4. Микробиологическая диагностика сальмонеллёзных гастроэнтеритов. Основные принципы лечения и профилактики.

Микробиол диагностика • Материал для исследования – рвотные массы, фекалии, промывные воды желудка.

• Материал засевают на среду Эндо, на которой сальмонеллы образуют бледно- розовые колонии.

• Чистую культуру идентифицируют по биохимическим и антигенным свойствам. При идентификации выделенных культур необходим широкий набор диагностических O- и H-сывороток.

Сальмонеллезные гастроэнтериты: профилактика

• Неспецифическая – общая для всех кишечных инфекций

• Специф – ДЛЯ экстренной профилакт испол сальмонеллезные поливалентные бактериофаги

Этиотропная терапия · тяжелые формы сальмонеллезов – антибиотики

· легкие формы сальмонеллезов – = сальмонеллезные поливалентные бактериофаги, = а\б не применяются (так как они могут вызывать дисбактериоз, который в свою очередь обуславливает более длительное течение болезни)

· Для восстан норм микрофлоры ЖКТ применяют эубиотики: бифидумбактерин, лактобактерин, колибактерин.

5. Перечислите возбудителей пищевых токсикоинфекций, не относящиеся к роду сальмонелл. Краткая характеристика возбудителей пищевых интоксикаций.

Пищевые токсикоинфекции (ПТИ) – острые инфекционные заболевания, вызываемые условно-патогенными бактериями, продуцирующими экзотоксины.

Пищевая токсикоинфекция (ПТИ) вызывает большая группа бактерий; основные возбудители – Staphylococcus aureus, Proteus vulgaris, Bacillus cereus, Clostridium perfringens, Clostridium difficile, представители родов Klebsiella, Enterobacter, Citrobacter, Serratia, Enterococcus и др.

Сальмонеллезы — это полиэтиологические зооантропанозные токсикоинфекционные заболевания. Основную массу заболеваний вызывают четыре серологических типа: S. typhimurium, S. enteritidis, S. choleraesuis и S. dublin. Сальмонеллы довольно устойчивы во внешней среде, хорошо переносят низкие температуры, большие концентрации хлорида натрия и кислот, копчение. Выживают в воде и на различных предметах при комнатной температуре до 45—90 дней. При комнатной температуре сальмонеллы быстро размножаются в продуктах, не изменяя их органолептических свойств. Сальмонеллы не образуют спор и поэтому относительно быстро погибают при температуре 60 °С через 1 ч, при 70 °С — через 15 мин, а при 100 °С мгновенно.

Сальмонеллы устойчивы к высушиванию, сохраняют свою жизнеспособность в комнатной пыли 80 дней. Продолжительное время они остаются жизнеспособными и в почве. Основными источниками сальмонеллезной инфекции являются сельскохозяйственные животные, птицы, собаки, кошки, грызуны, больные люди и бактерионосители. Возбудители сальмонеллезов выделяются в окружающую среду с калом, мочой, слюной, носовой слизью. Пищевые продукты могут заражаться и мухами. Однако ведущая роль в обсеменении пищевых продуктов принадлежит зараженным животным. Наибольшую эпидемическую опасность представляют крупный рогатый скот, свиньи, грызуны, домашняя птица, особенно утки и гуси.

Бактерии рода Escherichia представляют собой группу кишечных палочек. Различают сапрофитные и патогенные штаммы кишечной палочки Escherichia coli. Она является постоянным представителем микрофлоры кишечника человека и животных. С испражнениями человека или животного, через грязные руки, оборудование, инвентарь, воду

энтеропатогенные кишечные палочки попадают на пищевые продукты, в которых при благоприятных условиях быстро размножаются.

Клинические проявления колибактериальной токсикоинфекции сходны с таковыми желудочно-кишечной формы сальмонеллезной токсикоинфекции. Инкубационный период короче (4-10 ч), а длительность заболевания — 1—3 дня. Вспышки часто наблюдаются летом.

Бактерии рода Proteus широко распространены в почве, воде, пищевых продуктах. Они обнаруживаются и в кишечнике человека. Относятся к гнилостным бактериям. Протейные бактерии подвижны, аспорогенны, устойчивы к высыханию и высокой концентрации хлорида натрия, выдерживают нагревание до 65 ºС в течение 30 мин. Некоторые представители рода обладают патогенными свойствами: участвуют в воспалительных процессах. Клиническая картина заболевания сходна с таковой сальмонеллезов. Отличается лишь более коротким инкубационным периодом, незначительным повышением температуры. Характерны схваткообразные боли в животе, рвота, стул жидкий, нередко с примесью крови. Продолжительность болезни – 2-5 суток.

Энтерококки (Enterococcus) входят в состав нормальной микрофлоры человека и животных; находятся также в почве, воде, на растениях. Энтерококки, или фекальные стрептококки, обладают антагонистическими свойствами по отношению к возбудителям кишечных инфекций. Отличаются большой устойчивостью во внешней среде и длительное время могут сохраняться в пищевых продуктах. При температуре 85 °С погибают в течении 10 мин. В остаточной микрофлоре пастеризованного молока до 80 % составляют энтерококки. При комнатной температуре они могут активно накапливаться в самых разнообразных продуктах и достигать своего максимума в течение 24 ч.

Возбудителями пищевых токсикоинфекций являются только такие штаммы энтерококков, которые обладают энтеротоксическими свойствами. Основным возбудителем токсикоинфекций является фекальный стрептококк — Streptococcus faecalis. Фекальные стрептококки более устойчивы по сравнению с сальмонеллами и кишечной палочкой к воздействию многих физико-химических факторов среды.

Источником инфекции являются человек и теплокровные животные или бактерионосители. Продукты могут быть инфицированы энтерококками при попадании в них кишечного содержимого, а также капельно-воздушным путем. Чаще эти микробы присутствуют в студнях, салатах, винегретах.

Clostridium perfringens представляет собой крупные неподвижные грамположительные спорообразующие анаэробные бактерии. Оптимальная температура роста 37-43 °С, хотя они хорошо развиваются и при 46-48 °С. В

кислой среде, при рН ниже 4,0 они не развиваются. Задерживают их развитие и хлорид натрия в концентрации 7-10 %. Споры выдерживают кипячение в течение 30—60 мин, а некоторых штаммов — до 2-6 ч, Следовательно, обычная термическая обработка не уничтожает спор термостойких штаммов. С1. perfringens обнаруживается в мясных, рыбных и растительных консервах, сале домашнего посола, кисломолочных смесях, холодных закусках и других продуктах при длительном их хранении при комнатной температуре.

Bacillus cereus относится к группе аэробных споровых бактерий, является постоянным обитателем почвы и широко распространен в окружающей среде, в том числе и на пищевых продуктах. В. cereus представляет собой крупные грамположительные палочки. Оптимальная температура роста 30-32 °С. Эти бактерии могут развиваться при довольно высоких концентрациях натрия хлорида (10-15 %). В продуктах с рН ниже 4,0 они не развиваются. Споры очень термоустойчивы и могут сохраняться в продуктах не только при обычной тепловой обработке, но и при стерилизации консервов. Причиной отравления служат Различные продукты животного и растительного происхождения.

Инкубационный период продолжается 4-16 ч. Заболевание начинается остро:

Vibrio parahaemolyticus —- возбудитель пищевых токсикоинфекций, обусловленных употреблением морской рыбы и других продуктов моря. Это грамотрицательная факультативно-анаэробная бактерия, обитающая в морской среде, особенно в прибрежных водах и устьях рек. Штаммы этого вибриона продуцируют также термостабильное внеклеточное вещество, обладающее гемолитическими свойствами.

Yersinia enterocolitica - грамотрицательная палочка. При 37 °С она не-подвижна, а при более низких температурах перемещается с помощью жгутиков. Лучше всего развивается при 22-29 °С, хотя хорошо растет и при 0-1 °С. Это одна из немногих бактерий, вызывающих заболевания, связанные с употреблением охлажденных пищевых продуктов

6. Возбуд ботулизма: название по-лат; морфол (форма, образует ли споры, жгутики, капсулу; окраска по Граму).

Возбудитель ботулизма— Сl. botulinum относится к отделу Firmicutes, роду Clostridium.

Морфология: крупные палочки с закругленными краями, перитрихи (имеют жгутики распол по всей поверхности кл), капсулы нет. Образуют споры, расположенные субтерминально, поэтому клетка имеет вид теннисной ракетки.

Тинкториальные свойства: грам«+».

7. Возбудитель ботулизма: токсин, типы токсина. Условия возникновения заболевания.

Ботулинический токсин предст собой белок, обладающий нейротоксическим действием. Ботулотоксин явл самым сильным ядом: 1 г кристаллического токсина содержит 1012 смертельных для чела доз. Смертельная доза для чела составляет 1 нг/кг массы тела, т е менее 1 мкг на чела. Напр, для чела весом 70 кг летальная доза ботулинического токсина типа А составляет около 0,09-0,15 мкг внутривенно или внутримышечно, 0,7-0,9 мкг ингаляционно и 70 мкг перорально. Летальность при поражении ботулиническим токсином составляет 35-85%. Токсинообразование у бактерий типов С, D и Е детерминировано генами умеренных фагов и проявл при интеграции ДНК бактериофага в бактериальную хромосому. У остальных типов возбуд токсинообразование опред хромосомными генами. Ботулинические токсины всех типов синтезируются в виде комплексов (протоксинов), состоящих из нейротоксина и нетоксического белкового компонента, вкл гемагглютинин (НА) и нетоксический негемагглютинирующий белок (NTNH). Протоксин имеет молекулярную массу 450 кД. Действующим началом явл нейротоксин. Однако нейротоксин без др белков комплекса явл очень лабильным. Белковый компонент явл стабилизатором и защищает нейротоксин от действия протеолитических ферментов и соляной кислоты пищеварительного тракта. У ботулинических токсинов идентифицировано 3 типа гемагглютининов (НА17, НА35 и НА70).

Добавление к ботулиническому токсину 0,3-0,5% формалина и инкубирование смеси в термостате при Т 36-37ОС в течение 3-4 нед приводит к полной потере токсичности. Обезвреженный таким способом токсин называется анатоксином. Ботулинический анатоксин испол для иммунизации людей, а также для гипериммунизации животных (лошадей) с целью получения гипериммунных сывороток (антитоксинов).

Возбуд ботулизма обнаруживается в почве, иле озер и прудов, в кишечнике разных видов домашних и диких животных, птиц и рыб (транзиторное состояние). Ботулизм регистрируется повсеместно. Больной чел не представляет опасности для окружающих. В естественных условиях резервуаром и источником возбуд инфекции явл почва. Механизм передачи – фекально-оральный. Путь передачи – алиментарный. Попадая в пищ продукты, споры клостридий ботулизма прорастают и образуют токсин. Наибольшую опасность представляют приготовленные с нарушением технологического режима мясные, рыбные и овощные герметически укупоренные консервы домашнего приготовления, ветчина, колбасы, копченая и вяленая рыба, маринованные в домашних условиях грибы.

Патогенез пищевого ботулизма включает следующие стадии: 1. Споры возбудителя ботулизма попадают в пищевые продукты, где в процессе размножения в анаэробных условиях продуцируют токсин.

2. Токсин вместе с пищевыми продуктами попадает в организм чела, сорбируется на кл слиз оболочки кишечника и всасывается в кровь. Токсин может всасываться также через слиз оболочки глаз и верхних дых путей.

3. Вместе с кровью токсин разносится по организму, попадает в мышцы и достигает периферических нерв окончаний, где нарушает передачу сигнала с 16 нервного окончания на мышечное волокно путем блокировки выделения ацетилхолина в мионевральные синапсы (“хим денервация”). В результате этого нарушается передача нервного импульса в мышцу, и развиваются характерные параличи мышц.

8. Возбудитель ботулизма: материалы для исследования. Препараты для профилактики и терапии.

Исследуемый материал: 1) для определения возбудителя – рвотные массы, промывные воды желудка, кал, секционный материал, остатки пищевых продуктов;

2) для определения ботулотоксина – кровь, моча, рвотные массы, промывные воды желудка, пищевые продукты.

Профилактика. Неспецифическая: соблюдение технологии обработки продуктов (консервы автоклавируют 30-

40 мин при температуре 1200C), в продукты вносятся ингибиторы (нитриты).

Специфическая: по экстренным показаниям лицам, употреблявшим в пищу зараженные продукты, но еще не заболевшим, назначают поливалентную противоботулиническую сыворотку и ботулинический анатоксин, затем типовые противоботулинические сыворотки по мере установление типа токсина.

Активная иммунизация проводится работникам лаб, военнослужащим и лицам, чья профессия связана с контактом с ботулотоксином.

Лечение. Неспецифическое: промывание желудка, дезинтоксикационные мероприятия, антибиотики (пенициллин, тетрациклин).

Специфическое: срочное введение поливалентной противоботулинической (А, В, Е) сыворотки

в дозе 5-10 тыс. МЕ, внутривенно или внутримышечно, после установления типа токсина – моносыворотки.

9. Стафилококк как возбуд пищевых интоксикаций: морфология: форма, расположение особей, окраска по Граму.

Стафилококки относятся к типу Firmicutes, классу Bacilli, порядку Bacillales, семейству Staphylococcaceae и роду Staphylococcus. Грам+ кокки, представлены неподвижными клетками, в мазках стафилококки расположены гроздьями винограда или одиночно, парами. Стафилококки неподвижны, спор не образуют. Некоторые стафилококки могут образовывать микрокапсулу.

10. Стафилококк: токсины и ферменты, на каких средах культивируются?

ž токсины ž адгезины – поверхностные белки, взаимодействующие с различными веществами (муцицином слизистых оболочек, протеогликанами соединительной ткани, белками внеклеточного матрикса);

ž капсула – защищает бактерии от комплементопосредованного поглощения полиморфноядерными фагоцитами, способствует адгезии микроорганизмов и их распространению по тканям;

ž компоненты клеточной стенки – стимулируют развитие воспалительных реакций: усиливают синтез ИЛ-1 макрофагами, активируют систему комплемента и служат мощными хемоаттрактантами для нейтрофилов;

ž тейхоевые кислоты – активируют систему комплемента по альтернативному пути, свёртывающую и калликреинкининовую системы, а также облегчают адгезию бактерий к эпителиальным поверхностям.

Ферменты ž каталаза разрушает перекись водорода, защищая бакт от действия токсических кислородных радикалов

ž лактамазы разрушают молекулы β-лактамных антибиотиков

ž липазы облегчают адгезию и проникновение в ткани

ž коагулаза вызывает свёртывание плазмы крови

ž гиалуронидаза

ž дезоксирибонуклеаза

ž фибринолизин

ž стафилокиназа

ž лецитиназа

Культуральные свойства ž растут на средах с 5-10 % NaCl, температурный оптимум – 30-37 °С, предпочтительна слабощелочная реакция среды

ž на плот ср (ЖСА, МСА) образуют мутные круглые ровные колонии кремового, желтого или оранжевого цвета

ž цвет колоний обусловлен наличием липохромного пигмента; его образование наиболее выражено на средах, содержащих кровь, углеводы или молоко

§ вызывают характерное разжижение желатина с образованием воронки, заполненной жидкостью (на 4-5 сут.)

§ на жидких пит средах дают равномерное помутнение, а затем рыхлый осадок, превращающийся в тягучую массу

11. Что исследуют при пищевых отравлениях? Какие методы диагностики используют?

Материалом для исследования при пищевых отравлениях являются рвотные массы, промывные воды желудка, испражнения, кровь, моча, а также остатки пищи.

Методы диагностики: 1. Бактериологический метод позволяет доказать общность бактериального штамма, выделенного от больного человека, со штаммом, выделенным из пищевого продукта.

2. Серологические методы – постановка РОНГА, ИФА, реакция преципитации, целью применения которых является обнаружение в материалах от больного и в пищевых продуктах токсинов возбудителя.

3. Бактериоскопический метод.

4. Например, стафилококки являются представителями нормальной микрофлоры организма человека, поэтому необходимо использовать количественные методы исследования.