Нормально-фазовая жидкостная хроматография:
Взаимодействия веществ и неподвижной фазы
Разделение: мало- и нерастворимые в воде вещества, позиционные изомеры углеводородов с заместителями
Практическое использование нормально-
!фазовой хроматографии затруднено из-за микроколичеств воды, содержащейся в растворителях, которая закрывает адсорбционные центры силикагеля, что ведет к значительному изменению хроматографических параметров.
Обращенно-фазовая жидкостная хроматография:
неподвижная фаза – неполярная, подвижная фаза – полярная.
Неподвижные фазы: модификации силикагеля
R = -CH3, -C4H9, -C8H17, -C18H37, -C6H5
Элюенты: спирты, нитрилы, вода и пр., добавки солей
Обращенно-фазовая жидкостная хроматография
Взаимодействия веществ и неподвижной фазы
Разделение: нейтральные органические вещества, слабые кислоты, слабые основания и пр.
75 % от всех разделений ВЭЖХ – это обращенно-фазовый тип
Порядок элюирования веществ на разных неподвижных фазах
Нормальная фаза |
Обращенная фаза |
сильная полярность |
слабая полярность |
Слабополярный элюент |
Сильнополярный элюент |
Среднеполярный элюент |
Среднеполярный элюент |
Полярность веществ: A > B > C
Ионообменная хроматография
Неподвижная фаза (ионообменные смолы) имееет заряженные функциональные группы, которые взаимодействуют с анализируемыми ионизированными молекулами противо- положного заряда. Группы привиты на полимер или силикагель.
Катионит: делит катионы |
Анионит: делит анионы |
Элюенты: водные растворы солей, кислот, щелочей
Пример разделения: аминокислоты
Эксклюзионная или гель-проникающая хроматография
Неподвижные фазы имеют выраженную поровую систему: макропористые стекла, полистирол
Звено полистирола (поливинилбензола)
Применение: анализ полимеров по молекулярному весу молекул
Выбор состава элюента: |
|
|
|
|
|
||||||||||
свойства разделяемых веществ, |
Вязкость жидкостей |
||||||||||||||
свойства неподвижной фазы |
при 25 °C, мПа·с |
|
|||||||||||||
У элюентов важны свойства: |
ацетон |
0.31 |
|||||||||||||
бензол |
0.60 |
||||||||||||||
мПа·с |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
кровь (при 37 °C) |
3–4 |
||||
3 |
. 0 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
касторовое масло |
985 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
этиловый спирт |
1.07 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
этиленгликоль |
16.1 |
|
2 |
. 0 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
глицерин (при 20 °C) |
1490 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
мазут |
2022 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
ртуть |
1.53 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
метиловый спирт |
0.54 |
|
1 |
. 0 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
жидкий азот (при 77K) |
0.16 |
|
|
0 |
2 |
0 |
4 |
0 |
6 |
0 |
8 |
0 |
1 |
0 |
0 |
пропанол |
1.95 |
|
|
|
% этанола в водном растворе |
|
|
|
||||||||||
|
|
|
|
|
оливковое масло |
81 |
|||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
серная кислота |
24.2 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
вода |
0.89 |
|
Свойства элюентов: смешиваемость
Название Уксусная кислота Ацетон Ацетонитрил Бензол
Бутанол Тетрахлорид углерода Хлороформ Циклогексан
Циклопентан
Дихлорэтан
Дихлорметан
Диметилформамид Диметил сульфоксид
Диоксан Этил ацетат
Этанол
Диэтиловый эфир Гептан
Гексан
Метанол
Метилэтил кетон Изооктан
Пентан
Изопропанол Дипропиловый эфир
Тетрахлорэтан
Тетрагидрофуран
Толуол
Трихлороэтан
Вода
Ксилол
У |
к |
с |
|
||
|
|
Не смешиваются Смешиваются
Изопропанол – хороший промежуточный растворитель
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
ил |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
ид |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
та |
т |
|
|
|
|
|
р |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
и |
р |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||
|
|
ая |
|
|
он |
|
|
|
тр |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
ло |
р |
|
р м |
|
|
|
ан |
|
|
|
нт |
а |
н |
ан |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
це |
|
|
|
э ф |
и |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
л |
|
|
э ф |
|
l |
4 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||||||||||||||||
|
|
|
|
|
ни |
|
л |
|
|
|
|
ол |
|
|
|
|
ф о |
|
кс |
|
|
|
|
|
l |
2 |
|
|
|
S O |
|
|
а |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
н |
|
са |
н |
|
|
|
|
E K |
|
|
н |
|
|
|
н |
|
|
|
но |
|
|
|
C |
|
|
|
|
л |
|
|
та |
н |
|
|
|
|
|
|
|
л |
||||||||||||||||||||||||||||||||||
|
сн |
|
ет |
то |
|
з |
о |
|
|
|
н |
|
|
ах |
|
о |
|
ге |
|
пе |
|
эт |
|
C |
F |
|
|
кс |
|
|
|
а |
но |
л |
|
ил |
|
|
та |
|
|
ол |
|
|
|
та |
|
т |
а |
|
па |
|
|
ил |
|
2 |
|
|
|
уо |
|
|
|
|
а |
|
|
|
о |
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
у |
|
ц |
|
це |
|
|
н |
|
|
та |
|
|
тр |
|
ор |
|
|
ло |
|
|
ло |
|
л |
о |
|
H |
|
M |
M |
ио |
|
|
ил |
|
|
эт |
|
еп |
|
ек |
|
н |
M |
|
|
н |
р |
о |
|
|
п |
H |
|
|
H |
F |
|
л |
|
|
оэ |
|
од |
|
|
ил |
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|
|
А |
|
А |
|
Б |
е |
|
|
|
Б |
у |
|
|
|
Т |
е |
|
|
Х |
л |
|
|
Ц и |
к |
|
|
Ц и |
к |
Д |
и |
х |
|
|
|
|
C |
|
|
D |
|
|
D |
|
Д |
|
н |
Э |
т |
|
|
Эт |
а |
|
Д |
и |
|
|
|
Г |
|
|
|
Г |
М |
е |
та |
|
|
|
|
И |
з |
П |
е |
зо |
п |
|
|
Д и |
пр |
о |
|
C |
2 |
|
|
T |
|
Т |
о |
|
|
их |
л |
|
|
|
В |
|
|
|
К |
с |
|
|
|
||||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
И |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Тр |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||||||||
Свойства элюентов: элюирующая сила
Элюирующая сила – способность элюента вытеснять адсобированные анализируемые вещества с поверхности
адсорбента,
Растворитель |
, для силикагеля |
|
(нормально-фазовая) |
||
|
||
Гексан C6H14 |
0.01 |
|
Бензол C6H6 |
0.10 |
|
Бутилхлорид CH3-CH2-CH2-CH2-Cl |
0.20 |
|
Хлороформ CH3Cl |
0.26 |
|
Дихлорметан CH2Cl2 |
0.32 |
|
Изопропиловый эфир C3H7-O-C3H7 |
0.34 |
|
Этилацетат CH3-СОO-C2H5 |
0.38 |
|
Тетрагидрофуран |
0.44 |
|
|
|
|
Ацетонитрил CH3-CN |
0.50 |
|
Метанол CH3-ОН |
0.70 |
Схема хроматографа для ВЭЖХ
емкости для растворителей
насос инжектор
термостат
колонки
смеситель
детектор
емкость для слива