Реакция агглютинации (от лат. agglutinatio - склеивание) - склеивание корпускул (бактерий, эритроцитов и др.) антителами в присутствии электролитов - натрия хлорида. проявляется в виде хлопьев или осадка, состоящих из корпускул (например, бактерий), "склеенных" антителами.
Реакция преципитации
реакция взаимодействия in vitro антигена с антителом, приводящая к видимому невооруженным глазом помутнению среды или образованию осадка иммунного комплекса (преципитата).
преципитация в геле (по Оухтерлони)
кольцеприципита
ция
Преципитация в агаре
Простая радиальная иммунодиффузия .Позволяет количественно определить содержание антигена в исследуемой пробе. В слое агара, содержащего антитела, вырезают лунки, в одни из которых вносят исследуемый антиген, в другие - стандартный. Антигены диффундируют из лунок в агар, образуя радиальные зоны преципитации. Диаметр зоны преципитации пропорционален концентрации антигена.
Кольца
преципитации
•Зональный электрофорез - полуколичественный метод, позволяющий разделить смесь белков в зависимости от их молекулярной массы и электрического заряда. Суть метода заключается в следующем: исследуемую смесь белков на носителе (например, пластине с гелем) помещают в камеру для электрофореза, заполненную буферным раствором и подключенную к источнику постоянного тока. При электрофорезе белков сыворотки обычно получается 5 основных полос, которые соответствуют фракциям альбумина, альфа1-, альфа2-, бета- и гамма-глобулинов
Основные фракции белков сыворотки крови и их компоненты
|
|
фракци |
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
я |
|
|
альбумин ,преальбумин |
|
|
|
|||
• |
|
Альбумин |
|||
|
|
Альфа-1 глобулины |
α1-антитрипсин, α1 антихемотрипсин, α1- |
||
|
гликопротеин, α1 липопротеин |
|
|||
|
|
Альфа-2 глобулины |
церулоплазмин, альфа2-макроглобулин, |
||
|
гаптоглобин |
|
|||
|
|
Бета-глобулины |
трансферрин, β-липопротеин, СРБ, С3 фактор |
||
|
комплемента, IgA, IgM |
|
|||
•Гамма-глобулины
Иммуноблоттинг
Нефелометрия - определение концентрации взвешенных частиц и высокомолекулярных веществ в растворе, основанное на оценке интенсивности рассеяния света, проходящего через этот раствор. Нефелометрия может быть использована для определения концентрации антигенов, поскольку при добавлении к ним антител образуются иммунные комплексы, рассеивающие проходящий свет.
Исследуемая |
Антитела против |
проба |
исследуемых антител, |
|
меченые флуорохромом |
1 |
2 |
Культура клеток, экспрессирующих антиген, против которого направлены антитела в исследуемом образце
