- •Формирование
- •Понятие “функциональные составляющие” связывают с использованием клеткой или
- •Экспериментальные попытки:
- •Для разделения дыханияна
- •дыхание
- •Метод зрелых тканей
- •дыхание
- •Температурный метод
- •С использованием 14СО2
- •Экстраполяционный
- •Эктраполяционный
- •Маркерный подход к изучению биохимической дифференцировки
- •Метод маркерных ферментов
- •Критерии биохимического маркера:
- •Изучение формирования и дифференцировки метаболических систем и различных структур клетки основано на том,
- •Изменение активности ферментов гликолиза и гексозомонофосфатного пути на последовательных этапах развития клетки
- •В делящихся клетках распад углеводных дыхательных субстратов в основном идет по гликолитическому пути.
- •Метод специфических ингибиторов
- •Действие фторида
- •Действующие концентрации фторида, т.е. концентрации, вызывающие заметное подавление дыхания, лежат в
- •Один из путей выяснения места действия яда – это
- •Действие монойодацетата
- •Метод специфически меченых сахаров
- •Преобладание СО из первого атома над СО из
- •Изменение активности ферментов цикла трикарбоновых кислот и глиоксилатного
- •Реорганизация дыхательной цепи митохондрий в процессе роста клеток
- •Мощность системы митохондриального окисления на последовательных этапах
- •Интенсивный митохондриогенез в фазе растяжения, обусловленный накоплением белковых компонентов мембран и матрикса, приводит
- •Спасибоза внимание!
Действующие концентрации фторида, т.е. концентрации, вызывающие заметное подавление дыхания, лежат в


пределах 1*10 -5*10 М
-3 -2
При
инфильтрации
тканей 
раствором
фторида
дыхание
подавляется,
при
многодневном медленном
проникновении в
клетки фторид не действует на дыхание.
Один из путей выяснения места действия яда – это
снятие ингибирования. 






Если в ткань, дыхание

которой подавлено 
фторидом, ввести пируват, то в случае, если фторид
блокировал
фосфопируватгидратазу,
можно ожидать
реактивирования дыхания
вследствие 
восстановления цикла
Кребса. 
Действие монойодацетата
заключается в связывании сульфгидрильных групп в

восстановленной форме по реакции: 
R-SH+ICH2COOH------------ HI+R-S-CH2COOH

Метод специфически меченых сахаров

разработанный Биверсом и Гиббсом, основан
на использовании глюкозы меченной по
углероду в первом или шестом положении. 
Преобладание СО из первого атома над СО из |
|||||||||
2 |
2 |
|
|
|
|
||||
шестого атома гексозы указывает на то, что в |
|
|
|
|
|||||
|
|
|
|
окислении глюкозы участвует |
|
|
|
|
|
пентозофосфатный путь. Соотношение |
|
|
|
|
|
||||
радиоактивности углекислоты, выделенной в |
|
|
|
|
|||||
дыхании, вычисляется следующим образом: |
|
|
|
|
|||||
С6/C1 = активность СО2, выделенной из глюкозы-6-С14 |
: |
||||||||
|
|
|
|
данная растению активность глюкозы-6-С14 |
|
|
|
|
|
|
|
|
активность СО2, выделенной из глюкозы-1-С14 |
: |
|||||
|
|
|
|
данная растению активность глюкозы-6-С14 |
|
|
|
|
|
Изменение активности ферментов цикла трикарбоновых кислот и глиоксилатного
шунта
Мощность цикла
трикарбоновых кислот резко
увеличивается в фазу растяжения,
что связано с
интенсивным митохондриогенезом в это период. В ряде
экспериментальных работ указывается на увеличение
активности на стадии роста НАД-специфичной
малатдегидрогеназы, НАДФ-специфичной 
изоцитратдегидрогеназы и сукцинатдегидрогеназы.
После прекращения растяжения активность этих ферментов мало изменялась или падала.
Глиоксилатный цикл активно функционирует в
прорастающих семенах масличных растений и в других растительных объектах, где запасные жиры
превращаются в сахара. Поэтому, возможно, роль этого пути значительна на начальных стадиях развития клеток.
Реорганизация дыхательной цепи митохондрий в процессе роста клеток
Так, сравнение
низкотемпературных

спектров поглощения
гомогенатов клеток
корня кукурузы
показало, что максимум
552нм принадлежит
цитохрому b, а не
цитохрому с.
Полученные данные
могут свидетельствовать о
дифференциальном
накоплении цитохромов в растягивающихся клетках, при этом
отношение цитохромов с/а увеличивалось быстрее, чем b/a.
Мощность системы митохондриального окисления на последовательных этапах
роста клетки

вся совокупность сведений о функционировании
дыхательной системы клетки свидетельствует о том, что
максимальная интенсивность дыхания наступает в фазе
растяжения клетки. Это связано в первую очередь с
активацией синтетических процессов, особенно 
синтезом белка. В этот период окончательно 
формируется профиль основных ферментных систем,
которые обеспечивают жизнедеятельность клеток. С наступлением роста клетки повышается потребность в липидных компонентов митохондрий нуклеиновых кислотах, фенольных соединениях пентозанов

клеточной стенки, в связи с чем увеличивается мощность гексозомонофосфатного пути дыхания. По мере того, как все быстрее растет клетка, возрастает пропускная способность гликолиза. 
Интенсивный митохондриогенез в фазе растяжения, обусловленный накоплением белковых компонентов мембран и матрикса, приводит к увеличению активности цикла трикарбоновых кислот и к дальнейшему усилению дыхания, более эффективная организация дыхательной цепи обеспечивает усиление
фосфорилирования. Только
что закончившие рост в
длину клетки характеризуются максимальной
активностью всех ферментов промежуточного метаболизма и максимальной интенсивностью
дыхания. 




Для стареющих клеток характерно ослабление
синтетических процессов и усиление процессов
гидролитических. Наблюдается снижение содержания белка за счет замедления его синтеза и усиления распада. Резкое снижение дыхания наблюдается 
только на поздних этапах старения.

за внимание!