Дезинфектология / Вашков В.И. Антимикробные средства и методы дезинфекции при инфекционных заболеваниях

бацилл. С целью обеззаражи,вания белье погружают в

бак с дезинфицирующим раствором последовательно, од­

ну вещь за другой, следя, чтобы между вещам·и не об­

разовались воздушные прослойки, препятствующие про­ цессу дезинфекции. Одновременно между слоями белья кладут (сверху, в середине и внизу) мешочки с зара­ женными тест-объектами. Через определенные пром~­ жутки (15, 30, 60 мин и более) мешочки с тест-объекта­

ми извлекают одновременно из трех слоев. Тест-объект

вынимают стерильным пинцетом из мешочка, нейтрали­

зуют или промывают его в стерильной водопроводной

воде, после чего помещают в питательный бульон.

В контрольных опытах белье погружают в водопровод­

ную воду. Мешочки с тестам·и закладывают так же, как

и в основном опыте. Посевы выращивают при 37 °С в те­

чение 7 сут. При наличии роста производят посев на твердые питательные среды и идентифицируют культуру.

Эффективным считают средство, обеспечивающее ги­ бель 100% рабочих культур в обеззараживаемом белье.

При получении положительных данных (гибель 100% рабочих штаммов) в опытах по обеззараживанию белья,

зараженного чистыми культурами, переходят к опытам

по обеззараживанию загрязненного белья. С этой целью к 6 мл взвеси 2-миллиардной суточной культуры золо­ тистого стафилококка или споровой взвеси антракоида прибавляют 4 м.u инактивированной сыворотки, смеши­ вают их и заливают полученной взвесью тест-объекты

из расчета 20 мл на 10 тест-объеrпов. При рабt1те с куль­

турой кишечной· палочки к 6 мл добавляют 4 мл 40%

эмульсии кала (8 г кала растирают в ступе с 20 м.:r во­ ды). Зараженные тест-объекты подсушивают при теч­ пературе 37 °С в течение 20-25 мин. Опыты по обезза­

раживанию загрязненного белья и контроль эффектив­

ности проводят как и при обработке чистого белья. Определение активности средств при обеззаражива­

нии посуды. Активность дезинфицирующих средств при

обеззараживании посуды изучают с целью разработки эффективных режимов обеззараживания ее в зависимо­

сти от наличия и отсутствия остат~ов пищи на ней, тем­

пературы растворов, времени обработки, концентрации действующего начала.

Для обеззараживания посуды в качестве тест-объек­

тов используют тарелки, стаканы, эмалированные круж­

ки, ножи, вилки, ложК'и. Вначале чистую посуду (тарел-

60

ки, стаканы) заражают 2-миллиардной взвесью суточ­

н<1fl культуры путем нанесения ее при помощи пипетки

на поверхность посуды, как при заражении тест-поверх­

ностей. Вилки, ложки и ножи погружают в бактериаль­

ную суспензию на l-2 мин, оставляя незараженными их

ручки. Зараженную посуду подсушивают в комнатных

условиях. Подготовленную таким образом посуду после полного высыхания погружают в испытуемый раствор так, чтобы между :предметами находился дезинфицирую­ щий раствор, который должен полностью покрыть всю

посуду. Через определенные :интервалы (15, 30, 60 мин

и более) из дезинфицирующего раствора извлекают по одному предмету (тарелка, стакан, нож и т. д.) и ват­ ным тампоном или марлевой салфеткой тщательно про­

тирают зараженную часть каждого предмета. Отмывают

тампон или ,салфетку в 10 мл стерильной водопроводной воды с бусами в широкогорлых пробирках путем встря­ хивания в течение 10 мин. После отмыва ватный та,мпон или марлевую салфетку засевают на жидкие питатель­ ные среды. Отмывную жидкость в количестве 0,5- l мл

засевают на питательные среды для подсчета колоний.

Контролем служит аналогично загрязненная посуда, по­

груженная в ·водопроводную воду на самую длительную

экспозицию.

При гибели 100% рабочих штаммов при обеззаражи­

вании чистой посуды, искусственно инфицированной тест­

культурой, переходят ·к обеззараживанию посуды, за­ грязненной остатками пищи. Для этого перед нанесени­

ем на посуду культуры, последнюю смешивают .с не­

большим количеством овсяной, манной или какой-либо другой каши, сваренной на молоке со сливочным мас­ лом. На 10 г каши берут l мл 2-миллиардной взвеси

бактериальной или споровой культуры. Методика обез­

зараживания посуды, забор проб и высев на питатель­ ную среду аналогичны опытам с чистой посудой. Эф­

фективным считают средство, обеспечивающее гибель l 00 % микроорганизмов.

Определение активности дезинфицирующих средств при обеззараживании мочи. Изучая бактерицидную ак­

тивность дезинфицирующих средств при обработке мочи,

учитывают концентрацию действующего начала, время

обработки, температуру.

Опыты по обеззараживанию мочи проводят следую­ щим образом. Берут неско.т~ько колб или пробирок, на-

61

ливают в них по 8 мл мочи, прибавляют по 1 мл 2-мил­ лиардной взвеси тест-микробов и 1 мл инактивирован­

ной сыворотки. Растворы испытуемого дезинфицирующе­

го средства готовят в концентрациях, которые обеспечи­

вают бактерицидный эффект при испытании на тест-объ­

ектах с белковой защитой после 10-15 мин воздействия.

Растворы дезинфицирующего средства добавляют к моче в равном или двойном с ней количестве. Отмечают вре­ мя контакта и через интервалы (15, 30, 60 мин и более) пипеткой берут указанную смесь в количестве 1 мл и пе­ реносят в пробирки с 5 мл нейтрализатора, воды или

бульона. После тщательного смешивания 1 ,мл .жидкости из первой пробирки переносят во вторую с бульоном и затем высевают по 0,1 мл на твердые питательные сре­ ды ,как из первой, так и из второй пробирки. При зара­ жении мочи кишечной палочкой высев делают на среду Эндо, а -стафилокоюком - на ,мясо-лептонный или казеи­

новый агар. Чашки Петри ставят в термостат, через 1 сут

проводят ор,иен'Гировочный учет результатов, а через

7 сут - окончательный.

Контролем служат аналогично поставленные опыты

с добавлением к моче не дезинфицирующего ,раствора, а воды. Результаты опытов учитывают по отношению к контролю, который принят за 100%. Окончательное суж­

дение об эффективности действия дезинфицирующего

средства делают на основании не менее трех опытов с

совпадающими результатами. Эффек'Гивным считают средство, обеопечивающее гибел1:, 100% тест-культур.

Определение активности средств при обеззаражива­ нии кала. При разработке режимов обеззараживания ка­

ла учитывают концентрацию активно действующего ве­ щества, соотношение дезинфицирующего средства и обез­

зараживаемой массы, время обработки, температуру, консистенцию обеззараживаемых выделений, степень го­

могенизации в процессе обеззараживания.

Опыты проводят следующим образом. 20 г кала рас­

тирают в ступке и добавляют 80 мл воды. Полученную эмульсию фильтруют через двойной слой марли, разли­ вают пипеткой в пробирки по 9 мл и добавляют по 1 MJl

2-миллиардной взвеси культуры кишечной палочки. Опы­

ты начинают с концентрации, вызывающей гибель ки­

шечной палочки в моче с белком через 30 мин. Приго­

товленную эмульсию фекалий заливают равным или двойным количеством дезинфицирующего раствора и в

62

д.:1ль11ейшем нрuизводят высевы так же, как и при обез­

зараживании мочи. Результаты учитывают через 2 сут.

При положительных результатах проводят опыты с

большим количеством оформленных фекалий (200250 г). Для этого помещают их в сосуд и заливают дез­

инфицирующим раствором в равном или двойном коли­

честве по массе. Затем небольшую часть фекалий раз­

мешивают стеклянной палочкой с жидкостью, а осталь­

ное оставляют в виде небольших комочков. Через опре­ деленные промежутки времени (30, 60 мин и более) про­

изводят раздельные высевы жидкой части и комочков. Жидкую часть фекалий набирают пипеткой и засевают

так же, как мочу. Плотные части кала (комочки) заби­ рают петлей, сделанной из проволоки, и опускают в 5 мл питательной среды, где, растерев их о края пробирки, тщательно перемешивают с бульоном. Затем из этой про­

бирки 1 мл смеси переносят во вrорую пробирку, также

содержащую 5 мл бульона. Как 1из первой, так и из вто­

рой пробирки делают посев на ·среду Эндо или Левина в чашках Петри. Окончательный результат эффективно­

сти обеззараживания учитывают через 48 ч, а ориентиро­

вочный - через 24 ч.

Контролем служат аналогично поставленные опыты с добавлением вместо дезинфицирующего раствора воды. Результаты опытов учитывают по отношению к контро­ лю, который принимают за 100 %. Об эффективности ис­

следуемого вещества судят на основании не менее трех

опытов с совпадающими результатами. Эффективным

считают средство, обеспечивающее гибель 100% рабочих культур в обеззараживаемом материале.

Последующее изучение новых дезинфицирующих ве­

ществ проводят в соответствии с при,казом по Министер­

ству здравоохранения СССР: 1) изучение токсичности дезинфицирующих средств; 2) проверка в практике раз­

работанных режимов обеззараживания различных объ­

ектов (не менее чем в 10 очагах инфекционных заболе­ ваний); 3) широкая апробация в практике изучаемого

дезинфицирующего средства на базе не менее 5 дезин­ фекционных учреждений; 4) представление в ,комиссию

Министерства здравоохранения СССР по оценке, апро­

бации и внедрению новых дезинфицирующих средств

материалов для получения разрешения на производство

и применение.

Гпава 111

ДЕЗИНФЕКЦИЯ ПРИ КИШЕЧНЫХ

ИНФЕКЦИЯХ

В группу кишечных инфекций входят брюшной

тиф, паратифы, дизентерия, сальмонеллез, холера, ки­ шечная коли-инфекция, гастроэнтерит, колит, токсичес­

кая диспепсия, гепатит, полиомиелит, гельминтозы, ток­

соплазмоз. Группу таких · атропозоонозных инфекций, как лептоспирозы, бруцеллез, мелиоидоз, ящур, боль­

шинство эпидемиологов («Общая и частная эпидемио­

логия» под ред. И. И. Елкина, 1973) относят к кишеч­

ным инфекциям на основании того, что при них пора­

жает,ся в основном ,кишечник, в связи с чем и на­

ми эти разнообразные инфекции объединены в одну

группу.

При заболевании брюшным тифом, паратифами, ди­ зентерией, холерой, полиомиелитом и гепатитом источ­ ником инфекции являются больной человек в острой и стертой форме начиная с инкубационного периода и на

протяжении всей болезни, реконвалесценты, хронические

носители с периодическим обострением (нап,рим·ер, при

фекально-оральный, заражение происходит через за­ грязненные выделениями больного воду, пищевые про­

дукты, предметы обихода (посуда, белье, предметы ухо­ да за больным, игрушки и др.). Бацилловыделители (здо­ ровые носители) являют,ся одним из гла.вных источников возбудителя холеры Эль Тор.

Резервуаром сальмонеллезной инфекции являются не

только люди, но и домашние, а та·кже дикие животные

(в том числе грызуны), птицы - утк;и, гуси и чай1ш, ре­ же индю1ш и куры (Н. М. Юдицкая, 1967; Н. М. Ник;и­ тюк, 1970). Микробы во ·внешнюю среду выделяются с фекалиями и мочой больных людей и животных или ба­ циллоносителей (людей или животных, в организме ко­ торых находятся болезнетворные микробы). Одним из

факторов передачи сальмонеллезной инфекции могут

быть яйца птиц, яичный порошок, а также плохо прова­ ренное мясо (в том числе птицы), особенно колбасные

64

жет произойти через загрязненные руки (во время дое­

ния коров носительницей патогенных микроорганизмов), при прохождении его по молокопроводу и переработке на молокозаводе, а также в случае разбавления сырой

загрязненной водой.

Овощи могут быть инфицированы через удобрения,

содержащие фекалии, во время переработки, мойки

грязной водой и т. д.

Заражение человека через и,нфицированные пищевые

продукты происходит чаще в:сего тем ~количеством воз­

будителей, которым продукты были загрязнены. В тех

с.1учаях, когда возбудители ,инфекции размножаются на

пищевых продуктах, количество их во много раз возрас­

тает и в организм человека попадает огромное количест­

во бактерий. ·

Возбудители кишечных инфекций и их устойчивость вне организма человека. Брюшной тиф (tuphus abdominalis) - острое инфекционное заболевание, харак­ теризующееся бактериемией и поражением лимфатиче­

ского аппарата кишечника (особенно тонкого), сопро­

вождающееся характерной лихорадкой и явлениями об­

щей интоксикации.

Возбудитель брюшного тифа - небольшая палочка с закругленными концами, размером О,5-О,8-;.1,5-3 мкм, подвижная, снабженная 8-20, а иногда еще большим

числом перитрих:иальных жгутиков.

Бактерии брюшного тифа на объектах при темпера­

1965).

По данным Б. И. Гандельсман (1954), брюшноти­ фозный микроб выживает u испражнениях больше меся­ ца (31 день), n содержимом выгреба -- 30-54 дня, в

66

(в зависимости от температуры), на пищевых продуктах

до 50 дней.

Пр·и нагревании в водных взвесях брюшнотифозная

палочка и палочка паратифа А погибают при темпера­

творе фенола, 3% растворе лизола, 3% растворе уксус­

ной кислоты, 3 % растворе хлорамина бактерии брюш­

ного тифа остаются жизнеспособными 2-3 мин, в 0,5%

растворе аммиака - 2 ч.

Они ·высокочувствительны к четвертичным аммоние­

вым ,соединениям. В 0,5% растворе муравьиной кисло­

значительное число отдельных типов. Обычно их делят на четыре вида: Флекснера, Григорьева - Шига, Шту­

цера - Ш,митца и Зонне (Bact. dysenteriae Flexner, Shiga, Stuzer - Shmitz, Sonne). Возбудители дизентерии

вида Флеконера в свою очередь делятся на несколько се­

рологических типов (более 20). Бактерии вида Зонне не

имеют ·серологических типов; они типируются по фермен­

тативной селективнос'Ги в отношен,ии сбраживания маль­ тозы, рамнозы и ксилозы. По морфологическим свойст­ вам они сходны с бактериями брюшного тифа. Отличи­ тельной особенностью дизентерийных бактерий является

и др.), бактерии Флекснера остаются жизнеспособными

при 1_<омнатной температуре на рассеянном свету в те­

ность на влажном белье, на загрязненных испражнениях

и· предметах ухода за больным - посуде, горшках, на­

конечниках клизм, подкладных суднах и пр. Бактерии дизентерии выживают в воде до 7 дней (Б. М. Раскин,

рии Зонне могут не только выживать, но и размножать­

ся (В. Г. Заруцкая, 1959). На поверхности ягод они со­

храняются 6 сут, на помидорах- 7-8 сут, на огурцах - 15 ·сут. При заражении культурой, смешанной с фекалия­ ми и мочой, ·как в целинной, так и вскопанной почве

(грядки) дизентерийная палочка Флекснера сохраняет­ ся 62 дня. При поверхностном заражении почвы дизен­ теР'ийная палочка проникает вместе с водой на глубину около 30 см, причем гибель ее на глубине 10-30 см про· исходит значительно раньше, чем на глубине 1 см, где к 62-му дню наблюдения были обнаружены жизнеспособ­

ные дизентерийные палочки. На глубине 2,5 см при еже­

дневном освещен,ии солнечными лучами в течение 21/2 ч

бактер:ии Григорьева - Шига выживают 5-7 дней. Под

воздействием прямых солнечных лучей незащищенные

бактерии дизентерии погибают через 30 мин (Г. Г. Мир­

зоев, 1962).

Гибель возбудителя дизентерии под действием 1% раствора фенола отмечается через 30 мин, О, 1% раство­

ра ,сулемы - через 1 мин. Нагревание в жидкой среде до

58-60°С убивае~t его в течение 10 мин. При использова­ нии 3% раствора фенола для обеззараживания при на­

личии палочюи Зонне экспозиция должна быть не менее 30 мин. Хлорамин более эффективен: бактерии Зонне за

это же время по!'ибают при 2% концентрации. Освет­ ленный 0,2% раствор хлорной извести требует воздейст­ вия ,на культуру палочки Зонне в тече,н,ие 2 ч, а 0,4%

раствор - 10 мин. Значительна роль мух в ,распростра­

нении возбудителей дизентерии (В. Г. Арский и др.,

1961).

Па р ат и ф о з н ы е заболевания представляют собой группу самостоятельных инфекций человека. Пара11иф А

типу.

Наибольшее з·начение в патологии человека имеют паратифы А и В. Паратифозные бактерии относятся к

роду сальмонелл. От остальных предстащ1телей рода

68

сальмонелл они отличаются тем, что паратифом А боле­ ет только человек (источник инфе:кции), а палочка пара­

тифа В вызывает заболевание не толь,ко у человека, но

и у некоторых видов животных.

С аль м он ел лез н ы е заболевания, ил и то к­

с и к о ин ф е к ц и и, - острые инфекционные заболевания

человека, вызываемые разл1ичными микроорганизмами и

их токсина"Ми ,при употреблении инфицированных пище­

щевых продуктов.

Заболевания встречаются во в,сем мире. В большин­

стве стран наиболее частым серотипом (50-60% забо­ леваний людей салмонеллезами) является Salmonella typhi murium. Частота других серотипов у человека в разных странах колеблется. Например, S. heidelberg широко распространена в США, Великобритании, S. thompson - в Канаде и т. д. В настоящее время около l 00 серотипов постоянно выделяются из пищевых про­

дуктов, от животных и больных людей.

Сальмонеллы постоянно находятся в желудочно-ки­ шечном тракте здоровых ж~ивотных (крупный rи мел·кий

рогатый скот, свиньи), а также птиц (утк,и, гуси). Иног­

да источником инфекции могут быть грызуны. При iНОр­

малыно'М состоянии животных сальмонеллы не вызыва­

ют у них заболевания, при ослаблении последних саль­

монеллы проникают из кишечника в ткани и органы жи­

вотных, вследствие чего у них возникают септические

заболевания. При употреблении в пищу мяса таких жи­

вотных, недостаточно термически обработанного, может заболеть человек.

Сальмонеллы обладают сравнительно высокой сте­

пенью устойчивости к воздействию различных факторов внешней среsды (химические, физические 1и др.). Так, в

бульоне они теряют способность к росту после прогрева­

неллы еще более устойч1ивы. Например, агаровые куJlЬ­

.r1ено, что в комнатной пыли они могут сохранять жизне­

способность до 80 дней, в угольной золе - до 136 дней,

в навозе - до 90 дней, в сухом кале - до 4 лет.

Этиологическими факторами острого га стр о э н те­ р и та (воспалительное заболевание желудка и тонких

кишок) могут быть: пищевые токсикоинфекции, вызы-

69