- •1.Биотехнология как межотраслевая область научно-технического прогресса и раздел практических знаний, этапы ее развития.
- •2. Основные факторы, обусловившие развитие современной биотехнологии.
- •4. Области применения достижении биотехнологии.
- •5. Микроорганизмы (бактерии и высшие протисты) - основные объекты биотехнологии.
- •6. Преимущества микроорганизмов перед другими объектами в решении современных биотехнологических задач.
- •7. Принципы подбора биотехнологических объектов: модельные и базовые микроорганизмы, штаммы микроорганизмов, использующиеся в биотехнологии.
- •8. Выделение и селекция микроорганизмов, продуцентов биологически активных веществ.
- •9. Принципиальные подходы к улучшению штаммов промышленных микроорганизмов.
- •10.Промышленные энзимы, продуцируемые микроорганизмами.
- •11. Различия микроорганизмов по типу питания и отношению к кислороду.
- •12. Клетки животных и растений как объекты биотехнологии.
- •13. Использование клеточных культур в биотехнологических процессах.
- •14. Трансгенные животные и растения как новые объекты биотехнологии.
- •15. Требования, предъявляемые к питательным субстратам, использующимся в биотехнологических процессах.
- •16. Природные сырьевые материалы растительного происхождения.
- •17. Отходы различных производств, как сырье для биотехнологических процессов.
- •18. Химические и нефтехимические субстраты, применяемые в качестве сырья для биотехнологии.
- •19. Преимущества и недостатки биотехнологических производств по сравнению с химическими технологиями.
- •20. Принципиальные схемы биотехнологических процессов, определяющие конструкции биореакторов (ферментеров).
- •21. Основные требования, предъявляемые к системам, используемым для процессов ферментации.
- •22. Типы и режимы ферментации. Периодические процессы.
- •23. Типы и режимы ферментации. Непрерывные процессы.
- •24. Проблемы аэрирования, пеногашения, асептики и стерильности при различных ферментациях.
- •25. Открытые и замкнутые ферментационные системы.
- •27. Основные требования, предъявляемые к биореакторам
- •28. Системы перемешивания, применяемые в современных ферментерах.
- •29. Принципы масштабирования технологических процессов: лабораторные, пилотные и промышленные ферментеры и решаемые с их использованием задачи.
- •30. Специализированные ферментационные технологии: анаэробные, твердофазные и газофазные процессы
- •31. Особенности культивирования клеток животных, виды культур.
- •32. Особенности культивирования клеток растений.
- •33. Конечные стадии получения продуктов биотехнологических процессов.
- •34. Отделение биомассы: флотация, фильтрование и центрифугирование.
- •35. Методы дезинтеграции клеток: физические, химические и энзиматические.
- •36. Выделение целевого продукта: осаждение, экстрагирование, адсорбция, электрохимические методы, ионообменная хроматография.
- •37. Концентрирование, обезвоживание, модификация и стабилизация целевых продуктов биотехнологических процессов.
- •38. Биотехнология производства «одноклеточного» белка.
- •39. Продуценты «одноклеточного» белка: дрожжи и бактерии.
- •40. Продуценты «одноклеточного» белка: водоросли и грибы.
- •41. Требования, предъявляемые к микробному белку и возможности его использования.
- •42. Сырьевая база производства белка одноклеточных организмов; высокоэнергетические субстраты, отходы сельского хозяйства и других производств.
- •43. Область применения энзимов в биотехнологических производствах.
- •44. Преимущества и недостатки энзимных технологий.
- •45. Технология производства энзимов для промышленных целей.
- •46. Требования, предъявляемые к продуцентам энзимов.
- •47. Иммобилизованные энзимы и преимущества их применения в биотехнологии.
- •48. Носители, используемые для иммобилизации энзимов: природные и синтетические органические носители.
- •49. Типы неорганических носителей.
- •50. Способы иммобилизации энзимов: адсорбция, включение в гели и полупроницаемые мембраны; химические методы иммобилизации ферментов.
- •51. Иммобилизованные клетки в биотехнологии
- •52. Получение рекомбинантных белков с помощью прокариотических систем.
- •53. Классификация питательных сред и требования к их составу.
- •54. Использование достижений биотехнологии в охране окружающей среды.
- •56. Получение и использование трансгенных растений для повышения продукции сельского хозяйства и качества продуктов питания.
- •57. Способы индентификации трансгенной днк.
- •58. Возможные риски использования генетически модифицированных организмов для здоровья человека и окружающей среды.
- •59. Достижения молекулярной биотехнологии в генотерапии.
- •60. Биотехнология очистки промышленных отходов.
- •61. Биотехнологические способы получения энергоносителей.
- •62. Исследования генома человека и его результаты.
- •63. Получение рекомбинантных белков с помощью эукариотических систем.
- •64. Основные принципы получения трансгенных организмов.
14. Трансгенные животные и растения как новые объекты биотехнологии.
Новейшая биотехнология – наука о генно-инженерных и клеточных методах и технологиях создания и использования генетически трансформированных (модифицированных) биологических объектов для интенсификации производства или получения новых видов продуктов. Генетически модифицированный организм (ГМО) – организм, ген. материал которого может быть изменен способом, который не может быть достигнут естественным путём. Трансгенез – это процесс переноса и интеграции чужеродной генетической информации в геном живого. Трансгенные растения - растения, в которых успешно функционирует ген (или гены) пересаженные из других видов растений или животных. Получено более 50 видов трансгенных растений, которые приобрели устойчивость к насекомым-вредителям, бактериям, вирусам и т.д. Чаще всего растения наделены устойчивостью к насекомым или вирусам, гербицидам. Устойчивость к гербицидам – невосприимчивость к смертельным дозам химиатов. Устойчивость к вирусам – вводят ген вируса в растение. Пищевые продукты, полученные из таких генноизмененных культур, могут иметь улучшенные вкусовые качества, лучше выглядеть и дольше храниться. Также часто такие растения дают более богатый и стабильный урожай, чем их природные аналоги. Создание трансгенных растений в настоящее время развиваются по следующим направлениям: 1. Получение с/х культур, дающих несколько урожаев в год (например, ремонтантные сорта клубники) 2. Создание сортов с/х культур, токсичных для некоторых видов вредителей Одна из форм гена протоксина уже введена и экспрессируется в таких растениях, как томаты, табак, картофель, рис, кукуруза, яблоня, баклажан и др. Полученные растения (трансгенный картофель) оказались высокоустойчивыми к колорадскому жуку, основному вредителю картофеля. Введение гена ингибитора протеиназы из картофеля в растение риса защищает их от розового стеблевого точильщика – основного вредителя этой культуры. Холестеролоксидазы (окисление 3-гидроксистероидов с образованием перекиси водорода) – в небольших количествах проявляют высокую инсектицидную активность против личинок хлопкового долгоносика. 3. Другая возможность использования методов генетической инженерии для создания трансгенных растений состоит в получении растений, способных к фиксации молекулярного азота. Повышение урожайности сельскохозяйственных растений зависит от обеспечения их азотом. Растения получают его двумя путями: 1. Потребление внесенных в почву химических азотных удобрений (используют от 30 до 50% внесенного в-ва) 2. Биологическая фиксация молекулярного азота, которую осуществляют многие группы микроорганизмов.
Трансгенные животные – это животные, которые получены в результате переноса в их геном чужеродных генов от других видов животных или человека. 1988 г – первые трансгенные овцы. Гены, которые используются для переноса, выделяют из определенного генома или синтезируют искусственно. В мировой практике уже получены трансгенные животные, продуцирующие с молоком целый ряд лекарственных веществ: - факторы свёртываемости крови против гемофилии; - человеческий белок С для предотвращения образования тромбов; - моноклональные антитела для лечения различных форм рака Получение трансгенных животных включает следующие стадии: 1. Создание генной конструкции (выбор, получение и клонирование чужеродного гена). 2. Внедрение ее в геном организма путем микроинъекции гена в мужской пронуклеус, трансплантация зиготы реципиенту. 3. Селекция модифицированных организмов.
Трансгенные мыши получены методом микроинъекции яйцеклетки самок-доноров. В мужской пронуклеус вводят трансген. Имплантируют самке – суррогатной матери, которая рождает трансгенное потомство – основателей трансгенных линий. Создание трансгенных коров: 1. Сбор ооцитов коров, забитых на скотобойне. 2. Созревание ооцитов in vitro. 3. Оплодотворение бычьей спермой in vitro. 4. Центрифугирование оплодотворенных яйцеклеток для концентрирования желтка 5. Микроинъекция ДНК в мужской пронуклеус. 6. Развитие эмбрионов in vitro. 7. Нехирургическая имплантация одного эмбриона реципиентной самке во время течки. 8. Скрининг ДНК потомков на наличие трансгена. Трансгенные животные важны для различных биомедицинских исследований. Существует множество трансгенных животных, моделирующих различные заболевания человека (рак, атеросклероз, ожирение и др.). В практических целях трансгенные животные используются различными зарубежными фирмами как коммерческие биореакторы, обеспечивающие производство разнообразных медицинских препаратов (антибиотиков, факторов свертываемости крови и др.).