Лечебное дело микро / книга / Osnovy_obschey_mikrobiologii_Volina_Sarukhanova

2010 Российскийуниверситетдрубынародов Москва

Изданиевторое,переработанноеидополненное

Конспектлекций

ИИММУНОЛОГИИ ОСНОВЫОБЩЕЙМИКРОБИОЛОГИИ

Л.Е.Саруханова,Е.Г.Волина

нитета вместе с Паулем Эрлихом – автором теории гуморального иммунитета был удостоен Нобелевской премии.

остижением века стали исследования .И. Ивановского, открывшего вирусы и заложившего основы новой науки-вирусологии.

Среди отечественных исследователей немало тех, кто способствовал развитию микробиологии. Один из них - Н.Ф.Гамалея, трудами которого в России были созданы станции прививок от бешенства.

С.Н.Виноградский впервые выделил микроорганизмы, способные синтезировать органические вещества из неорганических и назвал их автотрофными.

Вобласти микробиологии работали ученые многих стран. Канадский исследователь ,Эррель открыл бактериофаг. мериканец .Стенли установил белково-нуклеиновую природу вирусов. нглийский врач лександр Флеминг в 1928 году открыл пенициллин, а его соотечественники Г.Флори и Э. ейн получили первый препарат этого антибиотика, открыв новую эру в лечении инфекционных заболеваний. век был ознаменован выдающимися открытиями в области иммунологии, вирусологии, генетики и появлением новых имен талантливых исследователей.

Вкоротком очерке истории развития микробиологии упомянуты лишь некоторые ученые. С другими именами постоянно сталкиваются в медицинских и микробиологических учреждениях ежедневно. Многие микроорганизмы названы в честь их первооткрывателей. Некоторые приборы и оборудование, методики исследования известны под именами их авторов.

аслуги многих поколений микробиологов позволили ликвидировать или значительно снизить уровень заболеваемости при ряде инфекций, организовать производство лекарственных и биологических препаратов и разработать методы диагностики, профилактики и лечения болезней, вызванных микроорганизмами. Микробиология тесно связана с другими

направлениями медицины и отраслями науки , в частности, с фармакологией.

ПРИНЦИПЫ КЛАССИФИКАЦИИ И СИСТЕМАТИКИ БАКТЕРИЙ

Методы изучения микроорганизмов:

•бактериоскопический (микроскопический) метод дает информацию о форме, размере, подвижности, тинкториальных свойствах;

•бактериологический метод позволяет изучать особенности роста микроорганизмов на плотных и жидких питательных средах;

•биохимический метод определяет ферментативные свойства микроорганизмов;

•серологический метод используется в целях изучения антигенной структуры микроорганизмов;

•биологический метод основан на использовании экспериментальных животных с целью установления патогенности (способности вызывать заболевание) изучаемых микроорганизмов или их метаболитов.

Вслучае, когда идентификация с помощью перечисленных методов затруднена, используют методы молекуляр- но-генетического контроля.

Всистеме классификации существуют таксономические категории: царство, подцарство, отдел, класс, порядок, семейство, род, вид, подвид и др. Одна из основных категорий для микроорганизмов - вид. Это “эволюционно сложившаяся совокупность микроорганизмов, имеющих общее происхождение, единый генотип, сходные признаки и свойства, проявляющиеся в стандартных условиях”. Близкие виды объединяют в роды. Семейства состоят из родов, а не-

С 20 Саруханова Л.Е., Волина Е.Г.

Основы общей микробиологии и иммунологии: Конспект лекций. – 2-е изд., перераб. и доп. – М.: Р Н, 2010. – 111 с.

Конспект лекций включает основные разделы общей микробиологии, содержит сведения о морфологии и физиологии микроорганизмов и бактериофагов, генетике бактерий. аны также главные представления об инфекции и иммунитете, методах иммунодиагностики, иммунопрофилактики и иммунотерапии.

Может быть использован при изучении курса микробиологии студентами заочного отделения по специальности «Фармация».

Подготовлено на кафедре микробиологии медицинского факультета Р Н.

© Саруханова . ., Волина .Г., 2010 © Российский университет дружбы народов, Издательство, 2010

6

•Tenericutes, к которому относятся микоплазмы, лишенные ригидной клеточной стенки.

•Mendosicutes – архебактерии с дефектной клеточной стенкой, различающиеся строением рибосом, мембран и рибосомальной РНК.

МОРФОЛОГИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ

Морфология бактерий

Самую многочисленную группу прокариот представляют собственно бактерии. По форме они подразделяются на шаровидные, палочковидные и извитые.

•Шаровидные – кокки (от лат. сoccus – зерно) име-

ют форму шариков. В зависимости от расположения различают:

моно или микрококки ( micrococcus ), характеризующиеся одиночным беспорядочным расположением;

диплококки ( diplococcus ) – парные кокки;

тетракокки ( tetracoccus ) – состоят из 4 кокков;

стрептококки ( streptococcus ) – располагаются в виде цепочек различной длины;

стафилококки ( staphylococcus ) – образуют скопления клеток, похожие на гроздья винограда;

сарцины (sarcina) – кокки, соединенные в виде пакетов ( кубиков ) за счет деления клеток в трех взаимоперпендикулярных плоскостях.

•Палочковидные подразделяются на бактерии и бациллы. Они имеют различные размеры и могут располагаться поодиночке, попарно ( диплобактерии или диплобациллы), цепочками ( стрептобактерии или стрептобациллы ). Бациллы в отличии от бактерий могут образовывать споры в неблагоприятных условиях (при недостатке питательных ве-

Пульсирующие вакуоли – участвуют в регулировании осмотического давления в клетке и удалении продуктов метаболизма.

простейших, представляющих собой наиболее примитивно организованных одноклеточных животных, присутствуют элементы дифференцировки органелл: выдели-

тельные, пищевые и пищеварительные вакуоли, анальные поры. Существуют простейшие, у которых есть подобие ротовой полости, переходящее в короткую глотку (цитостом). Особенно четко оно выражено у балантидий. этих же простейших есть и анальная пора – цитопрокт.

Фиксация на субстратах осуществляется с помощью выростов – стебельков, присосок и за счет выделения слизи. Размножаются простейшие бесполым и половым путями. Бесполое размножение может происходить путем продольного или поперечного деления клетки, множественного деления (шизогония малярийного плазмодия), почкования (у некоторых инфузорий). Половое размножение осуществляется способом копуляции (слияния клеток). В неблагоприятных условиях простейшие нередко образуют покоящиеся формы- цисты. Они обладают высокой устойчивостью. В настоящее время выделяют 7 типов простейших: Sarcomastigophora, Labirinthomorfa, Apicomplexa, Microspora, Ascetospora, Myxozoa и Ciliophora. Патогенными для человека являются представители 1, 3 и 7 типов.

ФИЗИОЛОГИЯ БАКТЕРИЙ

Физиология микроорганизмов изучает процессы питания, дыхания, роста и размножения, воздействие факторов внешней среды и взаимоотношения между представителями микромира.

никающие при этом цитоплазматические включения называются микроколониями. В них созревают элементарные тельца, окруженные общей оболочкой – хламидой. Проникновение хламидий в клетку осуществляется путем фагоцитоза. После образования микроколоний клетка – хозяин разрушается и элементарные тельца выходят наружу;

•микоплазмы – мелкие полиморфные клетки, лишенные ригидной оболочки, морфологически неоднородны: имеют вид мелких овальных или крупных шаровидных клеток. Иногда встречаются ветвящиеся формы;

•актиномицеты – лучистые грибки ( от греч. actis луч

иmykes – гриб ). Представляют собой бактерии, сходные по морфологии с грибами.

Строение бактериальной клетки

Капсула – защитный слизистый слой, расположенный снаружи клеточной стенки. В зависимости от толщины и консистенции различают макро- и микро-капсулу и слизистые чехлы. Макрокапсула видна в световом микроскопе, а микрокапсула - только в электронном. Слизистый чехол представляет собой бесструктурное, аморфное вещество.

аще капсулы представлены полисахаридами. Капсулы защищают клетку от внешних воздействий, позволяют более прочно прикрепляться к субстрату, относятся к факторам патогенности. Капсулообразование свойственно не всем бактериям и не является постоянным признаком. Патогенные бактерии образуют капсулу в макроорганизме и утрачивают ее при культивировании в бессывороточных питательных средах.

Клеточная стенка – внешняя оболочка, окружающая бактериальную клетку. Она выполняет защитную, структурную и транспортную функции и представлена слож-

ным биогетерополимером, основным компонентом которого является пептидогликан (синонимы: муреин, мукопептид, муреиновый комплекс). Муреин придает стенке прочность и играет роль при взаимодействии клетки с иммунной системой макрорганизма. В 1884 году датский исследователь ристиан Грам предложил метод окраски бактерий, включающий последовательную обработку клеток красителем генцианвиолетом, йодом, спиртом, водой, фуксином. По отношению к окраске по Граму все бактерии подразделяются на

грамположительные (грампозитивные) и грамотрицатель-

ные (грамнегативные). Первые приобретают синефиолетовую окраску, поскольку прочно удерживают комплекс “генцианвиолет – йод” и не обесцвечиваются после обработки спиртом. Грамотрицательные, которые теряют цвет под действием спирта, докрашивают фуксином в ярко розовый цвет. Конечный результат окраски обусловлен различиями в строении и химическом составе клеточной стенки. Муреин содержится в оболочках как грамположительных, так и грамотрицательных бактерий. Однако, у грамположительных микроорганизмов муреин многослойный. Муреин грамотрицательных бактерий располагается в один слой. Отличительной особенностью грамположительных бактерий является также наличие в их клеточной стенке тейхоевых кислот. Стенка грамотрицательных бактерий содержит полимерный липополисахаридный слой ( ПС), над которым расположен слой липопротеида. десь же локализованы специализированные белки – порины, проходящие через ПС и участвующие в процессе транспорта веществ. ПС обладает токсическими и антигенными свойствами. Между цитоплазматической мембраной ( ПМ) и клеточной стенкой может находиться пространство, заполненное ферментами, – периплазма. Специфика организации клеточной стенки бактерий определяет так же степень устойчивости к воздействию ряда факторов, в частности, к антибиотикам, к кислотам и др. свойства.

транспортную функции. вижение простейших осуществляется с помощью псевдоподий, жгутиков и ресничек.

Псевдоподии (ложноножки) не имеют постоянной формы и появляются только при движении в виде временных выростов на поверхности клетки за счет перетекания протоплазмы. Скорость движения у различных видов неодинакова.

Жгутики состоят из трубочек (аксонем), покрытых мембраной, связаны с цитоплазмой с помощью базального тельца и имеют белковый состав. Некоторые простейшие имеют ундулирующую мембрану, проходящую вдоль тела клетки (у трипаносом, трихомонад). трипаносом есть также кинетопласт, представляющий собой скопление НК, заключенное в крупную митохондрию, расположенную у основания жгутика.

Реснички покрывают всю поверхность клетки, устроены по типу жгутиков, но значительно короче.

Как и некоторые бактерии, отдельные виды простейших могут передвигаться путем скольжения.

Цитоскелет простейших играет роль “в перетекании” цитоплазмы и ее органелл, состоит из белковых фибрилл или более толстых образований – филаментных пучков и микротрубочек.

Ядро. Большинство простейших имеет одно ядро, но встречаются и многоядерные клетки. дро окружено двуслойной, пронизанной порами оболочкой и содержит одно или несколько ядрышек. В состав ядра входят: НК с различным типом организации ( от линейных до кольцевидных хромосом) и ядерные белки типа гистонов. еление ядра может идти как путем митоза, так и мейоза.

Рибосомы, митохондрии, лизосомы, эндоплазматический ретикулум, аппарат Гольджи у простейших по структуре и функциям аналогичны таким же органеллам у других эукариот.

Ряд микроорганизмов образует пигменты различного цвета, которые окрашивают колонии. Некоторые микроорганизмы выделяют летучие ароматические вещества и при их культивировании ощущается определенный запах. В природе существуют микроорганизмы, способные светиться. аще всего они обитают в соленой воде и могут адсорбироваться на поверхности тела рыб, мелких ракообразных, на растениях и даже на продуктах.

ВЛИЯНИЕ ФАКТОРОВ ВНЕШНЕЙ СРЕДЫ НА МИКРООРГАНИЗМЫ

На жизнедеятельность микроорганизмов оказывают влияние физические, химические и биологические факторы. По отношению к температуре ( даны средние показатели) выделяют :

–психрофильные (холодолюбивые). орошо размножаются при пониженной температуре (от +10˚С до +15˚С). Способны выдерживать и более низкие температуры.

–мезофильные. Оптимальная температура роста от + 30˚С до 37˚С.

–термофильные (теплолюбивые) Оптимум температур лежит в пределах от 50˚С до 70˚С. В природе существуют также экстремальные термофилы, обитающие в горячих источниках с температурой более 90˚С.

Микроорганизмы обладают различной устойчивостью

квысушиванию. Некоторые погибают через несколько минут или часов. Реже встречаются виды, способные перенести высушивание в течение 1 -3 месяцев. Споры сохраняют жизнеспособность месяцами и многими годами.

Действие света. Прямые солнечные лучи оказывают губительное действие на большинство микроорганизмов.

Действие радиации, ультразвука, давления.Ионизируящая

Химический состав бактериальной клетки. Вода содержится в вегетативных клетках в количествах от 75 до 85%.В спорах ее меньше – от 40 до 50%.

В сухом веществе бактерий 50 – 80% приходится на долю белков, представленых нуклеопротеидами, липопротеидами, глико и хромопротеидами. Белковую природу имеют ферменты и многие токсины.

Нуклеиновые кислоты составляют от 10 до 30%. глеводы содержатся в количестве 12 – 185% и слу-

жат, в основном, источником энергии.

ипиды в клетках различных бактерий обнаруживаются в количестве от 0,2 до 40%. Они участвуют в энергетическом обмене, входят в состав токсинов.

Из основных химических элементов клетки на долю углерода приходится 50% , кислорода - 20%, азота -14%, водорода - 8%, фосфора -3%, серы- 1%. Кроме того, бактерии содержат калий, кальций, магний, марганец, железо, кобальт, медь, цинк, железо, молибден и др.

Совокупность процессов превращения веществ и энергии, направленных на сохранение и воспроизведение жизни, называют обменом веществ или метаболизмом. Он включает два основных процесса – анаболизм и катаболизм.

Анаболизм (конструктивный метаболизм) представляет собою процесс, при котором происходят реакции синтеза молекул клетки микроорганизма.

Катаболизм (энергетический обмен), в результате которого бактерии получают энергию. Энергия выделяется при расщеплении питательных веществ как в аэробных, так и в анаэробных условиях. Катаболизм и анаболизм взаимосвязаны.

Питание бактерий. Бактерии используют самые разнообразные источники питания и энергии. По источнику энергии микроорганизмы подразделяются на:

– фототрофы (фотосинтезирующие), способные использовать энергию солнечного света;

– хемотрофы (хемосинтезирующие ) получают энергию из различных химических веществ в процессе окислительно -восстановительных реакций.

По источнику углерода различают:

–автотрофные (сами себя питающие) получают углерод из углекислого газа атмосферы;

–гетеротрофные (питающиеся за счет других) используют различные углеродсодержащие органические соединения. Они подразделяются на сапрофитов (питаются мертвым органическим веществом) и паразитов или паратрофов (пользуются органическими соединениями живых организмов).

Взависимости от природы окисляемого субстрата, который называют донором электронов (донором водорода) различают органотрофные микроорганизмы и литотрофные. Органотрофы потребляют органические, а литотрофы – неорганические источники электронов. Микроорганизмы, способные сами синтезировать необходимые органические соединения, называют прототрофами. В отличие от них, ауксотрофы нуждаются в одном или более готовых соединений, которые необходимо добавлять в среду при культивировании. Таким образом, при характеристике типа питания учитывают сочетание признаков: источник энергии и углерода, природу донора электронов.

Механизм поступления питательных веществ в клетку. Поступление питательных веществ происходит у бактерий через всю поверхность клетки. Поскольку в цитоплазму могут проникнуть очень мелкие молекулы, сложные вещества за пределами клетки предварительно расщепляются экзоферментами, выделяемыми бактериями. Питательные вещества проникают в клетку несколькими способами:

–пассивная диффузия. Вещества проходят через клеточные мембраны под действием разности концентраций внутри

ивне клетки без затрат энергии;

Микроаэрофилы нуждаются в минимальных количествах молекулярного кислорода.

Рост и размножение бактерий. Рост бактерий -

это увеличение размеров клетки.

Размножение – увеличение количества особей. Бактерии размножаются простым поперечным делением, образуя через каждые 20-30 минут две дочерние клетки.

Время генерации – период, в течение которого количество бактерий удваивается.

Размножение бактерий в стационарных условиях (в постоянном объеме среды) имеет определенные закономерности. Выделяют следующие фазы развития популяции:

-лаг–фаза - период адаптации бактерий к новой питательной среде. исло бактерий в этой фазе не увеличивается;

-лог–фаза (логарифмическая, экспоненциальная) характеризуется максимальной скоростью размножения клеток и увеличением их количества;

-стационарная фаза – концентрация клеток в среде остается постоянной в течение некоторого времени. Это объясняется тем, что количество вновь появляющихся клеток почти равно количеству отмирающих;

-фаза отмирания обусловлена постепенной гибелью клеток при истощении питательных веществ в среде и накоплением в ней токсичных продуктов метаболизма клеток.

На плотных питательных средах бактерии образуют колонии. Морфологию колоний изучают макроскопически, отмечая величину, поверхность, рельеф, цвет, форму, прозрачность колонии. Различают S- и R- формы колоний. Первые имеют правильную форму, гладкую поверхность, ровные края. R- формы отличаются неправильной формой, шероховатой, морщинистой или складчатой поверхностью и неровными краями. Появление разных типов колоний может зависеть от условий культивирования и ряда генетических факторов.

том числе и патогенная), попадает на кожу из внешней среды и ее состав нередко зависит от рода работы человека .

Микрофлора глаз. изоцим, содержащийся в слезах, обладает бактерицидным действием и внутренняя среда глазного яблока обычно стерильна. В небольших количествах в конъюнктиве могут присутствовать нейссерии и коринебактерии (непатогенные), сарцины и сапрофитные стафилококки.

Микрофлора дыхательных путей. В носоглотке обитают стафилококки и стрептококки, дифтероиды, нейссерии, среди которых могут быть и патогенные. На миндалинах постоянно обнаруживаются кокки и коринебактерии.

львеолы легких и бронхи в норме стерильны.

Микрофлора ротовой полости. В этом биотопе на-

считывается около 400 видов микроорганизмов - бактерий, грибов, простейших, вирусов. Видовой и количественный состав микрофлоры этого биотопа изменяется в зависимости от иммунного статуса организма, возраста, состояния зубов, питания и гигиены полости рта. В составе транзиторной микрофлоры встречаются и патогенные виды, попадающие как из окружающей среды, так и из других биотопов (носоглотки, кишечника ).

Микрофлора желудка. елудок – неблагоприятная среда для микроорганизмов, поскольку кислая среда желудочного сока создает естественный барьер на пути их проникновения в кишечник. При нормальной кислотности видовой состав микрофлоры аналогичен составу ротовой полости, но представлен очень малым количеством особей (не более 1000 в 1 мл содержимого).

Микрофлора кишечника. Кишечник представляет собой самый заселенный микроорганизмами биотоп, но в каждом из его отделов видовой и количественный состав

ет от 105 до 108. Наибольшее количество (в 1 г фекалий - 1012

радиация повреждает геном клетки и эффект зависит от ее вида и дозы.

Ультрафиолетовые лучи используют в борьбе с микроорганизмами. С их помощью стерилизуют воздух в помещениях лечебных учреждений - перевязочных, операционных и др.

Ультразвук обладает бактерицидным действием, повреждая при определенных частотах колебания цитоплазматические структуры и вызывая гибель клеток.

Давление. Повышение или понижение осмотического давления может вызвать гибель микроорганизмов в результате осмотического шока.

Действие химических веществ. имические веще-

ства в зависимости от концентрации, время воздействия, температуры и др. оказывают различное влияние на микроорганизмы. Они действуют на определенные клеточные структуры. ирные кислоты, мыла нарушают функции цитоплазматической мембраны. Фенол, крезол и их производные повреждают клеточную стенку и белки. Ряд красителей (генцианвиолет, бриллиантовый зеленый, трипафлавин, риванол) могут задерживать рост бактерий. Соли тяжелых металлов: свинца, меди, серебра, ртути вызывают коагуляцию белка. Вещества типа хлора и его производных ингибируют ферментные системы бактерий. В медицинской практике в качестве противомикробных средств применяют йод, перманганат калия, перекись водорода, формалин, спирт и др.

Биологические факторы, к которым относятся антибиотики, бактериоцины, ферменты, токсины, бактериофаги, способны прекратить рост и размножение микроорганизмов, и даже вызвать их гибель.

Взаимоотношения микроорганизмов в ассоциациях могут носить мирный характер или враждебный. В первом случае такие отношения носят название “симбиоз “ и проявляются в следующих формах:

мутуализм – форма, при которой партнеры извлекают взаимную пользу.

метабиоз – когда один вид микроорганизмов создает условия для жизнедеятельности другого. эробы, поглощая кислород, создают возможность для роста анаэробов.

синергизм – усиление физиологических функций существующих вместе видов в микробной ассоциации.

нейтрализм – организмы, обитающие вместе, не оказывают друг на друга никакого влияния.

саттелизм (спутничество) . Одни виды микроорга-

низмов живут рядом с другими, сопровождая их в биотопе, и улучшают свой рост.

комменсализм – форма, при которой один из партнеров извлекает пользу для себя, не причиняя вреда другим членам сообщества.

Среди микроорганизмов существуют и другие отношения – борьба за место обитания, источники питания, кислорода и т.п. Примерами таких форм взаимоотношений являются:

антагонизм – подавление одних видов микроорганизмов другими. нтагонистические взаимоотношения могут проявляться как:

антибиоз – выделение биологически активных веществ - антибиотиков, ингибирующих рост конкурентов или вызывающих их гибель,

паразитизм – форма сожительства, при которой один организм (паразит) живет за счет другого и наносит ему вред.

хищничество, когда некоторые виды микроорганизмов ведут себя как животные – хищники.

Совокупность воздействия физических, химических и биологических факторов и характер взаимоотношений между микроорганизмами формирует, регулирует и определяет видовой и количественный состав их сообществ (микробиоценозов).

ную дизентерию, возбудителей брюшного тифа, лептоспироза, полиомиелита, гепатита и др.

Микрофлора воздуха. Воздух не является благоприятной средой обитания для микроорганизмов, однако некоторые виды, выделяясь от людей, животных, из почвы могут сохраняться и переноситься через него, вызывая ряд заболеваний (туберкулез, чума, корь, дифтерия, ветряная оспа, скарлатина, грипп и др.).

Микрофлора пищевых продуктов. Инфицирование пищевых продуктов может вызвать не только их порчу, но и передачу патогенных микроорганизмов потребителям. Инфицирование возможно на всех этапах приготовления, хранения и реализации пищевых продуктов. Сроки выживания в пищевых продуктах зависят от вида микроорганизма, его формы ( вегетативная или споровая ), консистенции пищи, ее состава, рН и др.

Микрофлора тела человека (нормальная микрофло-

ра или нормофлора) представлена разнообразными микроорганизмами, совокупность которых называется эубиозом (эумикробиозом). Различают постоянную для данного биото-

па (резидентную) и непостоянную (транзиторную) микро-

флору. Последняя может быть занесена из внешней среды или из другого биотопа. В состав нормофлоры входят сапрофитные и условно – патогенные микроорганизмы.

Плод во время беременности стерилен и контаминируется при прохождении по родовым путям, а затем и микроорганизмами из окружающей среды. К возрасту трех месяцев ребенок приобретает микрофлору, представленную теми же видами, что и у взрослого.

Микрофлора кожи. Неповрежденная кожа служит барьером, препятствующим проникновению микробов в организм.. В складках кожи, протоках потовых и сальных желез обитают анаэробные сапрофиты. Субстратом для питания микроорганизмов кожи служат чешуйки эпителия, выделения потовых и сальных желез. Транзиторная микрофлора ( в

варительно засеянном кишечной палочкой. Нормативы безопасности питьевой воды допускают содержание в 100 мл не более 50 колоний непатогенных микроорганизмов при полном отсутствии термотолерантных и других колиформных бактерий, коли-фагов и клостридий.

Исследование воздуха. В воздухе определяют общее микробное число (количество микроорганизмов в 1 м3) и са- нитарно-показательные бактерии. К ним относятся гемолитические стрептококки (зеленящий и -гемолитический) и гемолитические стафилококки. Содержание патогенных кокков недопустимо в воздухе хирургических и ожоговых отделений стационаров, родильных домах и других лечебных учреждениях.. Исследования воздуха проводят двумя методами. Первый получил название седиментационного метода или метода оседания, предложенного Р.Кохом. Он заключается в том, что в различных местах помещения ставят чашки Петри с агаром и держат их открытыми в течение определенного времени, затем чашки инкубируют в термостате, подсчитывают общее количество выросших колоний и определяют количество микроорганизмов, содержащихся в помещении. По приблизительному подсчету на площадь 100 см2 в течение 5 мин оседают микробы из 10 л воздуха (1 м3 воздуха равен 1000 л). Второй метод - аспирационный выполняют с помощью аппарата Кротова, в который на специальную вращающуюся поверхность помещают чашку с питательным агаром, закрывают аппарат крышкой с прорезью, через которую во время работы всасывается воздух и микроорганизмы оседают на поверхности среды. Скорость вращения и объем проходящего воздуха регулируются. ашки затем помещают в термостат, инкубируют 24 ч при температуре +37ºС и подсчитывают количество выросших колоний.

ная общий объем воздуха, поступившего в аппарат, вычисляют количество микроорганизмов, содержащихся в 1 м3 .

Специальными правилами регулируются санитарные условия работы в различных помещениях аптек.

микробных клеток) и разнообразие видов присутствует в толстой кишке. Около 95% всех видов микроорганизмов в этом биотопе составляют анаэробные бактерии. На микрофлору кишечника оказывают влияние возраст человека, диеты, сопутствующие заболевания, антибиотикотерапия, экология и др. здоровых людей соотношение видов различных микроорганизмов сбалансировано. При различных заболеваниях наблюдаются нарушения видового и количественного соотношения микроорганизмов – дисбиоз или дисбактериоз. В первом случае изменяется соотношение между различными группами микроорганизмов ( бактерии и грибы), а во втором – между отдельными видами бактерий. Нормальная микрофлора кишечника выполняет ряд положительных функций. Так, лакто- и бифидобактерии продуцируют молочную кислоту и поддерживают рН среды, препятствующую росту гнилостных и некоторых патогенных микроорганизмов. Некоторые виды выделяют антибиотические вещества, разрушают токсические и канцерогенные соединения. Нормофлора желудочно-кишечного тракта участвует в образовании слизистого барьера, обволакивающего стенки кишечника и выполняющего защитную функцию. Она созда-

ет и колонизационную резистентность - совокупность за-

щитных факторов организма, предотвращающих заселение слизистых оболочек посторонними, в том числе патогенными микроорганизмами. Основную роль в поддержании колонизационной резистентности играют анаэробные лакто- и бифидобактерии. При нарушениях эубиоза с помощью специальных препаратов проводят “селективную деконтаминацию“- избирательное устранение нежелательных видов аэробных микроорганизмов.

Микрофлора желчных путей и желчного пузыря.

Микрофлора в этих биотопах в норме отсутствует, поскольку желчь обладает сильным бактерицидным действием. ишь при некоторых заболеваниях (брюшной тиф, паратифы) обнаруживаются устойчивые к желчи микроорганизмы.

Микрофлора мочеполовой системы. Почки, моче-

точники, мочевой пузырь здоровых людей не содержат микроорганизмов. На наружных половых органах локализуются сапрофитные микроорганизмы различных групп..

Микрофлора влагалища. В этом биотопе постоянно

период полового созревания женщин и в сочетании с другими микроорганизмами и показателями рН среды определяет степень чистоты влагалища (различают 4 степени).

В медицинскую практику все шире внедряются препараты, получившие название эубиотиков или пробиотиков, в состав которых входят бактерии, представляющие нормальную микрофлору организма человека. Такие препараты (колибактерин, споробактерин, бифидумбактерин, пробифор, бификол, лактобактерин и др.) используются для восстановления нормофлоры кишечника, при лечении острых кишечных расстройств, дисбиозов, многие из которых явились результатом лечения больных антибиотиками. В ряде случаев их добавляют в состав смесей для лечебного питания и молочных продуктов для детей в возрасте до года.

МИКРОБИОЛОГИЯ ЖИВОТНОГО И РАСТИТЕЛЬНОГО ЛЕКАРСТВЕННОГО СЫРЬЯ

Микробиология животного сырья. екарственные средства для производства которых используют различные органы и ткани животных называются органопрепаратами.

Кним относят препараты группы гормонов, ферментов,

аминокислот, витаминов и др., выпускаемые в виде различных форм.

ивотное сырье может быть контаминировано микроорганизмами на всех этапах приготовления и хранения. Микробы могут попасть в него как из внешней среды, так и

ностью ферментировать лактозу при более высокой (44ºС) температуре. Их обозначают иногда как ФКП (фекальные кишечные палочки) и они свидетельствуют о свежем фекальном загрязнении почвы. К БГКП относятся также клебсиеллы, цитробактер, энтеробактер, обладающие теми же свойствами, что и кишечные палочки. Санитарнопоказательным микроорганизмом для почвы служит и спо-

рообразующий анаэроб - Clostridium perfringeens.

Исследование воды. В воде для оценки ее санитарного состояния определяют общее микробное число, общее количество БГКП, сульфатредуцирующих клостридий и колифагов (как показатель наличия кишечной палочки).

ля определения общего микробного числа пробы исследуемой воды в количестве 1 мл высевают на питательный агар и после культивирования при 37ºС в термостате в течение 24 час подсчитывают общее число выросших колоний, определяя тем самым количество колониеобразующих единиц - КО . В тех случаях, когда перед посевом готовили разведения исследуемой воды, количество выросших колоний умножают на степень разведения.

Общее количество колиформных бактерий как санитарный показатель определяют методом мембранных фильтров. Определенные объемы исследуемой воды пропускают через мембранный фильтр и этот фильтр, на поверхности которого оседают БГКП, помещают на среду Эндо и инкубируют при +37ºС 24 часа. Колиформные бактерии разлагают лактозу и образуют колонии интенсивного розового цвета. Эти колонии подсчитывают, а затем окрашивают по Граму, определяют оксидазную активность микроорганизмов и ферментацию лактозы выделенными из них микроорганизмами.

Сульфатредуцирующие клостридии выделяют при выращивании на железосульфитном агаре при + 44ºС.

Коли-фаги выявляют на основании проявления зон лизиса (образование негативных колоний) на газоне, пред-