Цель, принципы и методы лабораторной диагностики бактериальных инфекций.
Ответ.
В настоящее время известно более 2500 видов микроорганизмов, способных вызвать заболевания у человека. Диагностика инфекционных болезней при первичном осмотре больного очень часто проводится врачами амбулаторных служб.
Ранняя диагностика инфекционных заболеваний имеет большое значение не только для своевременного адекватного лечения, но и для эффективной организации противоэпидемических мероприятий.
Цель лабораторной диагностики бактериальных инфекций – установить факт наличия или отсутствия возбудителя в организме больного и на объектах окружающей среды.
Задачи микробиологических исследований – идентифицировать микроорганизмы в исследуемом материале, определить их видовую принадлежность, морфологические, биохимические, токсигенные и антигенные свойства, а также установить чувствительность выделенных микроорганизмов к антимикробным препаратам.
Принципы лабораторной диагностики бактериальных инфекций.
Принципы.
1. Всякий возбудитель любого инфекционного заболевания является живым организмом.
2. Всякий возбудитель инфекционного заболевания является комплексом антигенов, на которые организм реагирует иммунными реакциями.
3. Необходимость срочной постановки диагноза.
4. Обязательное применение комплексного метода диагностики.
Методы лабораторной диагностики бактериальных инфекций.
1. Микроскопический метод (микроскопия световая, темнопольная, фазово-контрастная, люминесцентная, электронная)
Результаты микроскопических исследований носят ориентировочный характер так как многие микроорганизмы лишены морфологических и тинкториальных особенностей, позволяющих отличить их друг от друга. Тем не менее, микроскопией материала можно определить некоторые морфологические признаки возбудителей а также установить факт наличия или отсутствия микроорганизмов в присланных образцах.
2. Микробиологический (культуральный) метод
Является «золотым стандартом» микробиологической диагностики, результаты микробиологических исследований позволяют точно установить факт наличия возбудителя в исследуемом материале.
Идентификацию чистых культур проводят до вида микроорганизма.
3. Биологический метод
4. Иммунологический метод
Сероиндикация – обнаружение возбудителя в биологическом материале от больного на основе применения специфических антител к его видовым антигенам. Как диагностическое направление, сероиндикация широко используется при экспресс-диагностике различных инфекционных заболеваний, а ее значение в верификации диагноза определяется качеством препарата из специфических антител и способом регистрации результата исследования.
Сероидентификация не является самостоятельным методом диагностики инфекционных заболеваний, а является этапом бактериологического или вирусологического методов, связанным с определением вида организма по его видовым антигенам. Этому исследованию предшествует выделение чистой культуры возбудителя, а сам процесс идентификации включает использование препаратов специфических видов антител.
Серодиагностика – постановка диагноза путем обнаружения антител к возбудителю в сыворотке крови и других биологических жидкостях как специфических биомаркеров инфекционного процесса.
Серологический метод:
выявление специфических антител и антигенов;
особую ценность серологические реакции имеют в тех случаях, когда выделить возбудитель не представляется возможным.
Иммунологические реакции
I. Простые (двухкомпонентные, осадочные) реакции протекают в 2 фазы:
иммунологическая – происходит взаимодействие антигена с антителом.
физико-химическая – комплекс «антиген-антитело», образовавшийся в первой фазе, укрупняется и выпадает в осадок.
II. Сложные реакции (многокомпонентные) – для выявления комплекса «антиген-антитело»
вводят индикаторные системы или известный компонент, помеченный различными метками.
Диагностический титр – такое разведение исследуемой сыворотки, начиная с которого положительная реакция имеет диагностическое значение.
Нарастание титра антител – устанавливается при исследовании парных сывороток, взятых от больного в разные сроки болезни с интервалом 5-7 дней. Диагностическое значение имеет нарастание титра в 4 и более раз.
ДУАСАТ
Аллергологический метод
Антигены многих возбудителей обладают сенсибилизирующим действием, что используют для диагностики инфекционных заболеваний, а также при проведении эпидемиологических исследований.
Наиболее известна проба Манту, используемая как для диагностики туберкулёза, так и для оценки невосприимчивости организма к возбудителю.