Преципитация в агаре
Простая радиальная иммунодиффузия .Позволяет количественно определить содержание антигена в исследуемой пробе. В слое агара, содержащего антитела, вырезают лунки, в одни из которых вносят исследуемый антиген, в другие - стандартный. Антигены диффундируют из лунок в агар, образуя радиальные зоны преципитации. Диаметр зоны преципитации пропорционален концентрации антигена.
Кольца
преципитации
•Зональный электрофорез - полуколичественный метод, позволяющий разделить смесь белков в зависимости от их молекулярной массы и электрического заряда. Суть метода заключается в следующем: исследуемую смесь белков на носителе (например, пластине с гелем) помещают в камеру для электрофореза, заполненную буферным раствором и подключенную к источнику постоянного тока. При электрофорезе белков сыворотки обычно получается 5 основных полос, которые соответствуют фракциям альбумина, альфа1-, альфа2-, бета- и гамма-глобулинов
Основные фракции белков сыворотки крови и их компоненты
|
|
фракци |
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
я |
|
|
альбумин ,преальбумин |
|
|
|
|||
• |
|
Альбумин |
|||
|
|
Альфа-1 глобулины |
α1-антитрипсин, α1 антихемотрипсин, α1- |
||
|
гликопротеин, α1 липопротеин |
|
|||
|
|
Альфа-2 глобулины |
церулоплазмин, альфа2-макроглобулин, |
||
|
гаптоглобин |
|
|||
|
|
Бета-глобулины |
трансферрин, β-липопротеин, СРБ, С3 фактор |
||
|
комплемента, IgA, IgM |
|
|||
•Гамма-глобулины
Иммуноблоттинг
Нефелометрия - определение концентрации взвешенных частиц и высокомолекулярных веществ в растворе, основанное на оценке интенсивности рассеяния света, проходящего через этот раствор. Нефелометрия может быть использована для определения концентрации антигенов, поскольку при добавлении к ним антител образуются иммунные комплексы, рассеивающие проходящий свет.
Иммунофлуоресцентный метод
Твердофазный иммуноферментный метод (ELISA)
Радиоиммунный метод
Изотопная метка
меченые антитела против исследуемых
антител
антитела
исследуемого
образца
Антиген,сорбирова нный на твердой фазе
