
- •Микробиология теория
- •1. Предмет и задачи микробиологии: ее место в современной биологии, роль для народного хозяйства и охраны здоровья.
- •2. Клеточная стенка: структура, химический состав и функции, окраска по Грамму.
- •3. Питательные среды.
- •4. Методы микробиологических исследований. Микроскопия. Правила работы с микроскопом.
- •5. Спиртовое брожение.
- •6. Процессы трансформации соединений фосфора.
- •7. Краткая история развития микробиологии.
- •8. Поступление питательных веществ в клетку прокариот (пассивная диффузия, облегченная диффузия, пассивный перенос, активный транспорт).
- •9. Взаимоотношения микроорганизмов с человеком и животными: нормальная микрофлора и патогенные микроорганизмы.
- •10. Особенности морфоструктуры прокариот.
- •11. Бактериальный фотосинтез и его отличие от фотосинтеза растений.
- •12. Влияние физических факторов среды на бактерии: лучистая энергия, ультразвук, реакция среды, свет.
- •13. Формы прокариот.
- •14. Карбонатное дыхание прокариот.
- •15. Процессы трансформации соединений серы.
- •16. Постоянные и временные структуры бактериальной клетки
- •17. Аэробное дыхание прокариот
- •18. Виды плазмид и их роль.
- •19. Цитоплазма и внутрицитоплазматические включения: строение и их функции.
- •20. Питание прокариот. Питательные вещества, факторы роста. Физиологические группы прокариот.
- •21. Структура генома прокариот.
- •22. Генетический аппарат прокариот.
- •23. Метаболизм прокариот: энергетический и конструктивный.
- •24. Общая характеристика представителей отдела Tenericutes.
- •25. Поверхностные структуры бактериальной клетки: капсула, слизистые чехлы, ворсинки.
- •26. Нитратное дыхание прокариот.
- •27. Разложение целлюлозы, гемицеллюлозы, лигнина и пектина.
- •28. Жгутики: их строение, размещение на клетке, механизм функционирования.
- •29. Пропионовокислое брожение.
- •30. Общая характеристика представителей отдела Firmicutes.
- •31. Эндоспоры и другие покоящиеся формы бактерий.
- •34. Химический состав прокариотической клетки.
- •35. Закономерность роста бактерий в периодической чистой культуре. Кривая роста, фазы роста бактериальной популяции.
- •36. Процессы трансформации соединений железа.
- •37. Ферменты: классификация ферментов, их роль в жизни микроорганизмов, особенности ферментативных реакций.
- •38. Процессы трансформации углеродсодержащих веществ.
- •39. Взаимоотношения микроорганизмов с растениями: Микрофлора ризосферы.
- •40. Молочнокислое брожение (гомо- и гетероферментативное).
- •41. Культивирование иммобилизационных клеток микроорганизмов.
- •42. Рекомбинация генетического материала прокариот. Трансформация, трансдукция, конъюгация.
- •43. Пути катаболизма глюкозы: путь Эмбдена-Мейергофа-Парнаса (Гликолиз).
- •44. Выделение чистой культуры и определение ее чистоты.
- •45. Общая характеристика представителей отдела Mendosicutes.
- •46. Анаэробное дыхание прокариот.
- •47. Микробные популяции: колонии, биопленки, зооглеи.
- •48. Влияние химических факторов среды на бактерии.
- •49. Маслянокислое брожение
- •50. Методы стерилизации.
- •51. Распространенность микроорганизмов в природе и их роль в круговороте веществ и других процессах.
- •52. Сульфатное дыхание прокариот.
- •53. Непрерывное проточное культивирование.
- •54. Взаимоотношения микроорганизмов. Ассоциативные и конкурентные взаимоотношения.
- •55. Фумаратное дыхание прокариот.
- •56. Получение накопительной культуры.
- •57. Инфекции.
- •58. Пути катаболизма глюкозы: путь Варбурга-Диккенса-Хореккера (пентозофосфатный).
- •59. Систематика прокариот: задачи, подходы при идентификации, системы классификации.
- •60. Влияние физических факторов среды на бактерии: температура, кислород.
- •61. Биосинтезы органических соединений у микроорганизмов.
- •62. Особенности культивирования анаэробных бактерий.
- •63. Эпифитные и фитопатогенные микроорганизмы.
- •64. Понятие роста, размножения. Основные параметры роста культур: время генерации прокариот, скорость роста и выход биомассы.
- •65. Классификация мутаций.
- •66. Распространение микроорганизмов в природе.
- •67. Поддержание (хранение) культур микроорганизмов.
- •68. Аммонификация белков, нуклеиновых кислот и мочевины.
- •69. Понятие о стерилизации, асептике, антисептике, дезинфекции. Пастеризация.
- •70. Фенотипическая и генотипическая изменчивость прокариот.
- •71. Подходы и критерии при идентификации.
- •72. Иммунитет. Факторы и механизмы естественной устойчивости.
- •73. Нитрификация. Денитрификация.
- •74. Общая характеристика представителей отдела Gracillicutes.
- •75. Антибиотики: механизм и спектр действия антибиотиков.
6. Процессы трансформации соединений фосфора.
Ответ. Фосфор входит в состав белков и липоидов. Особенно много его в ядрах клеток, головном мозге человека и животных. Микроорганизмы, участвующие в превращении фосфора, живут в почве, воде. Их роль сводится к двум процессам: минерализации фосфора, входящего в состав органических веществ, и превращению фосфорнокислых солей из слаборастворимых в хорошо растворимые. Минерализацию фосфора вызывают гнилостные бактерии, в частности Вас. megatherium. Образующаяся при этом фосфорная кислота связывается со щелочами почвы и превращается в слаборастворимые соли кальция, железа, магния и, следовательно, малодоступные для растений. В дальнейшем под действием почвенных кислотообразующих бактерий, особенно нитрифицирующих, эти соли превращаются в растворимые соединения фосфорной кислоты, доступные для растений. В минерализации органических фосфатов (фитина, фосфолипидов, нуклеопротеидов и т. д.) участвуют бактерии родов Pseudomonas, Bacillus; семейства Actinomycetaceae и грибы рода Penicillium и др. Особенно большое количество органических фосфатов накапливается при внесении в почву фосфорных удобрений или при достаточном обеспечении почвы усвояемым фосфором. Тогда происходит так называемая биологическая иммобилизация фосфора: усвояемый фосфор используется микроорганизмами и включается в органические соединения микробной клетки. Установлено, что 8—10% фосфора, внесенного с удобрениями, подвергается иммобилизации. Большие количества фосфора входят в состав почвенных минералов и недоступны или слабо доступны для растений. Многие микроорганизмы способны переводить такие соединения в растворимые формы. К ним относятся бактерии рода Bacillus (В. megaterium), грибы родов Penicillium, Aspergillus и др. Некоторые микроорганизмы косвенно помогают этому процессу, выделяя кислоты, которые превращают фосфаты в растворимые формы. В процессе жизнедеятельности нитрифицирующих бактерий выделяется азотная кислота, а серобактерий — серная. Эти кислоты способствуют растворению нерастворимых фосфорных соединений в почве. Фосфорные бактерии играют важную роль в обеспечении растений усвояемым фосфором. Содержание фосфора (Р205) в почвах колеблется от 0,03 до 0,2 %, а общий запас фосфора в пахотном слое составляет от 1 до 9 т/га. По примерным подсчетам, около 15 кг фосфора на 1 га может содержаться в клетках микроорганизмов. Некоторые минеральные соединения фосфора переходят в раствор под действием кислых продуктов метаболизма бактерий или водородных ионов кислых почв (например, подзолов). Даже диоксид углерода, выделяемый микроорганизмами при разложении органических соединений, переводит в растворе двух- и трехкальциевые фосфаты в водорастворимый монокальциевый фосфат:
Микробиологическая деструкция отдельных минеральных соединений фосфора происходит неодинаково легко. По возрастающей трудности разложения может быть намечен следующий ряд:
7. Краткая история развития микробиологии.
Ответ. Со времен глубокой древности, задолго до открытия микроорганизмов, человек использовал такие микробиологические процессы, как сбраживание виноградного сока, скисание молока, приготовление теста. В старинных летописях описываются опустошительные эпидемии чумы, холеры и других заразных болезней. Микробиология является сравнительно молодой наукой. Начало ее развития относится к концу XVII в. Первое обстоятельное наблюдение и описание микроорганизмов принадлежит Антонию Левенгуку (1632–1723 гг.), который сам изготовлял линзы, дававшие увеличение в 200– 300 раз. В книге «Тайны природы, открытые Антонием Левенгуком» (1695 г.) он не только описал, но и дал зарисовки многих микроорганизмов, обнаруженных им с помощью своего «микроскопа» в различных настоях, дождевой воде, на мясе и других объектах. Открытия Левенгука вызвали живейший интерес ученых. Однако слабое развитие в XVII и XVIII вв. промышленности и сельского хозяйства, господствующее в науке схоластическое направление препятствовали развитию естественных наук, в том числе и зарождающейся микробиологии. Долгое время наука о микробах носила в основном описательный характер. Этот так называемый морфологический период развития микробиологии был малоплодотворным. Одной из ранних работ, посвященных изучению природы и происхождения микроорганизмов, была диссертация М. М. Тереховского, опубликованная в 1775 г. Автор впервые применил экспериментальный метод исследований. Он изучал влияние на микроорганизмы нагревания и охлаждения, а также воздействия различных химических веществ. Исследования М. М. Тереховского остались малоизвестными, хотя имели большое принципиальное значение. Долго еще не было определено место микроорганизмов среди других живых существ, их роль и значение в природе и в жизни человека. В 1698 г. Петр I посетил Левенгука и привез микроскоп в Россию. Прогресс промышленности в XIX в., вызвавший развитие техники и различных отраслей естествознания, обусловил быстрое развитие микробиологии, возросло ее практическое значение. Из науки описательной микробиология превратилась в опытную науку, изучающую роль «загадочных» организмов в природе и жизни человека. Появились более совершенные микроскопы, улучшилась техника микроскопирования. Начало нового направления в развитии микробиологии – физиологического периода связано с деятельностью французского ученого Луи Пастера (1822–1895 гг.) основоположника современной микробиологии. Пастер установил, что микроорганизмы различаются не только внешним видом, но и характером жизнедеятельности. Они вызывают разнообразные химические превращения в субстратах (средах), на которых развиваются. Пастеру принадлежит ряд исключительно важных открытий. Он доказал, что происходящее в виноградном соке спиртовое брожение обусловлено жизнедеятельностью микроорганизмов – дрожжей. Это открытие опровергло господствующую в то время теорию Либиха о химической природе процесса брожения. Изучая причины болезни вина и пива, Пастер доказал, что виновниками их являются микроорганизмы. Чтобы предотвратить порчу, он предложил прогревать напитки. Этот прием применяют и в настоящее время и называют пастеризацией. Пастер впервые обнаружил бактерии, не способные развиваться в присутствии воздуха, т. е. показал, что жизнь возможна и без кислорода. Пастер открыл природу заразных болезней человека и животных, установил, что эти болезни возникают вследствие инфекции (заражения) особыми микробами и что каждое заболевание вызывается определенным микроорганизмом. Он разработал и научно обосновал метод предупреждения заразных болезней (предохраняющие прививки), изготовил вакцины против бешенства и сибирской язвы. Значительным вкладом в микробиологию явились исследования немецкого ученого Роберта Коха (1843–1910 гг.). Им были введены в микробиологическую практику плотные питательные среды для выращивания микроорганизмов, что привело к разработке метода выделения микроорганизмов в так называемые чистые культуры, т. е. выращивание культур (массы клеток) каждого вида в отдельности (изолированно). Это позволило обнаружить неизвестные ранее микроорганизмы и выявить особенности жизнедеятельности отдельных представителей этого мира живых существ. Кох изучал также возбудителей многих заразных болезней (сибирской язвы, туберкулеза, холеры и др.). Всемирно известны работы И. И.Мечникова (1845–1916 гг.). Он впервые разработал фагоцитарную теорию иммунитета, т. е. невосприимчивости организма к заразным болезням. С именем И. И. Мечникова тесно связано развитие микробиологии в России. Он организовал первую в России бактериологическую лабораторию (в Одессе). Ближайшим соратником И. И. Мечникова был Η. Φ. Гамалея (1859–1949 гг.), изучивший многие вопросы медицинской микробиологии. Η. Φ. Гамалея организовал в Одессе (в 1886 г.) первую в России станцию по прививкам против бешенства (вторую в мире после Пастеровской станции в Париже). Вся его деятельность была направлена на решение важнейших вопросов здравоохранения в нашей стране. Большое значение для развития микробиологии, особенно сельскохозяйственной, имели труды С. Н. Виноградского (1856 – 1953 гг.). Он открыл процесс нитрификации, установил существование особых бактерий, которые способны ассимилировать углекислый газ из воздуха, используя в процессе синтеза органических веществ химическую энергию реакции окисления аммиака до азотной кислоты. Так была доказана возможность ассимиляции углекислого газа без участия хлорофилла и солнечной энергии. Этот процесс в отличие от фотосинтеза зеленых растений был назван хемосинтезом. С. Н. Виноградский открыл явление фиксации атмосферного азота анаэробными бактериями. Им также найдены бактерии анаэробного разложения пектиновых веществ, что в дальнейшем позволило исследователям (И. А. Макринову, Г. Л. Селиберу и др.) разработать теорию и приемы мочки волокнистых растений – льна, конопли и др. В своих исследованиях С. Н. Виноградский пользовался разработанным им оригинальным методом выращивания микроорганизмов с применением специальных – элективных (избирательных) – питательных сред и условий, приближенных к естественному обитанию микроорганизмов. Этот метод получил широкое применение во всех областях микробиологии. Он позволил не только открыть новые виды микроорганизмов, но и более глубоко изучить известные. Учеником и сотрудником С. Н. Виноградского был В. Л. Омелянский (1867–1928 гг.). Вместе с С. Н. Виноградский он изучал вопросы нитрификации, фиксации атмосферного азота и другие проблемы микробиологии. В. Л. Омелянский создал первый русский учебник по микробиологии «Основы микробиологии» и первое русское «Практическое руководство по микробиологии». Эти книги до сих пор не утратили своей ценности. На основании исследований С. П. Костычева и В. С. Буткевича химизма образования органических кислот грибами в нашей стране в 1930 г, было организовано производство лимонной кислоты. В. Η. Шапошников и А. Я. Мантейфель изучали и внедрили в заводскую практику способ производства молочной кислоты с помощью бактерий. Исследования В. Н. Шапошникова и Ф. М. Чистякова дали возможность еще в начале 30-х годов организовать в заводском масштабе производство ацетона и бутилового спирта с помощью бактерий. В области пищевой микробиологии, непосредственно связанной с товароведением, большая роль принадлежит Я. Я. Никитинскому (1878–1941 гг.). Он создал курс пищевой микробиологии и совместно с Б. С. Алеевым написал специальный курс микробиологии скоропортящихся пищевых продуктов, а также руководство к практическим работам по микробиологии для студентов, изучающих товароведение продовольственных товаров. Труды Я. Я· Никитинского и его учеников положили начало широкому развитию микробиологии консервного производства и холодильного хранения скоропортящихся пищевых продуктов. Значительные успехи в области микробиологии молока и молочных продуктов были достигнуты школой С. А. Королева (1876 – 1932 гг.) в Вологодском молочном институте А.Ф.Войткевичем (1875–1950 гг.) в Московской сельскохозяйственной академии имени К- А. Тимирязева. До Великой Октябрьской социалистической революции в нашей стране насчитывались единичные бактериологические учреждения. В настоящее время в стране имеется широкая сеть научно-исследовательских учреждений по различным разделам микробиологической науки. Имеется значительное число производств, в технологии которых главное место занимают микробиологические процессы. Возникают новые отрасли биохимической промышленности, основанные на применении плесневых грибов, бактерий и других микроорганизмов. В 1960 г. создана микробиологическая промышленность, в технологических процессах которой используются микроорганизмы – продуценты ценнейших биологически активных веществ (антибиотиков, белка, аминокислот, ферментов, витаминов, гормонов и др.). Получила развитие и микробиология пищевых продуктов. Все крупные отрасли пищевой промышленности имеют научно-исследовательские институты, в состав которых входят лаборатории, изучающие микробиологию данной отрасли производства. На всех предприятиях пищевой промышленности созданы заводские и цеховые микробиологические лаборатории, контролирующие производство и качество готовой продукции. Создание электронного микроскопа и разработка новых методов исследований микроорганизмов позволяют изучать их на молекулярном уровне, что в свою очередь дает возможность более глубоко познать свойства микробов, их химическую деятельность, лучше использовать и управлять микробиологическими процессами. Микробиологической науке принадлежит большая роль в выполнении основной задачи, поставленной перед пищевой и легкой промышленностью, торговлей и общественным питанием,– наиболее полном удовлетворении постоянно растущих потребностей советского народа.