диссертации / 29

Хориоретиниты выявлены у 6 человек (6 глаз), панувеиты – у 4 человек (4

глаза).

Таблица 2.

Распределение детей в зависимости от этиологии и локализации патологического процесса.

Таким образом, наиболее часто ириты и иридоциклиты наблюдаются при вирусной (10,6), хламидийной (8,8%) и ревматоидной (8,8%) этиологии увеитов, парспланиты преобладают при увеитах вирусной (16%) и

смешанной (12,4%) этиологии, преобладание хориоретинитов характерно для токсоплазмозной (2,5%) и смешанной (1,6%) этиологии, панувеит наблюдался при смешанной этиологии (2,5%).

31

2.2. Клинические методы исследования

2.2.1.Лабораторно-иммунологические методы исследования

Биохимические и лабораторные исследования проводились в

клинических лабораториях МДГКБ и РДКБ.

Иммунологические исследования проводились на базе лаборатории

иммунопатологии ГКБ №9 им. Сперанского.

Иммунологические методы:

1.Определение уровня общих иммуноглобулинов G, A, M в

сыворотке крови.

Для исследования осуществляли забор венозной крови в пробирки с активатором свертывания (SiO2), центрифугировали и отбирали полученную сыворотку. Анализ проводился на биохимическом анализаторе Architect c8000 (Abbott, США) с использованием реагентов для определения IgG, IgM, IgA (Abbott).

2.Определение концентрации цитокинов в сыворотке крови и слезной жидкости.

Для исследования цитокинового профиля использовали слезную жидкость и сыворотку крови больных увеитом на 1-2 и 17-20 сутки заболевания. Оценивали концентрацию следующих цитокинов в сыворотке:

IL-1β, IL-6, IL-8, IL-10, TNF-α. В слезе смотрели: IL-1β, IL-6, IL-12 и INF-γ.

Кровь для получения сыворотки набиралась в пробирки с активатором свертывания (SiO2). После центрифугирования и полной ретракции сгустка сыворотку отбирали и хранили в течение 2-3 месяцев при температуре -70°С.

Забор слезной жидкости у пациентов проводили из нижнего конъюнктивального свода с помощью стеклянного капилляра в пробирку типа эппендорф. Хранили полученный материал в течение 2-3 месяцев при температуре 70°С.

Для определения концентрации цитокинов : IL-1β, IL-6, IL-8, IL-10, TNF-α в сыворотке крови и IL-1β, IL-6, IL-12 и INF-γ в слезе использовали

32

планшета, внесение стандартных и исследуемых образцов с последующей

инкубацией в течение 1 часа и промывкой (3 раза), внесение

биотинилированных вторичных антител с последующей инкубацией в течение 1 часа и промывкой (3 раза), внесение конъюгата стрептавидина с

инкубацией в течение 20 минут, внесение стоп-реагента. Результаты анализа учитывали спектрофотометрически при длине волны 450 нм. Оптическую плотность определяли на приборе Anthos 2020. Калибровочная кривая строилась автоматически по результатам, полученным для стандартов, и по ней определяли концентрацию исследуемого цитокина в полученных образцах. Пример калибровочной кривой для IL-10, полученной в ходе исследования, представлен на рисунке 3.

Рисунок 3. Пример калибровочной кривой для IL-10; по оси абсцисс -

33

концентрация IL-8 (пг/мл), по оси ординат - значение оптической плотности образца.

Для определения концентрации цитокина IL-8 использовали реагенты для хемилюминесцентного анализатора IMMULITE 2000XPi (Siemens Healthcare Diagnostics Inc, США). Метод детекции – ферментативно-

усиленная хемилюминесценция.

2.2.2Офтальмологические методы исследования

1.Остроту зрения у детей с коррекцией и без определяли общепринятым методом с помощью аппарата Ротта по таблицам Орловой и Головина –

Сивцева, а также с помощью ототипов на экране проектора фирмы Canon и

стандартного набора линз.

2. Рефракцию определяли по скиаскопии и на авторефрактометре Speedy-1

(Nicon) и с помощью портативного ручного авторефкератометра Retinomax

K-plus2.

3. Биомикроскопию проводили с помощью щелевой лампы фирмы TOPCON (Япония), детям младшего возраста – с помощью ручной щелевой лампы фирмы Kowa SL-15. Данный метод применяли для оценки прозрачности оптических сред роговицы, влаги передней камеры, хрусталика,

стекловидного тела, для выявления задних синехий, преципитатов,

гипопиона, шварт в стекловидном теле.

4. Для оценки состояния глазного дна, наличия или отсутствия макулярного и перипапиллярного отека, для определения состояния сетчатки при хориоретинитах применялась офтальмоскопия. Офтальмоскопию осуществляли после расширения зрачка закапыванием 0,5% раствора тропикамида или 1% раствора цикломеда прямым офтальмоскопом

«HEINE» (Германия).

34

5. Биомикроофтальмоскопия осуществлялась с помощью бесконтактной асферичной линзы (+60,0 дптр) с помощью щелевой лампы фирмы TOPCON

(Япония) на фоне максимальной циклоплегии 1% раствором цикломеда.

6. Периметрия была выполнена на компьютерном периметре «Octopus 900»

по различным программам с определением периферических границ поля зрения и уровня световой чувствительности.

7.Для уточнения тонуса глазного яблока пациентам проводилась тонометрия. Определение ВГД проводилось с помощью тонометра Маклакова и пневмотонометра «Full Auto TX-F».

8.Ультразвуковой метод применялся для оценки состояния преломляющих сред, состояния внутренних оболочек, локализации кровоизлияний.

Использовали В-эхографию с помощью ультразвукового аппарата UD-600

фирмы Topcon (Япония).

Рисунок 4. Сканограмма правого глаза пациента Л., 12 лет. Измерялась ультразвуковая проходимость в ДБ при поступлении (на 1-2 день) и при выписке (на 17-20 день).

9. На ретинальной камере RetCam II обследовалось глазное дно в

центральных и периферических отделах сетчатки вплоть до зубчатой линии.

35

При данном исследовании особенно важно получение информации о динамике процесса. Фотодокументация позволяет объективно оценивать развитие процесса на глазном дне.

Рисунок 5. Педиатрическая ретинальная камера RetCam II «Clarity Medical Systems», США.

36

Рисунок 6. Глазное дно пациента С.

10. Для оценки состояния глазного дна применялась фундускамера « CF60UD» фирмы Canon.

Рисунок 7. Глазное дно пациента М.

37

Рисунок 8. Глазное дно пациента Б.

11. Клиническую оценку состояния глаз пациентов проводили также с помощью офтальмоскопии и оптической когерентной томографии на сканере

«Stratus OCT-3000» («Carl Zeis», США) (рисунок 4).

Этот метод аналогичен ультразвуковому исследованию, но более информативен и точен, позволяет определять состояние сетчатки послойно с помощью математических показателей. Оценивалась архитектоника слоев сетчатки, толщина слоя нервных волокон, пигментного эпителия и хориоидеи.

38

Рисунок 9. Сканер «Stratus OCT-3000» («Carl Zeis», США).

Общее клиническое обследование

Для определения этиологии заболевания все дети и подростки прошли полное педиатрическое обследование. Лабораторные методы исследования включали общий анализ крови и мочи, ревматоидные пробы.

Инструментальные методы включали ЭКГ, ультразвуковое исследование почек и печени, которые были выполнены по показаниям.

Все пациенты были проконсультированы специалистами:

ревматологом, отоларингологом, кардиологом, урологом, инфекционистом,

гастроэнтерологом.

Заключительный осмотр и диагностика общей патологии проведены педиатрами Морозовской детской городской клинической больницы.

39

2.2.3. Методы лечения детей с увеитами

Все пациенты получали комплексное традиционное лечение увеитов:

антибактериальная, противовоспалительная, десенсибилизирующая,

сосудоукрепляющая, антиоксидантная, нейротрофическая терапия. Все пациенты были разделены на 2 группы.

Водну группу вошли пациенты, получавшие традиционное лечение при увеитах (40 человек, 59 глаз).

Вдругой же группе находились пациенты, прошедшие помимо традиционной терапии, курс светодиодного транскутанного облучения (40

человек, 54 глаз).

Всем пациентам проводилась общая и местная антибактериальная терапия. С первого дня заболевания делали внутримышечные инъекции антибиотиков пенициллинового ряда (оксамп), цефалоспоринового ряда

(цефазолин, цефтриаксон), макролиды (макропен), в дозировках,

соответствующих возрасту ребенка. Местно применяли антибиотики пенициллинового ряда (оксамп), аминогликозиды (тобрекс), препараты из группы фторхинолонов (ципрофлоксацин), комбинированные препараты

(макситрол) в виде капель, форсажа и субконъюнктивальных инъекций при передних увеитах, в виде парабульбарных инъекций и дробно с помощью ирригационной системы при перефирических увеитах и хориоидитах.

При увеитах герпетической этиологии использовали препараты зовиракса

(ацикловира) в виде мази и в таблетках (в соответствующих дозировках).

Проводилась терапия препаратами интерферона (офтальмоферон,

интерферон) и индукторами интерферона (полудан) в виде капель, форсажа,

субконъюнктивальных, парабульбарных инъекций и путем введения через ирригационную систему.

Кортикостероидная терапия включала назначение препарата дексаметазон в виде местной терапии.

40