унитиол. Экс­ перименты проведены на 200 белых крысах обоего пола весом 180—220 г, которые забивались декапитацией по 5 крыс на каждый срок. Контрольную группу составляли 10 крыс. ЩФ определяли по Гомори. В почках у контрольных крыс актив­ ность ЩФ высокая, локализуется она в апикальных отделах эпителия проксимальных канальцев и петель Генле; несколь­ ко меньше в адвентиции кровеносных сосудов. Слабая актив­ ность устанавливается в эндотелии отдельных капилляров клубочков и мозгового слоя.

126

После воздействия бихромата натрия в дозе 0,1 мг./кг пер­ вые изменения обнаруживались через 3 часа, которые выра­ жались в изменении тинкториальных свойств эпителия в сторо­ ну оксифилни и шероховатости апикальной поверхности эпи­ телия проксимальных канальцев. Активность ЩФ несколько повышалась в эпителии проксимальных канальцев с распро­ странением в отдельных канальцах на базальную часть кле­ ток. Через 1—3 суток одновременно с высокой активностью фермента в эпителии канальцев наблюдалось некоторое уси­ ление диффузного окрашивания в капиллярах клубочков. Спустя 7—15 и 30 суток каких-либо отклонений в морфологи­ ческой картине и в активности ЩФ не отмечалось.

При дозе бихромата натрия 1 мг/кг в первые 15 минут за­ метных морфо-гистохимических изменений не выявлялось. Че­

личение ЩФ в эпителии с диффузией на всю цитоплазму и нарастание окрашивания в эндотелии капилляров некоторых клубочков. Через 3—6 часов сосудистые изменения остава­ лись теми же, а содержание ЩФ в проксимальных канальцах несколько повышалось с распространением субстрата реак­ ции по всей цитоплазме. Диффузия фермента из апикальной

При морфологическом исследовании изменения не обнару­ живались. Через 30 минут определялось усиление активности ЩФ в эпителии одних канальцев и снижение — в других. Че­

диффузная реакция; появлялось окрашивание в эпителии кап­ сулы Шумлянского некоторых клубочков. Морфологически ус­ танавливались зернистая дистрофия эпителия канальцев, хроматорекснс в ядрах, неравномерная базофилия базальных мембран капилляров клубочков. Спустя 3—6 часов после опы­ та, в эпителии проксимальных канальцев наблюдалось даль­

127

нейшее нарастание паренхиматозно-гидропической дистрофии с плазморексисом и отторжением апикальных частей клеток. Активность ЩФ в одних проксимальных канальцах отсутству­ ет, а в других — высокая. В гломерулах реакция сохранялась в отдельных капиллярных петлях. Через 12—24 часа дистро­ фические процессы ослабевали, а активность ЩФ в почке имела почти однотипный характер. На фоне высокой активно­ сти фермента в эпителии большинства канальцев обнаружива­ лись отдельные проксимальные канальцы с почти полным ис­ чезновением его. В капиллярах клубочков и мозгового веще­ ства наблюдалось дальнейшее ослабление реакции. Через 3-е суток канальцы были увеличены в объеме, цитоплазма эпителия с повышенной зернистостью; в просвете каналь­ цев — зернистая масса.

Активность ЩФ в эпителии канальцев была высокой, но имелось диффузное окрашивание базальных зон клеток и со­ держимого канальцев.

На 7-е сутки в корковом слое канальцы были заметно уве­ личены, с широкими просветами, эпителий еще местами в со­ стоянии паренхиматозной дистрофии. В строме кое-где видны очаговые лимфоидные инфильтраты с единичными плазмати­ ческими клетками.

Активность ЩФ в извитых канальцах была высокой и ло­ кализовалась в надядерной зоне клеток. Вокруг отдельных клубочков имелись канальцы со слабой или умеренной реак­ цией. В просвете некоторых канальцев были видны десквампрованные клетки, окрашенные диффузно. В капиллярах клу­ бочков реакция была незначительной и локализованной в эн­ дотелии. Спустя 15—30 суток, морфологически еще в некото­ рых проксимальных канальцах наблюдалась зернистая ди­ строфия эпителия. Активность ЩФ оставалась неравномерной в различных зонах коры и неодинаковой в проксимальных канальцах различных нефронов; все еще встречались канальцы со слабой реакцией. В капиллярах клубочкового аппарата ок­ рашивание отсутствовало.

При дозе бихромата натрия 50 мг/кг гибель крыс наступа­ ла в основном через 4—8 часов, в редких случаях через 12. Гистологически через 15 минут определялась гиперемия ка­ пилляров стромы и вен коркового слоя. Активность ЩФ в эпи­ телии канальцев высокая, в капиллярах реакция обычная.

Через 30 минут выявляются очаговые кровоизлияния з строме, неравномерное полнокровие капилляров клубочков и ннтерстнция. Эпителий канальцев несколько набухает, цито­

128

плазма мутноватая. Активность ЩФ несколько снижена в эпи­ телии одних проксимальных канальцев и повышена — в дру­ гих; локализуется она не строго в щеточной каемке, а распре­ делена по всей цитоплазме. Через 1—3 часа наблюдается за­ метное расширение капилляров клубочков с разрыхлением базальных мембран и увеличение полостей капсул Шумлянского. Эпителий в состоянии зернистой, гидропической дист­ рофии с коагуляцией цитоплазмы и карнопикнозом в отдель­

сте с тем, определяется выраженное диффузное окрашивание капилляров гломерул.

Через 6—8 часов, когда клинически наступает агональный период, гломерулярные капилляры еще полнокровные, базаль­ ные мембраны разрыхлены, местами расщеплены. В строме гиперемия и кровоизлияния остаются. Эпителий проксималь­ ных канальцев подвергается распространенному некробиозу. Активность ЩФ резко угнетена и выявляется в виде слабо диффузного окрашивания в набухших канальцах, а в некото­ рых канальцах реакция полностью отсутствует. В капилля­ рах клубочков реакция снижается.

G целью лечения крысам после введения летальной дозы (50 мг/кг) бихромата сразу же подкожно делали инъекцию водного раствора унитиола из расчета 50 мг/кг, один раз в сутки, в течение всего периода жизни (максимально до 15 су­

ток) .

Данные патоморфологнческого и гистохимического иссле­ дований у нелеченных и леченных в ранние сроки (до 6 ча­ сов) почти однотипны. Но, тем не менее, продолжительность жизни удлинялась до 15 суток. Наиболее выраженные дис­ трофические п некробиотические изменения наблюдались че­ рез 2 суток после опыта. Некроз отдельных групп клеток со­ четался с тубулорекснсом. Активность ЩФ резко снижена и выявлялась в виде умеренного или слабо диффузного окра­ шивания апикальной поверхности эпителия и содержащейся в просвете канальцев зернистой массы. Через б суток интенсив­ ность сосудистых и альтератпвных изменений несколько спа­ дает, расширенные просветы большинства канальцев свобод­ ны от детрита. ЩФ в наружной зоне коркового вещества за­ метно угнетена; в юкстамедуллярной зоне встречаются ка-

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ПРОТИВОСИЛИКОТИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПОЛИ-2-ВИНИЛПИРИДИН-1Ч- ОКСИДА И НЕКОТОРЫХ ДРУГИХ АЗОТСОДЕРЖАЩИХ ПОЛИМЕРОВ ПРИ ИСПЫТАНИИ НА РАЗЛИЧНЫХ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ МОДЕЛЯХ

Г ■В. Аронова, С. Н. Бородулина, Б. А.. Кацнвльсон, И.. Я. Постовский.

Внастоящее время широко известен поли-2-винилпиридин- -N- оксид как препарат, обладающий высокой противосиликоти-

ческой эффективностью (Schlipkoter, Brockhaus, 1961).

Вхроническом эксперименте на животных нам также уда­ лось наблюдать выраженную противосиликотическую эффек­

тивность полимера, впервые в СССР синтезированного в 1967 г. и переданного нам для испытаний (Б. А. Кацнельсон, И. Я. Постовский, Б. Т. Вёличковский и др., 1969).

Однако наличие некоторых побочных эффектов, о чем со­ общается в ряде работ, посвященных результатам испытаний полимера, что наблюдалось и в наших экспериментах, а так­ же дефицитность материалов для его синтеза, делают целе­ сообразным проведение направленного поиска новых анало­ гичных соединений, обладающих темн или иными преимущест­ вами по сравнению с поливинилпиридин-М-оксидом (И. С- Ша-

дурский, Б. В. Дубовик и др., 1971; Weller, Grundmann, 1967; Schmahl, 1969).

Синтез аналогов полимера приобретает важное значение еще и потому, что сравнительные испытания протйвосиликотической эффективности различных полимеров, могут прибли­ зить к пониманию механизма защитного эффекта, который до настоящего времени не известен-

Материалы и методики исследований На основе лолиметакриловой кислоты на кафедре органи­

ческой химии УПИ было синтезировано 11 водорастворимых производных аминоэфнров и передано нам для испытаний на наличие противосиликотической эффективности. Испытание полимеров проводилось в два этапа: первый—предварительный биологический отбор с использованием экспресс-методов; вто­ рой — исследование отобранных препаратов в хроническом эксперименте на животных.

Для предварительного биологического отбора полимеров, возможно обладающих противосиликотическим действием, ис­

ные о способности поливинилпиридии-Й-оксида тормозить кварцевый гемолиз, однако, такой же способностью облада­ ют и некоторые неэффективные против силикоза полимеры, как например, поливинилпирролидон. В связи с этим был до­ полнительно взят второй тест, широко использующийся италь­ янскими исследователями для сравнительной оценки противо­ силикотической эффективности целого ряда полимеров; при этом макрофаги предварительно приводились в контакт с по­

парат, примерно, по эффективности равный немецкому Р 204.

Препараты, оказавшиеся перспективными после предвари­ тельного отбора, были испытаны на наличие противосиликотического эффекта на интратрахеальной модели эксперимен­ тального силикоза, вызванного высокофиброгенной разновид­ ностью аэрозоля конденсации двуокиси кремния. Исследова­ ния проводились также в сопоставлении с действием поливи­ нилпиридин--N- оксида.

132

Т а б л и ц а 2

Изменение активности дегидрогеназы макрофагов после контакта с образцами синтетического кварца, обработанными рпЗЛИЧНЫМН

азотсодержащими полимерами

Р —' достоверность разницы между степенью защитного эффекта поли винилпнридин-М-оксида и полимерами.

их для оценки протывосиликотического эффекта на интратрахеальной модели силикоза.

Белым лабораторным крысам, запыленным конденсатом двуокиси кремния, образующимся при кварцедувных рабо­ тах, внутримышечно в дозе 25 мг на крысу вводился один из отобранных полимеров либо поливинилпиридин-М-оксид, сна­ чала одновременно с интратрахеальным введением пыли, а затем еженедельно на протяжении 2 и 4 недель. Всего в экс­ перименте было 7 групп: 5 леченых, по числу испытываемых препаратов, 1 нелеченая, но запыленная тем же конденсатом, и одна контрольная. По истечении указанных сроков лечения животные забивались декапитацией. Интенсивность развития силикоза оценивалась по изменению веса легких и лимфоуз­ лов, а также по содержанию оксипролина и липидов в лег­ ких.

Через 2 недели после начала эксперимента у нелеченых животных вес сухих легких был в 3 раза, а вес сырых лимфо­ узлов в 5 раз выше, чем в контрольной группе животных. В группах животных, леченых различными полимерами, измене­ ния весовых характеристик этих органов были неравнозначны. Так, у животных, леченых полимерами № 6 и №' 1, весовые характеристики как легких, так и лимфоузлов были практи­ чески такими же как у нелеченых животных. В то же время эти показатели оказались резко и, относительно нелеченой

134