Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — метод молекулярной биологии, способ значительного
увеличения малых концентраций определённых фрагментов ДНК в биологическом материале.
Метод ПЦР изобрёл в 1983 г. Кэри Мюллис (Нобелевская премия, 1995)
В основе метода ПЦР лежит многократное удвоение определённого участка ДНК при помощи ферментов в искусственных условиях (in vitro)
В результате нарабатываются количества ДНК, достаточные для детекции. При этом происходит копирование только того участка, который удовлетворяет заданным условиям, и только в том случае, если он присутствует в исследуемом образце.
Кроме простого увеличения числа копий ДНК (амплификация),
ПЦР позволяет производить множество других манипуляций с генетическим материалом (введение мутаций, сращивание фрагментов ДНК).
Метод широко используется в биологической и медицинской практике, например, для диагностики заболеваний (наследственных, инфекционных), для установления отцовства, для клонирования генов, введения мутаций, выделения новых генов.
•
•
Для проведения ПЦР в простейшем случае требуются следующие компоненты:
ДНК-матрица, содержащая участок ДНК, который требуется амплифицировать;
два праймера, комплементарные концам требуемого фрагмента;
•
•
•
•
термостабильная ДНК-полимераза; дезоксинуклеотидтрифосфаты (A, G, C, T); ионы Mg2+;
буферный раствор.
ПЦР проводят в амплификаторе —
приборе, обеспечивающем периодическое охлаждение и нагревание пробирок, обычно с точностью не менее 0,1°C.
Фотография геля, содержащего маркерную ДНК и продукты ПЦР
Особенности строения РНК
Содержание РНК в клетке в 5 - 10 раз больше, чем ДНК.
Размеры РНК меньше, чем у ДНК.
Построены из одной полинуклеотидной цепи.
Содержат А, Г, Ц, У, рибозу.
Образуют 3 типа, имеющие особенности структуры и функций.
Все типы РНК предназначены для обеспечения биосинтеза белка
Виды и функции РНК
|
|
Транспортные |
|
|
|
|
|
|
|
||
Матричные |
Рибосомные |
||||
Снятие информации |
Перенос аминокислот |
||||
«скелет» рибосомы |
|||||
с ДНК |
к месту синтеза |
||||
|
|
||||
|
|
|
|
|
|
