АГГЛЮТИНИРУЮЩИЕ ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ИММУННЫЕ СЫВОРОТКИ

Получают иммунизацией животных (кроликов) п/к или в/в суспензией убитых нагреванием при 60º С в течение 1 ч взвеси бактерий. Иммунизацию проводят с интервалами между инъекциями в 5-8 дней. Затем у животных стерильно берут кровь, получают сыворотку, определяют ее титр, добавляют консерванты и расфасовывают в ампулы.

ТИТР СЫВОРОТКИ – максимальное разведение сыворотки в котором

обнаруживаются антитела к гомологичному виду бактерий. Иммунные диагностические сыворотки имеют высокое содержание специфичных антител.

Иммунные сыворотки бывают:

• видовыми (неадсорбированными) – их получают иммунизацией

кроликов целыми бактериальными клетками

• адсорбированными и моновалентными – их получают в

реакции адсорбции агглютининов по Кастеллани

Реакция адсорбции агглютининов по Кастеллани

применяется для детального изучения антигенной структуры бактерий

При наличии у разных бактерий одинаковых (групповых) антигенов они могут агглютинироваться одной и той же сывороткой, что затрудняет их идентификацию

Реакция адсорбции агглютининов по Кастеллани основана на способности близкородственных бактерий адсорбировать из иммунной сыворотки только групповые антитела.

Полученные сыворотки называются адсорбированными или монорецепторными, так как содержат антитела только к типовым или даже одному определенному антителу

РЕАКЦИИ АГГЛЮТИНАЦИИ

(ЛАТ. «AGGLUTINAΤIO» - слипание, склеивание)

ПРОЯВЛЯЮТСЯ СКЛЕИВАНИЕМ И ВЫПАДЕНИЕМ В ОСАДОК ЦЕЛЫХ МИКРОБНЫХ КЛЕТОК (КОМПЛЕКС АНТИГЕНОВ) ПРИ ВЗАИМОДЕЙСТВИИ С ГОМОЛОГИЧНЫМИ АНТИТЕЛАМИ В ПРИСУТСТВИИ ЭЛЕКТРОЛИТОВ

РЕАКЦИИ АГГЛЮТИНАЦИИ

ДЛЯ ПОСТАНОВКИ ЛЮБОЙ РЕАКЦИИ АГГЛЮТИНАЦИИ НЕОБХОДИМО ИМЕТЬ 3 КОМПОНЕНТА:

ВЗВЕСЬ БАКТЕРИАЛЬНЫХ КЛЕТОК или частиц с

адсорбированными на них антигенами -

АГГЛЮТИНОГЕН

ИММУННУЮ СЫВОРОТКУ, СОДЕРЖАЩУЮ ГОМОЛОГИЧНЫЕ К АНТИГЕНУ АНТИТЕЛА - АГГЛЮТИНИН

ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЙ РАСТВОР - ЭЛЕКТРОЛИТ

РЕАКЦИЯ АГГЛЮТИНАЦИИ ПРОТЕКАЕТ В 2 ФАЗЫ:

ПЕРАЯ ФАЗА – СПЕЦИФИЧЕСКАЯ. Происходит

комплементарное взаимодействие антигена (целой бактериальной клетки или частицы, несущей гомологичные антигены) и антитела. Образуется иммунный комплекс. Эта фаза невидимая

ВТОРАЯ ФАЗА – НЕСПЕЦИФИЧЕСКАЯ. В

присутствии электролита иммунные комплексы склеиваются, образуя агрегаты

(агглютинаты), хорошо различимые визуально