Тема практического занятия 14.Вирусы гепатитов В, С, Д, ВИЧ. Микробиологическая диагностика, профилактика.

ЦЕЛИ: знать возбудителей, источники и механизмы заражения человека вирусными гепатитами, ВИЧ-инфекцией; методы их

материала при подозрении на кровяную инфекцию.

Порядок проведения занятия:

1.Вступительное слово преподавателя (цели и задачи) – мин.

2.Объяснение нового материала, методические и организационные указания преподавателя по проведению занятия - мин.

3.Самостоятельная практическая работа студентов под руководством преподавателя, оформление и проверка протоколов – мин.

4.Обсуждение полученных результатов, проверка протоколов, подведение итогов практического занятия, заключительное слово преподавателя - мин.

Вопросы для самоконтроля

1.Что понимают под терминами "трансмиссивные инфекции", "парентеральный путь заражения"? Приведите примеры.

3.Какие существуют методы микробиологической диагностики парентеральных вирусных инфекций?

4.На основании каких исследований подтверждается диагноз ВИЧинфекция?

5.Перечислить средства и методы профилактики парентеральных гепатитов, ВИЧ-инфекции.

Самостоятельная работа

68

1.Ознакомиться по демонстрационным таблицам со строением вирусов гепатита В, ВИЧ.

2.Ознакомиться с демонстрационными тест-системами для диагностики гепатита В (ИФА).

3.Ознакомиться с демонстрационными тест-системами для диагностики ВИЧ-инфекции (ИФА, иммуноблотинг).

4.Учесть демонстрационную ИФА при ВИЧ-инфекции. Дать оценку результата.

5.Оценить результаты ИФА при серодиагностике гепатита В.

6.Познакомиться с биологическими препаратами для лечения и

профилактики вирусных гепатитов В, С и D, ВИЧ-инфекции.

Дополнительный материал Строение вируса иммунодефицита человека

Вирус иммунодефицита человека (ВИЧ) относится к сложным вирусам. Имеет суперкапсид сферической формы, образованный двойным липидным слоем с гликопротеиновыми "шипами". "Шипы" образованы гликопротеином gp 160, состоящим из 2 субъединиц: gp 120 - высокоиммуногенный белок, расположенный на поверхности вируса, gp 41 - пронизывает липидный слой насквозь, он обусловливает слияние вируса с Т- лимфоцитом (после того как gp 120 связался с CD4). Под суперкапсидом расположен матриксный белок p 17 (p - протеин). Глубже всего располагается сердцевина, имеющая форму усеченного цилиндра - это нуклеокапсид. Капсид образует белок p 24. Внутри капсида находится геном вируса, представленный двумя нитями РНК (рис.34, 35). B состав ВИЧ входят ферменты: обратная транскриптаза и эндонуклеаза.

Строение вирусов парентеральных гепатитов

Вирус гепатита В (ВГВ) относится к сложным ДНК-вирусам и имеет сферическую форму. Генетический материал ВГВ представлен двуцепочечной молекулой ДНК, которая внутри вириона окружена коровым белком (HBc-антигеном). ДНК ВГВ представлена полной минус цепью и неполной плюс цепью. ДНК ВГВ кодирует четыре белка: HBs-антиген - основной поверхностный белок ВГВ, НВсантиген - внутренний белок вириона ВГВ, ДНК-полимеразу или

69

репликазу (вирусный белок-фермент, отвечающий за синтез в клетке организма-хозяина новых копий вирусных ДНК), НВх-антиген, ответственный за регуляцию синтеза матричных РНК, с которых синтезируются вирусные белки (рис.36). Еще одним антигеном ВГВ является НВе-антиген – это производное НВс-антигена. В организме больного вирусным гепатитом В ко всем вирусным антигенам (HBcAg, HBeAg, HBsAg,) вырабатываются антитела: анти-НВс, антиНВе, анти-HBs. Определение этих маркеров имеет диагностическое, прогностическое и эпидемиологическое значение.

Вирус гепатита С (ВГС) относится к сложным РНК-вирусам и имеет сферическую форму. Геном ВГС представлен нитью РНК, заключенной в капсид. Капсид с РНК покрыты оболочкой из липидов

ибелков (оболочечный белок Е1 и оболочечный белок Е2). Белки Е1

иЕ2 образуют комплекс, главными функциями которого являются обеспечение связывания вируса с клеткой и проникновения в нее

(рис. 37).

70

Вирус гепатита Д (ВГД) - дефектный РНК-вирус, выделяемый только от пациентов, инфицированных вирусом гепатита В. Дефектность вируса заключается в его полной зависимости от ВГВ. ВГД является вирусом – спутником ВГВ, его распространение связано с распространением данного вируса. ВГД представляет собой сферическую частицу средним диаметром 36 нм. Геном вируса представлен кольцевидной РНК. Суперкапсид состоит из HBsантигена и кодируется ВГВ. Внутренний антиген кодируется ВГД. Гепатит Д протекает либо как коинфекция (одновременное заражение ВГВ и ВГД), либо как суперинфекция (наслоение ВГД на текущую ВГВ - инфекцию, чаще хроническую).

Профессиональный риск заражения инфекциями, передающимися с кровью, и способы его снижения

Контакт медработников среднего звена с кровью может возникнуть на различных этапах работы с острыми инструментами: при непосредственном использовании во время работы, а также после того, как работа закончена, во время утилизации. К инструментам, представляющим риск для сотрудников лабораторной службы, относятся скарификаторы, иглы для забора крови и внутривенных вливаний.

Для предотвращения профессионального инфицирования при любых контактах с биологическими жидкостями пациента необходимо использовать средства защиты:

71

-надевать перчатки необходимо при контакте со слизистыми оболочками, кожей, а так же биологическими жидкостями любого пациента;

-если процедура предполагает разбрызгивание крови или биологических жидкостей, при работе необходимо надевать специальные экраны или очки для защиты кожи лица, слизистых оболочек глаз, рта;

-хирургические халаты, непромокаемые фартуки, нарукавники предохраняют одежду и кожу персонала от попадания на них крови и биологических жидкостей.

На каждом рабочем месте должны быть инструктивнометодические документы и аптечки для проведения экстренных профилактических мероприятий в случае аварийных ситуаций. В аптечке должны находиться: перчатки, лейкопластырь, ножницы, спирт этиловый 70%, альбуцид 20-30%, настойка йода 5%, перекись водорода 3%.

Меры профилактики заражения инфекциями, передающимися с кровью, при оказании медицинской помощи, обслуживании больных и работе с биоматериалами

Необходимо соблюдать меры предосторожности при проведении манипуляций с колющими и режущими инструментами (иглами, скальпелями, ножницами и др.); использовать безопасные технологии. Необходимо использовать средства индивидуальной защиты (хирургические халаты, перчатки, маски, защитные очки, нарукавники, фартуки, бахилы) при манипуляциях с кровью и биологическими жидкостями с целью предотвращения профессиональных контактов. Медицинские работники с ранами на руках, экссудативными поражением кожи, мокнущими дерматитами отстраняются на время заболевания от медицинского обслуживания больных, контакта с предметами ухода за ними. Во избежание ранений не допускается при заборе крови и других биологических жидкостей использование стеклянных предметов с отбитыми краями. Недопустимо производить забор крови из вены через иглу непосредственно в пробирку. Все манипуляции по забору крови и сыворотки должны выполняться при помощи резиновых груш, автоматических пипеток, дозаторов. Любые емкости с кровью,

72

другими биологическими жидкостями, тканями, кусочками органов сразу же на месте забора должны плотно закрываться резиновыми или пластмассовыми пробками и помещаться в контейнер. В лечебных стационарах кровь и другие биоматериалы должны транспортироваться в штативах, помещенных в контейнеры, биксы или пеналы, на дно которых кладется 4-слойная сухая салфетка (на случай боя посуды или опрокидывания). Транспортировка проб крови и других биоматериалов из лечебных учреждений в лаборатории, расположенные за пределами данных учреждений, должны осуществляться также в контейнерах (биксах, пеналах), исключающих самопроизвольное или преднамеренное открывание их крышек в пути следования (замок, пломбировка). Любое повреждение кожи, слизистых оболочек медперсонала, загрязнение их биологическими жидкостями пациентов во время оказания медицинской помощи должно квалифицироваться как контакт с материалом, который может содержать ВИЧ или вирусы парентеральных гепатитов.

Постконтактная профилактика

При контакте с кровью или другими биологическими жидкостями при повреждении кожи (укол, порез) необходимо:

-снять перчатки рабочей поверхностью внутрь;

-выдавить кровь из раны, укола;

-обработать пораженное место одним из антисептиков (70% этиловый спирт, 5% раствор йода - при порезах, 3% раствор перекиси водорода - при уколах);

-тщательно вымыть руки с мылом под проточной водой, а затем протереть их 70% раствором этилового спирта, на рану наложить пластырь, надеть напальчник;

-при необходимости продолжить работу - надеть новые перчатки.

При контакте с кровью или другими биологическими жидкостями при неповрежденной коже необходимо:

73