Volume1
.pdf
318 Часть 2. Основные генетические механизмы
Рис.4.17.Схематическоеизображениесоставануклеотиднойпоследовательностиполностьюсекве-
нированного генома человека. LINEs, SINEs, ретровирус-подобные элементы и присущие ДНК транс- позоны–этомобильныегенетическиеэлементы,которыеприумножилисьвнашемгеномепутемсамо- репликацииивстраиванияновыхкопийвразличныхпозициях.Такогородаподвижнымгенетическим элементаммыуделимместовглаве5(см.таблицу5.3,стр.486).Простыеповторыпредставляютсобой короткиепоследовательностинуклеотидов(менее14-типарнуклеотидов),которыеповторяютсяснова иснованапротяжениидостаточнодлинныхотрезков.Сегментныедупликации—большиеблокигенома (1 000–200 000парнуклеотидов),которыеприсутствуютвдвухилинесколькихместахгенома.БлокиДНК с наиболее высокой плотностью повторов, находящиеся в гетерохроматине, еще не были полностью секвенированы;поэтомуприблизительно10 %последовательностиДНКчеловеканепредставленона этойсхеме.(ДанныелюбезносообщеныE. Margulies.)
4.2.4. Сравнение геномов позволяет выявлять консервативные в эволюционном отношении области последовательности ДНК
Основной помехой в интерпретации нуклеотидных последовательностей хромосом человека выступает тот факт, что бóльшая часть последовательности не имеет, по всей вероятности, никакого значения. Более того, кодирующие области генома (экзоны), как правило, присутствуют в нем в виде маленких островков (средним размером около 145-ти пар нуклеотидов), разбросанных в море ДНК, точная последовательность нуклеотидов которой имеет малое значение. Такая организация значительно затрудняет идентификацию всех экзонов на том или ином отрезке последовательности ДНК. Еще труднее определить, где ген начинается и заканчивается и сколько экзонов в точности он охватывает.
Точная идентификация гена требует подходов, которые извлекают информацию из неотъемлемо (по сути своей) низкого отношения сигнал – шум генома человека. Мы опишем некоторые из них в главе 8. Здесь мы обсудим только один общий подход, который основывается на том наблюдении, что последовательности, которые имеют какую-либо функцию, остаются сравнительно консервативными в ходе эволюции, тогда как не обремененные исполнением какой-либо функции, могут позволить себе сколь угодно случайных мутаций. Исходя из этого, стратегия построена на сравнении последовательности человека с последовательностью соответствующих областей родственного генома — например, мыши. Люди и мыши, как думают, разошлись от общего, относящегося к млекопитающим предка приблизительно 80·106 лет назад, после чего прошло достаточно времени, чтобы большинство нуклеотидов в их геномах изменилось в результате событий случайных мутаций.
Глава 4. ДНК, хромосомы и геномы 319
Следовательно, единственными областями, сохранившими сходство в этих двух геномах, будут те области, мутации в которых вредили бы их функции и ставили бы животных, несущих эти мутации, в невыгодное положение по сравнению с остальными особями и тем самым предопределяли бы их устранение из популяции под давлением естественного отбора. Такие весьма схожие области известны как консервативные области. Консервативные области включают как функционально значимые экзоны, так и регуляторные последовательности ДНК. Напротив, не- консервативные области представлены ДНК, последовательность которой вряд ли имеет какое-либо значение для функционирования организма.
Действенность этого метода может быть увеличена за счет сравнения нашего генома с таковыми тех животных, для которых они полностью секвенированы, включая крысу, курицу, шимпанзе и собаку. Демонстрируя подобным образом результаты очень продолжительного «эксперимента» природы, длящегося сотни миллионов лет, такие сравнительные исследования секвенированных ДНК высветили наиболее интересные области в этих геномах. Сравнение показывает, что около 5 % генома человека состоит из «многовидовых консервативных последовательностей», о чем подробнее сказано ближе к концу этой главы. Что было совсем неожиданно, так это то, что только приблизительно одна треть этих последовательностей кодирует белки. Некоторые из консервативных некодирующих последовательностей соответствуют группам белок-связывающих участков, каковые вовлечены в регулирование генов, тогда как иные производят молекулы РНК, которые не транслируются в белки. Но функция большинства таких последовательностей остается неизвестной. Это неожиданное открытие позволило ученым заключить, что наши познания о цитобиологии позвоночных намного скуднее, чем мы раньше воображали. Конечно, есть огромные возможности для новых открытий, и впереди нас ждет еще много неожиданностей.
Сравнительные исследования показали не только то, что у человека и других млекопитающих большинство генов одинаковы, но также и то, что большие блоки наших геномов содержат эти гены в одинаковом порядке, каковая особенность получила название консервативной синтении. В результате большие блоки наших хромосом могут быть узнаны в геномах представителей других биологических видов. Это позволяет использовать технологию раскрашивания хромосом для восстановления недавней эволюционной истории хромосом человека (рис. 4.18).
4.2.5. На протяжении жизни клетки хромосомы находятся в различных состояниях
Мы познакомились с тем, как гены расположены в хромосомах, но для образования функционально активной хромосомы молекула ДНК должна быть способна на нечто большее, чем просто нести в себе гены: она должна быть способна реплицироваться, а реплицированные копии должны отделяться друг от друга и надежно разделяться по дочерним клеткам при каждом делении клетки. Этот процесс происходит через упорядоченный ряд стадий, совокупность которых составляет клеточный цикл, который предусматривает временной разрыв между удвоением хромосом и их расхождением на две дочерние нити. Клеточный цикл вкратце и схематично представлен на рис. 4.19, а подробно рассматривается в главе 17. В этой главе мы коснемся лишь некоторых моментов клеточного цикла. Во время интерфазы хромосомы реплицируются, и в ходе митоза они сильно уплотняются и затем разделя-
320 Часть 2. Основные генетические механизмы
Рис.4.18.Предполагаемаяэволюционнаяисторияхромосомы3человекаиродственныхейхромосом другихмлекопитающих.а)Порядоксегментовхромосомы3,гипотетическиимевшийсянахромосоме относящегосякмлекопитающимпредка,представленнафонежелтогопрямоугольногополя.Отмечены минимальныеизменениявэтойпредковойхромосоме,необходимыедляобъясненияпоявлениявсех трех современных хромосом. (Современные хромосомы человека и африканских человекообразных обезьянпритакомраскладевыглядятидентичными.)Маленькиекружки,изображенныенасовременныххромосомах,представляютположенияцентромер.Слияниеиинверсия,котораяведеткизменению организациихромосомы,какдумают,происходятумлекопитающихсчастотойразв5–10·106 лет.б)Некоторые эксперименты по окрашиванию хромосом, на основании которых была построена схема а. Каждое изображение показывает хромосому, наиболее близко связанную родством с хромосомой 3 человека,окрашеннуюзеленымпутемгибридизациисразличнымисегментамиДНК,обозначенными буквамиa,b,cиd,стоящимиврядподизображениемвариантовгибридизациихромосомы.Этибуквы соответствуют буквам, обозначающим цветные сегменты в схемах на изображении а. (Заимствовано из S. Müller et al., Proc. Natl Acad. Sci. USA. 97: 206–211, 2000. С любезного разрешения Национальной академиинаукСША.)
ются и распределяются по двум дочерним ядрам. Сильно уплотненные хромосомы в делящейся клетке называют митотическими хромосомами (рис. 4.20, а). Это форма, в которой хромосомы наиболее легко просматриваются; фактически на всех иллюстрациях хромосом, представленных ранее в этой главе, хромосомы изображены на стадии митоза. Во время деления клетки такое уплотненное состояние важно для
Глава 4. ДНК, хромосомы и геномы 321
Рис.4.19.Упрощенноепредставлениеклеточногоциклаэукариот.Вовремяинтерфазыклеткаактивно экспрессируетсвоигеныипоэтомусинтезируетбелки.Крометого,впериодинтерфазыипередделением клеткиДНКреплицируетсяикаждаяхромосомадублируется,даваяначалодвумтесноспареннымдочернимхромосомам(здесьвклеткепоказанытолькодвехромосомы).ПозавершениирепликацииДНК клеткаможетвойтивM-фазу,когдапроисходитмитозиядроделитсянадвадочернихядра.Втечение этойстадиихромосомыуплотняются,ядернаяоболочкаразрушаетсяиобразуетсямитотическоеверетеноделенияизмикротрубочекипрочихбелков.Уплотненныемитотическиехромосомыулавливаются митотическимверетеном,ипоодномуполномунаборухромосомзатемподтягиваетсякобоимконцам клетки,приэтомвсепарыдочерниххромосомразделяются.Ядернаяоболочкавновьобразуетсявокруг каждогонаборахромосом,иназаключительномэтапеМ-фазыклеткаделитсянадведочерниеклетки. Бóльшаячастьвремениклеточногоцикларасходуетсянаинтерфазу;М-фазавсравненииснеюкраткая ивомногихклеткахмлекопитающихзанимаетлишьоколочаса.
точного разделения удвоенных хромосом митотическим веретеном деления, о чем еще будет сказано подробнее в главе 17.
В течение тех этапов клеточного цикла, когда клетка не делится, хромосомы разворачиваются, и большая часть их хроматина пребывает в ядре в виде сплетения длинных тонких нитей, так что нельзя явно различить отдельные хромосомы (рис. 4.20, б). Мы будем называть хромосомы в таком развернутом состоянии
Рис. 4.20. Сравнение развернутого интерфазного хроматина с хроматином в митотической хромосоме. а) Микро-
фотоснимок митотической хромосомы, полученный на растровом электронном микроскопе: уплотненная удвоенная хромосома,вкоторойдвеновыехромосомы все еще соединены друг с другом (см. рис. 4.21). Стянутая область отражает положение центромеры, описанной нарис.4.21,б)Электронныймикрофотоснимок,показывающийгигантскоесплетение хроматина, выходящего из лизированногоинтерфазногоядра.Обратите вниманиенаразличиевмасштабах.(ИзображениеалюбезнопредоставленоTerry D. Allen; б — получено с благосклонного позволенияVictoriaFoe.)
322 Часть 2. Основные генетические механизмы
интерфазными хромосомами. Поскольку клетки проводят бóльшую часть своего времени в интерфазе, и именно в этот период их генетическая информация считывается, хромосомы представляют наибольший интерес для цитобиологов именно тогда, когда они наименее различимы.
4.2.6. Каждая молекула ДНК, которая образует линейную хромосому, должна содержать центромеру, две теломеры и точку начала репликации
Хромосома работает как обособленная структурная единица: для того чтобы при делении клетки копия передавалась каждой дочерней клетке, все хромосомы должны реплицироваться, а недавно реплицированные копии – разделяться и правильно распределяться по двум дочерним клеткам. Эти основополагающие функции управляются тремя типами специализированных последовательностей нуклеотидов в ДНК, каждая из которых связывает специфические белки, что направляют машины, которые реплицируют и разводят хромосомы (рис. 4.21).
Входе экспериментов над дрожжами, хромосомы которых относительно малы
илегко поддаются манипуляциям, были идентифицированы минимальные элементы последовательности ДНК, отвечающие за каждую из этих функций. Последовательность нуклеотидов одного типа служит точкой начала репликации, или сайтом
инициации репликации (replication origin), ДНК — здесь начинается удвоение ДНК. Хромосомы эукариот содержат много точек начала репликационных вилок, что позволяет гарантировать быструю репликацию всей хромосомы в целом; это обсуждается подробно в главе 5.
Рис. 4.21. Три последовательности ДНК, необходимые для воспроизводства хромосомы эукариот – для ее репликации и, далее, расхождения в митозе. Каждая хромосома имеет множество точек на-
чала репликации, одну центромеру и две теломеры. Здесь показана цепь событий, которые типичная хромосомапроходитзаодинклеточныйцикл.ДНКреплицируетсявинтерфазе,начинаясточекначала репликацииипродвигаясьотнихвдвухнаправленияхчерезвсюхромосому.ВМ-фазецентромерапри- крепляет удвоенные хромосомы к митотическому веретену деления, с тем чтобы каждая из дочерних клеток получила по одной копии всех хромосом во время митоза. Вдобавок к этому центромера помогаетудерживатьудвоенныехромосомывместедотехпор,покаонинебудутготовыкрасхождению. Теломерыформируютспециальныеколпачкинаобеихконцаххромосомы.
Глава 4. ДНК, хромосомы и геномы 323
После репликации две дочерние хромосомы остаются соединенными друг с другом и, по мере продвижения клеточного цикла, еще более уплотняются и преобразуются в митотические хромосомы. Наличие второй специализированной последовательности ДНК, названной центромерой, позволяет в момент деления клетки затянуть в каждую дочернюю клетку по одной копии каждой дублированной и уплотненной хромосомы. При центромере образуется белковый комплекс, называемый кинетохором, который прикрепляет удвоенные хромосомы к митотическому веретену деления, что позволяет оттянуть их друг от друга (обсуждение — в главе 17).
Третья специализированная последовательность ДНК образует теломеры, то есть концы хромосомы. Теломеры содержат повторяющиеся последовательности нуклеотидов, которые обеспечивают эффективную репликацию концов хромосом. Теломеры исполняют также и другую функцию: повторные последовательности теломерной ДНК вместе с областями, примыкающими к ним, формируют структуры, которые защищают конец хромосомы от того, чтобы быть ошибочно признанным клеткой за разорванную молекулу ДНК при оценке клеткой необходимого объема ремонта. Как восстановление такого рода, так и структуру, и функцию теломер мы обсудим в главе 5.
В клетках дрожжей последовательности этих трех типов, необходимые для приумножения хромосом, относительно коротки (обычно не более 1 000 пар оснований каждая) и поэтому занимают лишь ничтожную долю информационной емкости хромосомы. Хотя последовательности теломер довольно просты и малы у всех эукариот, последовательности ДНК, которые образуют центромеры и точки начала репликации в более сложных организмах, намного длиннее своих аналогов у дрожжей. Например, эксперименты показывают, что центромеры человека содержат до 100 000 пар нуклеотидов и не обязательно требуют отрезка ДНК с заданной последовательностью. Вместо этого, о чем мы еще расскажем в этой главе, они, по-видимому, состоят из большой регулярно повторяющейся структуры типа белок нуклеиновая кислота, которая передается по наследству при репликации хромосомы.
4.2.7. В хромосомах молекулы ДНК сильно уплотнены
Все относящиеся к эукариотам организмы имеют специальные способы упаковки ДНК в хромосомы. Например, если 48 миллионов пар нуклеотидов ДНК, составляющих хромосому 22, вытянуть в виде одной длинной правильной двойной спирали, то молекула простиралась бы приблизительно на 1,5 см от одного конца до другого. Но во время митоза хромосома 22 составляет в длину лишь около 2 мкм (см. рис. 4.10 и 4.11), что соответствует степени уплотнения по всей длине почти в 10 000 раз. Эта достойная восхищения степень уплотнения достигается работой белков, которые последовательно сматывают и укладывают ДНК на все более и более высоких уровнях организации. Хотя ДНК интерфазных хромосом человека значительно менее уплотнена, чем митотические хромосомы, она все же достаточно плотно упакована: общая степень уплотнения составляет приблизительно 500 раз (длина спирали хромосомной ДНК делится на полную длину этой хромосомы).
При чтении этих пунктов важно иметь в виду, что структура хромосомы сама по себе динамична. Мы узнали, что все хромосомы уплотняются до необычайной степени в М-фазе клеточного цикла. Намного менее наглядным явлением, но представляющим огромный интерес и значение, является то, как определенные области интерфазных хромосом разуплотняются, когда клетка получает доступ к определенным последовательностям ДНК для экспрессии генов, репарации и репликации ДНК, — и затем вновь уплотняются по завершении этих процессов. Поэтому упа-
324 Часть 2. Основные генетические механизмы
ковка хромосом осуществляется таким способом, который допускает возможность быстрого локального доступа к ДНК по требованию клетки. В следующих пунктах мы рассматриваем специализированные белки, благодаря которым и осуществляется упаковка такого типа.
4.2.8. Основная структурная единица хромосомы эукариот — нуклеосома
Белки, которые связываются с ДНК и образуют хромосомы эукариот, традиционно подразделяют на два общих класса: гистоны и негистоновые хромосомные белки. Комплекс белков обоих классов с ядерной ДНК клеток эукариот известен как хроматин. Гистоны присутствуют в клетке в столь огромных количествах (приблизительно 60 миллионов молекул каждого типа в одной клетке человека), что их полная масса в хроматине практически равна массе ДНК.
Гистоны отвечают за первый и стоящий в самом основании уровень упаковки хромосомы — нуклеосому, представляющую собой комплекс белок–ДНК, который был открыт в 1974 г. Когда интерфазные ядра вскрывают очень бережно и их содержимое исследуют под электронным микроскопом, бóльшая часть хроматина находится в форме волокна с диаметром приблизительно 30 нм (рис. 4.22, а). Если такой хроматин подвергнуть обработке различными методами, в результате которых он частично разворачивается, то его можно наблюдать под электронным микроскопом в виде ряда «бусин на нити» (рис. 4.22, б). Нить представлена ДНК, а каждая бусина, называемая сердцевиной, или кор-частицей, нуклеосомы (nucleosome core particle), состоит из ДНК, намотанной, как на катушку, на белковый стержень, образованный гистонами.
Структурная организация нуклеосом впервые была определена в гидролизате, полученном после обработки развернутого хроматина специфическими ферментами (так называемыми нуклеазами), которые разрезают ДНК между нуклеосомами. В ходе обработки такими ферментами в течение короткого периода ничем не защищенная ДНК из промежутков между нуклеосомными кор-частицами — лин- керная ДНК — подвергается деградации. Каждая отдельно взятая нуклеосомная
Рис.4.22.Нуклеосомыкакониестьвполезренияэлектронногомикроскопа.а)Хроматин,выделенный прямо из интерфазного ядра, выглядит как нить толщиной 30 нм. б) На этом электронном микрофотоснимке показан сегмент хроматина, который после выделения был искусственно «распакован», или разуплотнен, чтобы можно было различить нуклеосомы. (Снимок а любезно предоставила Barbara Hamkalo;фотографияббылаприсланаVictoriaFoe.)
Глава 4. ДНК, хромосомы и геномы 325
Рис. 4.23. Структурная организация нуклеосомы.
Нуклеосома содержит белковый стержень, или ядро(core),состоящийизвосьмимолекулгистонов. Входебиохимическихэкспериментовкор-частицу нуклеосомы можно высвободить из выделенного хроматина, обработав его нуклеазой — ферментом,расщепляющимДНК,которыйудалитвсюлинкерную ДНК. (Нуклеаза способна деградировать экспонированную линкерную ДНК, но не может воздействовать на ДНК, плотно намотанную на стержень нуклеосомы.) После диссоциации выделеннойнуклеосомынагистоновыйстерженьиДНК последовательность этого сегмента ДНК, который былобвитвокругстержня,можноопределитьсеквенированием. Такого отрезка длиной 147 пар нуклеотидов достаточно, чтобы 1,7 раза обернуться вокруггистоновогостержня.
кор-частица (которую называют также «минимальной нуклеосомой» — Прим. ред.) состоит из комплекса восьми гистоновых белков: по две молекулы гистонов H2A, H2B, H3 и H4 — и двухцепочечной
ДНК длиной 147 пар нуклеотидов. Гистоновый октамер образует белковый стержень (или ядро, сердцевину; от англ.
protein core), вокруг которого намотана двунитевая ДНК (рис. 4.23).
Каждая нуклеосомная кор-частица отделена от следующей областью линкерной ДНК, которая может быть различной длины: от нескольких пар нуклеотидов до
примерно 80. (Термин нуклеосома в техническом плане обозначает нуклеосомную кор-частицу вместе с одной из примыкающих к ней ДНКовых связок, но часто его употребляют как синоним нуклеосомной кор-частицы.) Поэтому в среднем нуклеосомы повторяются с промежутками в 200 пар нуклеотидов или около того. Например, диплоидная клетка человека с 6,4·109 пар нуклеотидов содержит приблизительно 30 миллионов нуклеосом. Формирование нуклеосом преобразует молекулу ДНК в хроматиновую нить, протяженность которой составляет приблизительно одну треть от ее первоначальной длины.
4.2.9. Структура нуклеосомной кор-частицы показывает характер упаковки ДНК
Структура нуклеосомной кор-частицы получена с высоким разрешением в 1997 г.: это имеющий форму диска гистоновый стержень, вокруг которого плотно намотаны 1,7 витка ДНК (рис. 4.24). Гистоны всех четырех типов, из которых образована сердцевина нуклеосомы, – относительно небольшие белки (102–135 аминокислот), которые имеют общий структурный мотив, известный как гистоновая укладка (histone fold): образована тремя α-спиралями, соединенными двумя петлями
326 Часть 2. Основные генетические механизмы
Рис.4.24.Структуракор-частицынуклеосомы,определеннаярентгеноструктурныманализомкристал-
лов.Всегистоныокрашенывсоответствиисосхемой,представленнойнарис.4.23,адвойнаяспираль ДНК — в светло-серый цвет. (Заимствовано из K. Luger et al., Nature 389: 251–260, 1997. С любезного позволенияMacmillanPublishersLtd.)
(рис. 4.25). При сборке нуклеосомы «гистоновые укладки» сначала связываются друг с другом с образованием димеров H3–H4 и H2A–H2B, а димеры H3–H4 объединяются в тетрамеры. После этого тетрамер H3–H4 далее объединяется с двумя димерами H2A–H2B с образованием компактного октамерного стержня, на который при желании наматывается ДНК (рис. 4.26).
ДНК и гистоны надежно соединены: в каждой нуклеосоме между ДНК и гистоновым стержнем образуется 142 водородные связи. Почти половина этих связей возникает между основной цепью аминокислот гистонов и фосфодиэфирными группами сахарофосфатного остова ДНК. Многочисленные гидрофобные взаимодействия и солевые мостики также скрепляют ДНК с белком в нуклеосоме. Например, более одной пятой от общего числа аминокислот в каждом из гистоновых стержней представлено лизином или аргинином (обе аминокислоты с оснóвными боковыми цепями), и их положительные заряды могут эффективно нейтрализовать отрицательно заряженный остов ДНК. Эти многочисленные взаимодействия отчасти объясняют, почему ДНК практически любой последовательности может быть связана с октамерным гистоновым стержнем. Путь ДНК вокруг гистонового стержня не гладок, скорее наоборот: исходя из неровной поверхности стержня, можно было ожидать несколько изломов в молекуле ДНК. Подобного рода изгибы предполагают существенное сжатие малой бороздки спирали ДНК. Некоторые динуклеотиды в малой бороздке особенно легко поддаются сжатию, поэтому некоторые последовательности нуклеотидов связываются с нуклеосомой более плотно, чем другие
Глава 4. ДНК, хромосомы и геномы 327
Рис. 4.25. Общая структурная организация гистонового стержня. а) Как показано на рисунке, каждый из основных гистонов содержит N-концевой хвост, который претерпевает ковалентную модификацию нескольких видов, и область гистоновой укладки. б) Структура гистоновой укладки, которую образуют всечетырестержневыхгистона.в)Гистоны2Aи2Bобразуютдимерзасчетвзаимодействия,известного как«рукопожатие».ГистоныH3иH4образуютдимерзасчетвзаимодействиятогожетипа.
(рис. 4.27). Это, вероятно, объясняет некоторые поразительные и притом весьма неординарные примеры очень точного расположения нуклеосом на протяжении всей цепи ДНК. Однако для большинства последовательностей ДНК, имеющихся в хро- мосомах, предпочтение тех или иных последовательностей нуклеосомами должно быть незначительным, чтобы обеспечить преимущество других факторов, которые позволят нуклеосоме занять любую из множества позиций в последовательности ДНК большинства хромосомных областей.
Кроме гистоновой укладки, каждый из стержневых гистонов имеет амино- кислотный N-концевой «хвост», который выступает из гистонового стержня (см. рис. 4.26). Такие гистоновые хвосты подвергаются ковалентным модификациям нескольких различных типов, которые, в свою очередь, управляют ключевыми особенностями структуры и функции хроматина, что мы обсудим вкратце.
Как отражение их фундаментальной роли в предопределении функции ДНК посредством управления структурой хроматина гистоны входят в когорту наиболее высококонсервативных белков эукариот. Например, последовательности аминокислот гистона H4 гороха и коровы отличаются только по 2 из 102 позиций. Такая высокая консервативность в ходе эволюции навлекает на мысль о том, что функции гистонов определяются почти всеми их аминокислотами, так что изменение даже в какой-либо одной позиции было бы губительно для клетки. Это предположение проверили непо- средственно на клетках дрожжей, у которых можно мутировать данный ген гистона in vitro и ввести его обратно в геном дрожжей вместо нормального гена. Как и ожи- дали, в большинстве своем изменения в последовательностях гистонов летальны для клетки; немногие, которые не приводят к летальному исходу, вызывают изменения в профиле нормальной экспрессии генов, а также другие отклонения от нормы.