Диастолическая дисфункция ЛЖ оценивалась методомAppleton C.

(1988). Определялись следующие показатели: максимальная скорость

кровотока в фазу быстрого наполнения (пик Е, см/с); максимальная скорость кровотока в систолу предсердия(пик А см/);с отношение максимальных скоростей раннего и позднего наполнения(Е/А); время замедления раннего

классифицированы как имеющие трансмитральный поток: 1 – с нарушенной релаксацией, нерестриктивный (Е/А<1, DT>150 мсек.), 2 – рестриктивный

(Е/А≥1, DT<150 мсек.); 3 - псевдонормальный (Е/А>1, DT>150 мсек.).

иммунотурбидиметрического латекс-теста на аппарате Dimension Xpand Plus, Siemens healthcare diagnostics (Германия).

Принцип анализа основан на способности сывороточного СРБ белка

вызывать агглютинацию частиц латекса, покрытых человеческими

антителами к СРБ. Агглютинация прямопропорциональна концентрации СРБ и измеряется турбидиметрией.

Нормальные значения СРБ находятся в пределах 6 мг/л.

2.2.6Определение концентрации интерлейкина 1-бета в плазме крови

Для определения ИЛ 1-бета в крови использовался ИФА-набор «ООО

Цитокин» Интерлейкин-1 бета– набор для количественного определения интерлейкина 1-бета в сыворотке и плазме.

Количественное определение ИЛ-1b основано на создании на твердой

связывающих ИЛ-1b из раствора, ИЛ-1b, кроличьих поликлональных

антител к ИЛ-1b, конъюгата пероксидазы хрена с козлиными антителами к иммуноглобулинам кролика.

Комплекс формируется при последовательном внесении в плату

соответствующих реагентов, избыток которых после инкубации каждый раз

удаляется. Количество связавшегося конъюгата, определяющего

интенсивность развития окраски в каждой лунке после прибавления раствора хромогена, пропорционально количеству ИЛ-1b в исследуемом образце.

После измерения оптической плотности раствора в лунках на основании калибровочной кривой рассчитывается концентрацияIL-1b в определяемых образцах.

Референсные значения уровня ИЛ-1b: < 5 пг/мл

2.2.7 Определение концентрации интерлейкина 6 в плазме крови

Для определения интерлейкина 6 в крови использовался ИФА-набор

реализации этого варианта использованы два моноклональных антитела с

различной эпитопной специфичностью к интерлейкину-6. Одно из них

иммобилизовано на твердой фазе(внутренняя поверхность лунок), второе конъюгировано с биотином. На первой стадии анализа ИЛ-6, содержащийся в

пропорционально количеству ИЛ-6 в исследуемом образце. На последней стадии анализа в лунки вносят авидин-пероксидазу.

Во время инкубации с субстратной смесью происходит окрашивание раствора в лунках. Степень окраски прямо пропорциональна количеству связавшихся меченных антител. После измерения оптической плотности раствора в лунках на основании калибровочной кривой рассчитывается концентрация ИЛ-6 в определяемых образцах.

Референсные значения уровня интерлейкина-6: < 5,9 пг/мл.

2.2.8 Определение количество лейкоцитов в крови

Для определения количества лейкоцитов использовался аппарат“MEK 6410K” («Nihon Kohden», Япония). В пробирку с кровью добавляют0,1 мл

2% раствора сапонина. Эритроциты подвергаются гемолизу. Содержимое

штатив с гнёздами для установки 20 капилляров. Время измерения - 1 час.

53

Методика. В капилляр набирали 5 %-ый раствор цитрата натрия до метки Р, выдували на часовое стекло, затем кровь до метки К (0,2 мл) и также выдували на часовое стекло. Промывали капилляр раствором цитрата натрия и еще 1 раз наносли кровь, набранную до метки . ККровь тщательно перемешивали с раствором цитрата натрия и набирали в тот же капилляр до метки 0. Учет вели через1 час, результат определяют по высоте столба прозрачной плазмы в мм.

Референсные значения скорости оседания эритроцитов составляли 2-15

мм/ч для мужчин и 2-20 мм/ч для женщин.

2.2.10 Определение агрегационной способности тромбоцитов

количественного содержания тромбоцитов и их агрегации.

Принцип анализа основан на том, что гемолизат тромбоцитов является

Венозная кровь стабилизировалась3,5% раствором цитрата натрия,

центрифугировалась, после чего отделялась богатая тромбоцитами плазма.

Эритроцитарный осадок отмывался физиологическим раствором хлорида натрия и центрифуировался каждый раз в течение10 минут при 1500 об/мин.

После удаления физиологического раствора0,1 мл отмытых эритроцитов гемолизировался в 1 мл дистиллированной воды. Затем из этого разведения готовили растворы гемолизата. Исследуемую богатую тромбоцитами плазму после термической обработки смешивали с каждым раствором гемолизата и

54