Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования

«КИРОВСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ МЕДИЦИНСКАЯ АКАДЕМИЯ»

Министерства здравоохранения Российской Федерации

Кафедра гистологии, эмбриология и цитология

Методические указания для студентов I курса

Специальности Педиатрия

к практическому занятию

по дисциплине гистология, эмбриология и цитология

Составитель: доцент Коледаева Е.В.

Тема: Гистологическая и микроскопическая техника. Методы гистологических исследований.

Цель занятия: способствовать формированию умений по технике фиксации, заливке материалов в уплотняющие среды, окраске и технике микроскопирования препаратов.

Задачи:

• Рассмотреть содержание основных этапов изготовления фиксированного и окрашенного гистологического препарата.

• Изучить тинкториальные свойства структур в гистологическом препарате.

• Изучить принципы работы и использования приборов специальной микроскопии в исследовательских целях.

• Обучить навыку микроскопирования гистологического препарата.

Студент должен знать:

1. до изучения темы (базисные знания): Представление об основных оптических приборах используемых для микроскопирования.

2. после изучения темы: Технологию приготовления микропрепаратов, составные части светового микроскопа. Теоретическую основу методов – используемых в гистологии, правила и методы микроскопирования.

Студент должен уметь: Приготовить гистологический препарат, работать со световым микроскопом, оценивать результаты гисто-химического, иммуно-цитохимического и др., методов исследований.

Студент должен владеть:

а) основами гистологической техники;

б) работой со световыми микроскопами на малом и большом увеличении;

в) подбором методик гистологического исследования для выполнения научных задач;

г)способами окрашивания гистологических препаратов для выявления специализированных структур.

Содержание занятия:

1. Вводный контроль. Проводится в виде тестовых заданий. Тестовые задания включают 10 вариантов по 5 вопросов.

2. Беседа по теме занятия. Вопросы для собеседования:

1. Что такое разрешающая способность микроскопа и от чего она зависит

2. Чему равна разрешающая способность светового и электронного микроскопов

3. Назовите основные этапы изготовления гистологических препаратов.

4. В чём сущность фиксации, и какие требования предъявляют к фиксаторам.

5. Для чего уплотнение ткани при изготовлении гистологического препарата, и какие используют уплотняющие среды.

6. Какими преимуществами обладает заливка материала в парафин

7. Как называются приборы для получения срезов, и какие основные части в них выделяют

8. Назовите оптимальную толщину срезов при использовании заливки в парафин и целлоидин

9. Какова цель окрашивания гистологических препаратов

10. Какие группы красителей используют в гистологической практике. Примеры

11. Какие структуры при окрашивании называются «оксифильными» и «базофильными». От чего зависит тинкториальные свойства структур.

12. Что является целью последнего этапа изготовления гистологического препарата.

13. Фиксаторы, используемые в электронной микроскопии, которые стабилизируют белки и фосфолипиды.

14. Какие среды применяют для уплотнения в электронной микроскопии. Чему равно оптимальная толщина срезов, используемая для электронной микроскопии

15. Как называется окрашивание в электронной микроскопии, и какие соединения используются для этих целей

3. Практическая работа.

Выполнение заданий под контролем преподавателя в виде таблиц.

1. Записать или зарисовать в альбом:

• Требования, предъявляемые к гистологическому препарату.

• Основные этапы приготовления гистологических препаратов.

• Методы окрашивания и основные типы красителей.

• Требования при работе с микроскопом.

• Методы исследования, применяемые в гистологии, цитологии, эмбриологии.

2. Выполнить номера 4,5,6,7,8 из самостоятельных контрольных работ с.16-20.

3. Освоить навыки работы со световым микроскопом на малом и большом увеличении.

4. Ситуационные задачи для разбора на занятии

1. Алгоритм решения задачи

• сформулировать определение линейного увеличения светового микроскопа

• какие объективы и окуляры бывают?

• рассчитать линейное увеличение микроскопа и ответить на вопрос задачи.

2. Пример задачи с решением

Задача: На занятии студент рассматривает микропрепарат под микроскопом с увеличением объектива в 40 раз и окуляра в 15 раз. Во сколько раз видимое изображение структур больше истинного.

Решение: Линейное увеличение микроскопа равно произведению увеличения объектива на увеличение окуляра. Рассчитаем:40*15=600. Т.е. линейное увеличение-600, а значит изображение объекта в 600 раз больше истинного.

3. Ситуационные задачи:

1. При проведении хирургической операции возникла необходимость в гистологическом анализе оперируемого органа. Какие методы гистологического исследования следует при этом использовать?

2. На лабораторном занятии по гистологии студент изучил микропрепарат при малом увеличении микроскопа, а затем хотел рассмотреть интересующую его структуру при большом увеличении, но, несмотря на попытки сфокусировать изображение, четкости он не добился, а стекло препарата разбилось. Какие ошибки были допущены при изучении микропрепарата?

3. При изучении микропрепарата в световом микроскопе интересуемая структура находится у края поля зрения, справа. В какую сторону следует переместить микропрепарат на предметном столике микроскопа, чтобы она оказалась в центре поля зрения?

Рекомендуемая литература:

• Основная:

1. Быков В.Л. Цитология и общая гистология (функциональная морфология клеток и тканей человека). – СПб: СОТИС, 2004, 2007 г. (с.12-30)

2. Кузнецов С.Л., Мушкамбаров Н.Н. Гистология, цитология и эмбриология: Учебник для медицинских вузов. – М.: ООО «Медицинское информационное агентство», , 2007,2012 г (с.19-30).

• Дополнительная:

1. Гистология, эмбриология и цитология. Под редакций Улумбекова Э.Г., Челышева Ю.А. 3-е издание переработанное и дополненное. – М: ГЭОТАГ – Медицина, 2012

2. Гистология: атлас: учеб. пособие/ Л.К.Жункейра, Ж.Карнейро; пер. с англ. под ред. В.Л.Быкова.-М.:ГЭОТАР-Медиа, 2009

3. Общая гистология: Учебно-методическое пособие по организации самостоятельной работы студентов специальностей «Лечебное дело» и «Педиатрия» / Сост.: Е.В. Коледаева, В.Б. Зайцев, И.Н.Гамулинская., Е.А. Бессолицына – Киров: Кировская ГМА. - 2009. — 83 с: 68 илл.. (с.17-22)

4) Тестовые задания для освоения цитологии, общей эмбриологии и гистологии: учебно-методическое пособие для студентов/сост.: Е.В.Коледаева, В.Б.Зайцев, И.Н.Гамулинская – Киров: Кировская государственная медицинская академия, 2013 – 90с.

Методические рекомендации подготовлены:___________________________________________

_________________________________________________________________________________

Методические указания утверждены на заседании кафедры от 12 апреля 2013, протокол №4

Зав. кафедрой: ____________________________________________________________________