Тема 47. Возбудитель дизентерии свиней

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ. Изучить свойства возбудителя и методы бактериологической диагностики.

МАТЕРИАЛЬНОЕ ОСНАЩЕНИЕ. Для демонстрации нужны таблицы, пробирки с культурой Т.hyodysenteria, чашки Петри с соевым агаром или трипсином-агаром с 5%-ной цитратной кровью крупного рогатого скота, готовые препараты-мазки, окрашенные методом Романовского-Гимзе, готовые фиксированные препараты-мазки, микроскоп с темнопольным конденсором.

При подготовке к занятию необходимо уяснить следующие вопросы:

1. Морфологические, тинкториальные и культуральные особенности дизентерии.

2. Схема бактериологической диагностики дизентерии свиней.

1. Классификация возбудителя

Сем.: Spirochaetaceae

Род: Treponema

Вид: Т. hyodysenteriae

2. Общая характеристика болезни:

Дизентерия свиней – острая инфекционная болезнь, характеризующаяся геморрагической диареей и некротическим поражением толстого кишечника. Широко распространена, в том числе и в России.

3. Восприимчивые животные:

- свиньи, особенно 5-6-месячного возраста.

4. Патогенез и факторы вирулентности:

- заражение происходит алиментарным путем;

- эндотоксины.

Методы диагностики (рис. 139)

А. Бактериологическая диагностика:

1. Материал для исследования:

- при жизни – кал;

- посмертно – слизистая оболочка большой ободочной кишки.

Рис. 139. Схема лабораторной диагностики дизентерии свиней

Рис. 140. Возбудитель дизентерии свиней в чистой агаровой культуре. Окраска простым методом. Увеличение х1000

2. Микроскопия (рис. 140):

а) проводят в раздавленной капле с конденсором «темное поле», окрашивают разведенным фуксином, по Граму, Романовскому-Гимзе;

б) в темном поле имеет извитую форму в виде нитей с завитками и острыми краями длиною от 8 до 20 мкм, такую же форму имеют и в окрашенных препаратах.

в) грамотрицательные;

г) спор не образуют;

д) капсул не образуют;

е) активно подвижны.

3. Культивирование:

а) посев на питательные среды: трипсин-агар с 5% крови крупного рогатого скота; триптический соевый бульон с 10% сыворотки крови плода коровы;

б) особенности выделения чистой культуры:

- анаэробы,

- оптимальная температура 37°С;

в) культуральные свойства:

- на плотных средах мелкие прозрачные колонии с зоной гемолиза.

4. Биопроба:

- кроликов заражают внутрибрюшинно, трепонемы размножаются и накапливаются в тестикулах.

Б. Серологическая диагностика:

- не применяется.

В. Аллергическая диагностика:

- не применяется.

5. Биопрепараты для специфической профилактики:

- не разработаны.

6. Биопрепараты для специфической терапии:

- не разработаны.

Задания для самостоятельной работы

1. Изучить культуральные особенности возбудителя дизентерии свиней.

2. Приготовить препараты "раздавленная капля" из культуры возбудителя и микроскопировать их с использованием конденсора "темное поле".

3. Окрасить по Граму готовые фиксированные препараты и микроскопировать.

Тема 48. Возбудители микоплазмозов

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ. Изучить свойства микоплазм, методы микробиологической диагностики микоплазмозов.

МАТЕРИАЛЬНОЕ ОСНАЩЕНИЕ. Для демонстрации необходимы схема-таблица микробиологической диагностики микоплазмозов, морфология микоплазм и их рост на плотной питательной среде, готовые окрашенные препараты микоплазм, микоплазменный антиген и агглютинирующая специфическая сыворотка, нормальная сыворотка – для серологической диагностики микоплазмоза птиц.

При подготовке к занятию необходимо уяснить следующие вопросы:

1. Общая характеристика болезней, вызываемых микоплазмозами.

2. Морфологические, тинкториальные, культуральные и биохимические свойства микоплазм.

3. Схема бактериологической диагностики микоплазмозов.

1. Классификация возбудителей:

Сем.: Mycoplasmataceae

Род: Mycoplasma

Виды: Мус. mycoides (перипневмония крупного рогатого скота)

Мус. agalactiae (инфекционная агалактия овец и коз)

Мус. mycoides subsp. capri (инфекционная плевропневмония коз)

Мус. gallisepticum (респираторный микоплазмоз птиц).

2. Общая характеристика болезней:

1. Перипневмония крупного рогатого скота – подострая или хроническая инфекционная болезнь, характеризующаяся пневмонией и плевритом.

2. Инфекционная агалактия овец и коз – инфекционная болезнь, характеризующаяся воспалением молочной железы и суставов, прекращением секреции молока.

3. Инфекционная плевропневмония коз – инфекционная болезнь, характеризующаяся лихорадкой, пневмонией и плевритом.

4. Респираторный микоплазмоз птиц – хроническая инфекционная болезнь кур, индеек, цесарок, фазанов, характеризующаяся поражением органов дыхания.

Микоплазмы могут осложнять нетипичное проявление острых респираторных болезней, а также вызывать гибель новорожденных животных, бесплодие, могут активизировать многие вирусы.

3. Восприимчивые животные:

- все виды, включая птиц и человека.

4. Патогенез и факторы вирулентности:

- основные пути заражения – аэрогенный, алиментарный;

- возбудитель размножается в клетках эпителия и ткани различных органов, обусловливая воспалительный процесс и дистрофические изменения;

- факторами вирулентности являются экзотоксин нейрогенного действия, термостабильный эндотоксин, гемолизины.

Методы диагностики (рисунки 141, 142, 143):

Рис. 141. Схема лабораторной диагностики микоплазмозов

Рис. 142. Схема лабораторной диагностики микоплазмозов (на возбудитель контагиозной плевропневмонии крупного рогатого скота)

Рис. 143. Схема лабораторной диагностики микоплазмозов (на возбудитель инфекционной агалактии овец и коз)

1. Материал для исследования:

В лабораторию направляют материал, исходя из локализации возбудителя в организме:

- при жизни – молоко, бронхиальная слизь, моча;

- посмертно – легкие, соскобы со слизистых оболочек, плевральный экссудат, лимфатические узлы, головной мозг и др.

2. Микроскопия:

а) методы окраски: по Граму, по Романовскому-Гимзе;

б) микрокартина: в отличие от бактерий микоплазмы лишены клеточной стенки, в связи с этим они полиморфны: шаровидные, нитевидные, ветвистые, по своим размерам очень мелкие – от 0,1 до 0,25 мкм (рис. 144);

в) грамотрицательные;

г) спор не образуют;

д) капсулу не образуют;

е) неподвижны.

3.Культивирование:

а) посев на питательные среды: используют специальные среды, содержащие полноценный белок, холестерин, нуклеиновые кислоты, углеводы и факторы роста. К ним относятся, например, среда Эдварда (отвар сердца крупного рогатого скота, пептон, сыворотка лошади, дрожжевой экстракт) и др.;

б) особенности выделения возбудителя:

- факультативные анаэробы;

- оптимальная температура 37°С;

- срок культивирования от 3 до 7 суток.

в) культуральные свойства:

- на жидких средах – помутнение и мелкозернистый осадок;

- на плотных средах – мелкие, с уплотненным центром и нежным ажурным краем колонии (яичница «глазунья»);

Рис. 144. Возбудитель микоплазмоза из чистой агаровой культуры. Увеличение х900

г) биохимические свойства:

- весьма вариабельны;

- ферментируют углеводы;

- протеолитическими свойствами не обладают;

- некоторые виды разжижают желатин;

- вызывают гемолиз на кровяных средах.

4. Биопроба:

- заражают животных в зависимости от вида микоплазм: телят, ягнят, цыплят, куриные эмбрионы,

Б. Серологический метод:

- используют РА и РСК,

- при диагностике респираторного микоплазмоза птиц – реакцию капельной агглютинации с цельной кровью (ККРА) или сывороткой крови (СКРА).

В. Аллергический метод:

- не применяется.

5. Биопрепараты для специфической профилактики:

- разработаны живые и инактивированные вакцины, которые находятся в стадии изучения.

6. Биопрепараты для специфической терапии:

- не применяются.

7. Химиотерапия:

- не чувствительны к пенициллину,

- используют препараты тетрациклинового и фторхинолонового ряда

Задания для самостоятельной работы

1. Изучить под микроскопом готовые препараты микоплазм.

2. Изучить культуральные свойства микоплазм, выросших на плотной питательной среде.

3. Поставить РА на стекле капельным методом.