13. Растворы, применяемые в искусственном осеменении.

при искусственном осеменении широко применяют специфические растворы. Ими обрабатывают стеклянную посуду и инструменты, используют при оценке качества спермы и ее разбавлении и др. Назначение этих растворов обусловлено их физико-химическими свойствами — обеспечивать предельную чистоту, стерильность посуды и инструментов, создавать благоприятные условия для жизнедеятельности половых клеток (оптимальную реакцию среды рН, буферность, осмомолярность и др.), а также защищать спермин от воздействия неблагополучных внешних факторов (понижение температуры, явление ауто- и гетероннтоксикации). Поэтому все ингредиенты для них должны быть химически чистыми, безвредными для спермиев, не иметь примесей токсичных веществ, запаха. Хранят их в герметически закрытых емкостях с этикеткой, обозначающей наименование предприятия, выпустившего препарат, название и степень чистоты: ЧДА — чистый для анализа или ХЧ — химически чистый. Используемые препараты обязаны отвечать требованиям Государственной фармакопеи; они должны быть проверены на безвредность для спермиев. Готовят растворы только на дистиллированной воде с рН не ниже 5, лучше нейтральной реакции. Для синтетических сред дистиллированную воду желательно вторично перегнать в цельностеклянном дистиллированном аппарате. Потребность в дистиллированной воде очень велика. Для мойки посуды и инструментов лучше применять деионизированную ионообменной очисткой воду.

Предусмотренные в искусственном осеменении растворы способствуют строгому соблюдению ветеринарно-санитарных правил при осуществлении технологических приемов (получение спермы и т. д.). Их объединяют в четыре группы:

1) растворы, используемые при подготовке посуды, приборов и инструментов (1 %-ным соляной кислоты (одна столовая ложка на 3 л воды), 2—3 %-ным натрия гидрокарбоната; 1 —1,5 %-ным кальцинированной соды, хромпиком и хромовой смесью.);

2) растворы для обеззараживания (0,02 %-ный фурацилин, 3 %-ная перекись водорода, 96 %-ный спирт-ректификат и 70 %-ный этиловый спирт.);

3) растворы, употребляемые для оценки качества спермы (0,9 %-ный натрия хлорида, 2,9 %-ный. натрия цитрата, 3 %-ный натрия хлорида и др.);

4) синтетические среды для разбавления спермы (Синтетические среды готовят с применением сухих заготовок или компонентов в день разбавления спермы, строго соблюдая условия стерильности. Используют их в течение 3—4 ч с момента приготовления.).

14. Методы стерилизации, применяемые в искусственном осеменении.

Употребляемое для искусственного осеменения оборудование должно быть чистым и стерильным. Для этого новые или бывшие в употреблении инструменты и посуду подвергают тщательной обработке: моют в горячем растворе пищевой (20-30 г на литр воды) или стиральной соды (10-15 г на литр воды), отмывают щеткой, ершом или марлей, навернутой на корнцанг, резиновой трубкой или куском поролона; после мытья инструменты и посуду тщательно прополаскивают горячей водой, а затем дистиллированной, протирают чистым полотенцем или марлевой салфеткой, либо просушивают на воздухе, после чего стерилизуют и кладут на хранение.

Методы обеззараживания приборов и материалов.

Стерилизация кипячением. Этим способом стерилизуют стеклянную посуду, шприцы-катетеры, металлические инструменты. Воду берут дистиллированную или кипяченую, остуженную и профильтрованную. Шприц катетер перед кипячением разбирают, цилиндр шприца обвертывают бинтом и прикрепляют к нему поршень (поршни индивидуально притерты к каждому цилиндру и менять их нельзя). Склянки обертывают марлей или ватой. На дно стерилизатора кладут слой марли или ваты, помещают инструменты отдельно от посуды, наливают воды 2/3 объема и кипятят 15-20 мин. Охлаждают, не снимая крышки. Стерильным пинцетом извлекают инструменты, в шприцы вставляют поршни (тщательно удаляя воду), завертывают шприцы в салфетку или бумагу (проглаженную горячим утюгом). С посуды воду удаляют стерильными марлевыми салфетками, закрывают крышками. Пластмассовые инструменты кипятят 5 минут в 2% растворе бикарбоната натрия, обмывают дистиллированной водой, просушивают. Металлические инструменты кладут в кипящую воду (иначе они покроются ржавчиной) и кипятят 15-20 мин. Высушивают, протирают стерильными салфетками.

Стерилизация сухим жаром. Проводится в сушильном шкафу при температуре 160-180°С или в духовке плиты в течение 15-30 мин. Стерилизуют сухим жаром стеклянную посуду, шприцы-катетеры в разобранном виде, предварительно обернув их бумагой.

Стерилизация фламбированием. Фламбирование стерилизуют перед самым употреблением чисто вымытые влагалищные зеркала, ножницы и пинцеты, пенициллиновые флаконы, стеклянные палочки и т.д. Проводят фламбирование над не коптящим пламенем.

Обеззараживание спиртом. Для обеззараживания шприц-катетеров применяют 70° спирт-ректификат, с последующим удалением его стерильным свежеприготовленным 2,9% раствором цитрата натрия. Шприц тщательно отмывают от спермы 2,9% раствором цитрата натрия, набирают не менее 3 раз 70° спирт-ректификат и удаляют его остатки промыванием стерильным свежеприготовленным 2,8-3,0% раствором лимоннокислого натрия 5-6 раз. Пинцеты, стеклянные палочки и термометры обеззараживают тампонами, пропитанными 96° спиртом.