Возбудитель брюшного тифа (salmonella typhi )

1.Родовое и видовое название культуры: Salmonella typhi бактерии из семейства Enterobacteriacea. Обнаружена в 1880 г. К. Эбертом, а выделен в чистой культуре в 1884 г. К. Гаффки.

2. Систематика

Домен: Бактерии

Тип: Протеобактерии

Класс: Гамма-протеобактерии

Порядок: Enterobacterales

Семейство: Энтеробактерии

Род: Сальмонеллы

Вид: Salmonella enterica

Подвид: Salmonella enterica subsp. enterica

3. Культурально-морфологические особенности: Длина 1—7 мкм, ширина около 0,3—0,7 мкм. Мелкие грамположительные палочки вытянутой формы с закруглёнными концами. Капсул бактерии не имеют, подвижны. Оксидазаотрицательны, каталазаположительны. На агаре Эндо колонии мелкие розоватые с голубоватым оттенком и прозрачные, на агаре Плоскирева — бесцветные плотные и мутноватые, на висмут-сульфитном агаре (ВСА) — чёрно-коричневые, с металлическим блеском, окружены чёрным ореолом, среда под колониями окрашивается в чёрный цвет, на ксилоза-лизин-дезоксихолатномагаре (XLD) — бесцветные колонии с черным центром и зоной малинового цвета. На жидких средах дает диффузное помутнение.

4. Область применения: стандартный контроль при проведении рутинных микробиологических исследований; при проведении межлабораторных сомнительных испытаний; на этапах разработки и валидации новых методик и исследований микроорганизмов.

5. Синтезируемый продукт: эндотоксины (термолабильный LT-токсин, термостабильный ST-токсин).

6. Производственные показатели: глюкозу и маннит ферментирует с обазованием газа, сахарозо- и лактозонегативен, сероводород образует, лизин декарбоксилирует, мочевину не расщепляет, цитрат не утилизирует, индол не образует, реакция Фогеса-Проскауэра отрицательная.

7. Способ, условия и состав сред для длительного хранения штамма: лиофилизация. Хранение при температуре ниже 5°С.

8. Оптимальные условия и состав среды для ферментации: Оптимальный температурный режим 35-37 °С, 24 ± 3 ч, ВСА 24-48 ± 3 ч, оптимальный рН сред 7,2-7,4.

9. Генетические особенности: многие штаммы антибиотикорезистентны: к группам пенницилинов(пенициллин), цефалоспоринов (цефтриаксон), карбопенемы (имипене). Плазмиды: жгутиковый антиген z66, кодируемый геном fljBz66. Этот ген локализуется на линейной плазмиде pBSSB1.

10. Безопасность использования: не является генетически модифицированным и не содержит генов других организмов; перенесенных генов резистентности; генетических изменений, связанных с использованием генно-технических методик.

Возбудитель столбняка (clostridium tetani)

1.Родовое и видовое название культуры: Clostridium tetani открыта в 1883 г. русским хирургом Нестором Монастырским.

2. Систематика

Домен: Bacteria

Тип: Фирмикуты

Класс: Clostridia

Порядок: Clostridiales

Семейство: Clostridiaceae

Род: Clostridium

Виды: Clostridium tetani

3. Среда обитания: обнаруживается в экссудате раны умершего от столбняка человека.

4. Культурально-морфологические особенности: облигатный анаэроб, поэтому не продуцирует ферменты, необходимые для аэробного дыхания (цитохромоксидаза, пероксидаза, каталаза). Столбнячная палочка растет при температуре от 14 до 45°С. Оптимальные условия рН 6,8-7,4, t=37°С. Грамположительная. Возбудитель столбняка может существовать в виде вегетативных клеток или спор. Вегетативная клетка С. tetani представляет собой крупную палочку с закругленными концами размером 4-8х0,3-0,8 мкм. При неблагоприятных условиях внешней среды возбудитель столбняка образует споры круглой формы, располагающиеся терминально. Диаметр споры превышает поперечник вегетативной клетки, поэтому клетка со спорой имеет вид барабанной палочки.

5. Производственные показатели: не обладает сахаролитической и протеолитической активностью, не образует индола. Некоторые штаммы ферментируют глюкозу, медленно пептонизируют молоко и разжижают желатин с образованием газа. Обладает фибринолитической активностью.

6. Способ, условия и состав сред для культивирования: В качестве жидких питательных сред для выращивания возбудителя столбняка используют среду Китта-Тароцци, среду Вейнберга. Для создания анаэробных условий среды разливают высоким столбиком, помещают в них адсорбенты кислорода (кусочки печени или мяса), сверху наносят слой вазелинового масла. Перед посевом среды дополнительно кипятят на водяной бане с целью удаления растворенного кислорода. В жидких питательных средах столбнячная палочка вызывает равномерное помутнение. В плотные питательные среды для культивирования С. tetani добавляют кровь, сыворотку крови, молоко, яичный желток. Для обеспечения анаэробных условий культивирование на плотных питательных средах осуществляют в анаэростатах или в герметизируемых специальных контейнерах с использованием газогенерирующих пакетов типа GasPack. На поверхности агаровых сред в анаэробных условиях образуются прозрачные со стеклянным блеском сливающиеся паукообразные шероховатые колонии R-формы с отростками. На средах с кровью (кровяном агаре) выявляется зона гемолиза. При посеве уколом в столбик агара образуются мелкие колонии, похожие на кусочки ваты. При посеве в столбик желатина – разжижение в виде «елочки».

7. Оптимальные условия и состав среды для ферментации: обладают слабой ферментативной активностью. Углеводы не расщепляют (встречаются штаммы, расщепляющие глюкозу). Протеолитические свойства выражаются в восстановлении нитратов в нитриты, медленном свертывании молока и медленном разжижении желатина. С. tetani образует фибрилизин.

8. Генетические особенности: Хромосома C. tetani содержит 2 799 250 bp с содержанием G+C 28,6%. Плазмида pE88 74,082-bp демонстрирует удивительно низкое содержание G+C-24,5%. В геноме C. tetani удалось идентифицировать лишь несколько подвижных элементов: присутствуют 16 генов транспозазы, которые могут быть классифицированы в четырех различных семействах последовательностей вставки. Большинство из этих генов не функционируют из-за вставок, делеций и точечных мутаций. Вариабельность G+C в геноме очень низка; единственными областями со значительно более высоким содержанием G+C (≈50%) являются области, содержащие шесть кластеров генов рРНК и гены, кодирующие рибосомные белки. Это отсутствие флуктуации G+C указывает на то, что недавние события приобретения генов путем латерального переноса генов не имели места, и что C. tetani геном более стабилен, чем геномы энтеропатогенов. Вегетативные формы чувствительны к некоторым антибиотикам, таким как метронидазол и бензилпенициллин.