6. Определение обеспеченности организма витамином в1 в моче

Методика:

Степень обеспеченности организма витамином В₁ может быть определена по его содержанию в суточной моче. В норме суточные выделения В₁ с мочой у человека колеблется в пределах от 200 до 500 γ. Показателем недостаточности обеспечения организма витамином В1 принято считать наличие его в ночной моче в количестве менее 100 γ.

Определение витамина В₁ в моче производится по тиохромному методу Янсона, основанному на окислении витамина В в щелочной среде красной кровяной солью в тиохром. Затем тиохром извлекается из реактивной смеси изобутиловым спиртом. Тиохром в ультрафиолетовом свете дает ярко-синюю флуоресценцию. Интенсивность флуоресценции полученного испытуемого раствора с помощью специального прибора – флюорометра. Интенсивность флюоресценции прямо пропорциональна концентрации тиохрома. Флюорометрическое исследование растворов производится в флуорометре. В качестве источника ультрафиолетового излучения в нем служит ртутно-кварцевая лампа типа ПРК-1, защищенная светофильтром, пропускающим только ультрафиолетовую часть спектра. Флуорометрическое исследование проводят в затемненной комнате, при достаточной адаптации глаза к темноте. Пробирки помещают перед светофильтровой кварцевой лампой под углом 60 градусов к плоскости фильтра и приступают к исследованию. Испытуемый раствор, находящийся в пробирке будет давать в ультрафиолетовом свете синюю флуоресценцию, интенсивность которой зависит от содержания витамина в исследуемой моче. Сравнение лучше производить, поместив испытуемую пробирку между двумя смежными по значению пробирками стандартной шкалы.

Пример расчета: флуоресценция испытуемой пробы совпала с номером 2 стандартной шкалы (в ней содержится 0,75 γ тиамина). Объем суточной мочи – 1220 мл; для исследования взято 5 мл мочи. В 5 мл мочи содержится 0,75 тиамина, а в 1220 мл – Х мг тиамина.

Х = 1220х0,75/ 5 = 183 мг тиамина.

Обсуждение результатов: сравните полученные результаты с нормативными показателями обеспеченности организма.

Выводы: сделайте заключение о витаминной обеспеченности организма.

7. Определение обеспеченности организма витамином с по резистентности капилляров кожи

Методика:

При недостаточной обеспеченности организма витамином С, нарушается, как правило, проницаемость стенок капилляров, что может сопровождаться петехиальными кровоизлияниями.

С помощью прибора Нестерова на шкале манометра создается отрицательное давление 200 мм рт. ст. К коже внутренней стороны предплечья у локтевого сгиба, предварительно смазанного вазелином для герметичности, прикладывают капсулу прибора и открывают кран на 3 минуты. Под действием отрицательного давления, создаваемого под капсулой, увеличивается сосудистая проницаемость. Через 2 минуты с помощью лупы подсчитывают количество петехий. При указанных условиях воздействия количество петехий не должно быть более 5-6 штук в месте воздействия на кожу при обеспечении организма в пределах возрастной нормы.

Обсуждение результатов: сравните полученные результаты с нормативными показателями обеспеченности организма витамином С.

Выводы: сделайте заключение о С-витаминной обеспеченности организма.