25. Интерфероны, история открытия и изучения. Что такое интерфероногены, какие лекарственные средства являются интерфероногенами? Какие клетки организма продуцируют интерфероны?

В 1957 году сотрудники Лондонского национального института медицинских исследований (англ.)русск. вирусологи англичанин Алик Айзекс (англ.)русск. и швейцарец Жан Линдеман (англ.)русск. случайно во время опытов открыли интерферон. Исследователи столкнулись с непонятным явлением: мыши, которых заражали определёнными вирусами, не заболевали. Поиски причин этого явления показали, что мыши, не поддавшиеся заражению вирусами, в момент заражения уже болели другой вирусной инфекцией. Таким образом выяснилось, что в организме мышей один из вирусов препятствует размножению другого. Это явление антагонизма вирусов назвали интерференцией (англ. помеха, препятствие), данное явление встречается при введении в организм двух вирусов одновременно или с интервалом не более 24 часов.

После того, как интерфероны были обнаружены, их клинические испытания на людях были разочаровывающими вплоть до 1970-х годов, пока не научились очищать человеческий интерферон, после чего в больших дозировках он начал показывать эффективность против некоторых болезней^[7]. На протяжении многих лет основным поставщиком человеческого интерферона по всему миру являлась исследовательская лаборатория в Финляндии, производившая лейкоцитарный интерферон, преимущественно интерферон-альфа, с помощью лейкоцитов крови через их стимуляцию вирусом Сендаи.

Вещества, способные вызывать образование интерферонов – называются интерфероногены. К ним, помимо вирусов, многих бактерий, риккетсий, экстрактов грибков, относят различные химические вещества. Интерфероногенами являются, по сути, очень многие вещества: вакцины, иммуностимуляторы, лекарственные препараты. Считается, что сильной интерфероногенной активностью обладают препараты бактериальных липополисахаридов (продигиозан и др.), микробных полисахаридов (зимозан и др.).

Интерфероны оказывают не только противовирусное, но и антипролиферативное (противоопухолевое), иммуномодулирующее и радиопротективное действие.

В зависимости от происхождения интерфероны различаются также по первичной структуре (аминокислотная последовательность) и функциям. Их подразделяют на три класса: α -интерферон (лейкоцитарный), β -интерферон (фибробластный) и γ - интерферон (иммунный).

В хромосомах человека клонированы структурные гены интерферонов всех трех классов (21 ген). Расшифровка их нуклеотидной последовательности позволила разработать генноинженерные методы получения рекомбинантных интерферонов. Последние не уступают природным по своей активности, при этом их действие лишено видовых ограничений.

Механизм противовирусного действия интерферона состоит из нескольких этапов. Интерферон, синтезированный соответствующими клетками под воздействием вирусов или других интерфероногенов, выходит из них и связывается со специфическими рецепторами тех же или соседних клеток. Эти рецепторы индуцируют внутриклеточный сигнал для синтеза ряда ферментов. Они активируются в зараженных клетках вирусными репликативными комплексами. При этом эндонуклеаза непосредственно расщепляет вирусную иРНК, а протеинкиназа блокирует инициацию трансляции вирусных белков на рибосомах клетки-«хозяина». В конечном итоге действие этих ферментов приводит к угнетению репродукции вирусов.

Таким образом, интерферон действует посредством регуляции синтеза нуклеиноных кислот и белков, активируя синтез ферментов и ингибиторов, блокирующих трансляцию вирусных и РНК. Как правило, интерферон не спасает клетку, уже пораженную вирусом, но предохраняет соседние клетки от вирусной инфекции.

Получают интерферон двумя способами: а) путем инфицирования лейкоцитов или лимфоцитов крови человека безопасным вирусом, в результате чего инфицированные клетки синтезируют интерферон, который затем выделяют и конструируют из него препараты интерферона; б) генно-инженерным способом - путем выращивания в производственных условиях рекомбинантных штаммов бактерий, способных продуцировать интерферон. Обычно используют рекомбинантные штаммы псевдомонад, кишечной палочки со встроенными в их ДНК генами интерферона. Интерферон, полученный генно-инженерным способом, носит на­звание рекомбинантного. В нашей стране рекомбинантный интерферон получил официальное название «Реаферон». Производство этого препарата во многом эффективнее и дешевле, чем лейкоцитарного.

26. Классы интерферонов, их происхождение и действие. Механизм противовирусного действия интерферона, в чём выражается его специфичность.

27. Что собой представляет препарат интерферона, применяемый для лечения; химическая природа, отношение к температуре, условия хранения.

Препарат представляет собой группу белков (интерфероны альфа), синтезированных лейкоцитами здоровых доноров, в ответ на воздействие вируса-индуктора интерферона Лекарственные средства на основе интерферона доказали свою эффективность в лечении широкого круга заболеваний: герпетических инфекций, ВПЧ, острых и хронических форм вирусного гепатита, рассеянного склероза, волчанки, гриппа и многих других вирусных и бактериальных инфекций. Применяют интерферон и при терапии онкологических заболеваний, а также СПИДа. По способу производства существует четыре основных разновидности этого препарата: лейкоцитарный, лимфобластоидный, рекомбинантный и пегилированный. Лейкоцитарный интерферон получают из крови доноров. Для того чтобы усилить выработку нужных веществ, клетки предварительно стимулируют чаще всего с помощью непатогенных вирусов — таких частиц, которые не могут вызвать заболевание, но при этом воспринимаются клетками иммунной системы как «сигнальные». После получения такой препарат очищают и концентрируют. В него могут входить все виды интерферонов и другие биологически активные вещества. Это одновременно и плюс, и минус. Преимущество такого препарата — его высокий потенциал биологического действия. Недостаток — высокая вероятность побочных эффектов при внутримышечном введении. Лимфобластоидный интерферон получают не от человека-донора, а из культуры лимфобластных клеток, которые также обрабатывают веществами, стимулирующими иммунный ответ. Такие препараты содержат определенное соотношение различных видов интерферона и не так часто вызывают побочные эффекты. Рекомбинантные препараты получают из культуры клеток бактерий или грибов, в которые специально внедрили участок человеческого гена. Интерферон, полученный таким образом, может немного отличаться по своему строению от «природного» человеческого. Такие препараты сохраняют противовирусную активность, но стимуляции иммунитета с их помощью добиться сложно Пегилированные, или ПЭГ-интерфероны — это рекомбинантные белковые молекулы, соединенные с полиэтиленгликолем. Такое соединение увеличило срок действия интерферона в организме. Условия хранения - Интерферон хранят в прохладном, защищенном от солнечных лучей месте при температуре от +2 до +8°С. Список Б. Срок годности - 24 месяца. Готовый раствор интерферона при комнатной температуре сохраняет стабильность в течение 3-х суток.