- •1. Медицинская микробиология, ее предмет, методы, связь с другими науками
- •2. Основные этапы развития микробиологии
- •3. Микроорганизмы и их положение в системе живого мира
- •5. Структура бактериальной клетки
- •6. Основные методы изучения морфологий бактерий.
- •7. Химический состав бактериальной клетки
- •8. Спорообразование.
- •9. Действие физических факторов на микроорганизмы
- •10. Действие химических факторов на микроорганизмы. Дезинфекция
- •11. Питание бактерий
- •12. Питательные среды
- •13. Бактериологический метод изучения микроорганизмов
- •14. Дыхание бактерий
- •15. Ферменты бактерий, их биологическая роль
- •16. Рост и размножение микроорганизмов
- •17. Актиномицеты, их морфология
- •18. Спирохеты, их морфология и биологические свойства
- •19. Риккетсии, их морфология и биологические свойства
- •20. Морфология и ультраструктура микоплазм
- •21. Хламидии, морфология и другие биологические свойства
- •22. Грибы, их морфология и биологические свойства
- •23. Дрожжеподобные грибы рода кандида
- •24. Дейтеромицеты
- •25. Вирусы бактерий – фага
- •26. Морфологая, ультраструктура и химический состав вирусов
- •27. Взаимодействие вируса с клеткой
- •28. Методы культивирования вирусов
- •29/30. Культуры клеток, их виды
- •31. Изменчивость микроорганизмов
- •32. Мутации
- •33. Генетические рекомбинации
- •35. Нормальная микрофлора тела человека
12. Питательные среды
В лабораторных условиях бактерии выращивают на питательных средах. Большое значение для роста и размножения бактерий имеют температурные условия. Все микроорганизмы по отношению к температурному режиму подразделяются на три группы: психрофильные (холодолюбивые), мезофильные (средние), термофильные (теплолюбивые) (табл. 5). Бактерии могут размножаться в широком диапазоне температур—от 0°С до +90°С.
Для жизнедеятельности бактерий большое значение имеет рН среды. Каждый вид микроба в процессе эволюции приспособился для существования в определенных границах рН, за пределами которых жизнедеятельность его невозможна.
Предполагают, что рН влияет на активность ферментов. В зависимости от рН слабые кислоты в кислой среде находятся в виде молекул, а в щелочной—в виде ионов. Сапрофиты могут жить в условиях с чрезвычайно широким диапазоном рН — от 2 до 8,5. Патогенные же виды микробов растут при рН 6—8 (табл. 6).
Питательные среды должны быть легкоусвояемыми, с известным составом азотистых и углеводных веществ, витаминов, необходимой концентрацией солей, изотоничные, стерильные, обладать буферными свойствами, иметь оптимальную вязкость и определенный окислительно-восстановительный потенциал.
Питательные среды подразделяются на четыре основные группы: универсальные, специальные, избирательные (элективные) и дифференциально-диагностические.
I. Универсальные среды (мясо-пептонный бульон, мясо-пептонный агар) содержат питательные вещества, в присутствии которых растут многие виды патогенных и непатогенных бактерий. П. Специальные среды применяют для выращивания бактерий, не размножающихся на универсальных средах. К специальным средам относятся кровяной агар, сывороточный агар, сывороточный бульон и др.
III. Избирательные (элективные) среды; в них хорошо развиваются только определенные виды бактерий, плохо или совсем не растут другие виды. К ним относятся среды обогащения, в которых интересующий исследователя вид растет интенсивнее и быстрее сопутствующих бактерий. Так, например, щелочная пептонная вода и щелочной мясо-пептонный бульон являются средами обогащения (элективными) для холерного вибриона. Питательные среды, содержащие определенные концентрации пенициллина или других антибиотиков, элективны для устойчивых к этим антибиотикам штаммам и вместе с тем селективны для антибиотикочувствительных культур.
IV. Дифференциально-диагностические среды используют для дифференциации определенных видов бактерий по их культуральным и биохимическим свойствам. К ним относятся:
1) среды для определения протеолитической способности микробов (мясо-пептонный желатин и др.);
2) среды для определения ферментации углеводов (среды Гисса и др.); среды для дифференциации бактерий, ферментирующих и не ферментирующих лактозу (Эндо, Дригальского, Плоскирева и др.);
3) среды для определения гемолитической способности- (кровяной агар);
4) среды для определения восстановительной (редуцирующей) способности микроорганизмов;
5) среды, содержащие вещества, ассимилируемые только определенными микробами.
Кроме того, в лабораторной практике применяют консервирующие среды. Их используют для первичного посева и транспортировки исследуемого материала; они предотвращают отмирание патогенных микробов и способствуют подавлению сапрофи-тов. К этой группе сред относят глицериновую смесь, состоящую из 2 частей 0,85% раствора хлорида натрия, 1 части глицерина и 1 части 15—20% раствора фосфата натрия, а также глицериновый консервант с солями лития, гипертонический раствор хлорида натрия и др.
В настоящее время многие питательные среды изготовляют фабричным способом и выпускают в виде порошка. Они удобны в работе, стойки и весьма эффективны.
Для культивирования бактерий стали широко применять безбелковые среды, в которых хорошо растут многие гетеротрофные, в том числе и патогенные, микробы. Состав этих сред сложен, они включают большое количество компонентов.
Культивирование в синтетических средах с использованием метода меченых атомов дает возможность более детально дифференцировать микробы по характеру их биосинтеза.
С целью дифференциации прототрофных и ауксотрофных бактерий широко используют селективные среды. Прото-трофы растут на минимальной среде, содержащей только соли и углеводы, так как они сами способны синтезировать нужные им для развития метаболиты, в то время как ауксотрофы нуждаются в средах, содержащих определенные аминокислоты, витамины и другие вещества.
По консистенции питательные среды бывают плотные (мясо-пептонный агар, мясо-пептонный желатин, свернутая сыворотка, картофель, свернутый яичный белок), полужидкие (мясо-пептонный агар) и жидкие (пептонная -вода, мясо-пептонный бульон, сахарный бульон и др.).