Фотометрические методы, включая
колориметрию и цветные реакции
Биуоретовая реакция
пептидная связь
сине-
белок + CuSO4 + NaOH → фиолетовое
окрашивание
спектр
поглощения
фотометр |
11 |
|
Люминесцентные
(флуоресцентные) методы, включая
спектральный анализ
Для веществ, испускающих излучение после поглощения света: хлорофиллы, ароматические вещества, «флуоресцентные» белки
|
S*синий |
|
|
h |
|
h |
ē |
фотосинтез |
S*красный |
|
|
|
|
h
S0 хлорофилл
Схема фотоэнергетических процессов, происходящих в молекуле |
12 |
|
хлорофилла при поглощении света (h ). |
||
|
(флуоресцентные) методы, включая
спектральный анализ
Для веществ, испускающих излучение после поглощения света: хлорофиллы, ароматические вещества, «флуоресцентные» белки
кювета с образцом
луч
возбуждения
люминесценция
|
фильтр |
|
фильтр |
источник |
возбуждения |
детектор |
|
света |
|
13
Электрохимические методы основаны на измерении электропроводности (кондуктометрия) или потенциала электрода (потенциометрия).
Ионселективные электроды: ионный состав
электрод
сравнения
внутренний
раствор
сравнения
мембрана
твердотельная или гетерогенная
Высокая точность, чувствительность, селективность, возможность определения нескольких веществ в одном растворе.
Общая схема ионселективного электрода |
14 |
|
Спектроскопические методы (атомная абсорбция, эмиссия)
Для валового содержания металлов и ряда неметаллов
озоление
tраствор ионов
|
|
|
T, Q, I |
проба + кислота |
Возбуждение атомов, спектры |
||
|
|||
|
поглощения и испускания энергии |
||
Сплошной и линейчатые спектры для разных элементов
15
Спектроскопические методы (атомная абсорбция, эмиссия)
Атомно-абсорбционная спектрометрия
Атомизация термически и пламенем t = 3000 oC
газообразное атомарное состояние
линейчатые спектры поглощения 
Спектроскопические методы (атомная абсорбция, эмиссия)
Атомно-эмиссионная спектрометрия с индуктивно-связанной плазмой
Электрический разряд в магнитном поле
аргоновая плазма, t = 10000 oC
газообразное атомарное состояние
линейчатые спектры 
излучения 
Применяемые методы анализа
Неорганические вещества и элементы
~ 500 000
Спектроскопические методы (атомная абсорбция, эмиссия)
Спектрофотометрические методы
Электрохимические методы
Органические
вещества
~ 30 000 000
Спектрофотометрические методы
низкая разрешающая способность в отношении химической структуры
Люминесцентные методы
Ограниченный круг веществ, способных к люминесценции
? ? ?
Хроматография, масс-спектрометрия
Определение и идентификация широкого круга органических веществ:
Белки, углеводы, липиды, полимеры, кофакторы, низкомолекулярные вещества, ароматические вещества, галогенсодержащие вещества, загрязнители ..
и многие другие..
19
Хроматография – по гречески писать
“graphy” цветом “Chroma”
Хроматография – это метод разделения сложных смесей на компоненты для дальнейших идентификации, измерения количества, выделения либо очистки, основанный на различиях в скоростях движения веществ в системе двух несмешивающихся и движущихся друг относительно друга фаз.
• Разделение
разделение |
• Идентификация |
|
• Определение
количества
смесь |
компоненты |
20