
Добавил:
Nemo_Nemorino
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз:
Предмет:
Файл:Генная инженерия / Лекция 1 Геом, ген, клонирование генов.pptx
X
- •Основы
- •«Новые направления в науке гораздо чаще создаются с помощью новых методов, а не
- •Что такое «генная инженерия»?
- •В классической генетике и
- •Клонированная самка муфлона,
- •Влияние генной инженерии на современную биологию
- •Биотехнология
- •Промышленная
- •Сельскохозяйственная (зеленая) биотехнология Green gene technology (GGT)
- •Мочить генных инженеров!
- •Фармацевтическая (красная) биотехнология – Red Biotech
- •Влияние генной инженерии на современную медицину
- •Влияние генной инженерии на современную медицину
- •Системные подходы в молекулярной биологии и генетике
- •Центральная догма молекулярной биологии
- •Определение терминов: «Геном»
- •Концепция бактериального пангенома (pan-genome)
- •Парадокс C (C-value paradox)
- •Южноамериканская двоякодышащая рыба
- •Растения с экстремальными размерами генома
- •Животные–лидеры по
- •Парадокс исчезает, загадка остается
- •Последовательности нуклеотидов генома человека
- •Количество генов у организмов разных таксономических групп
- •Резюме по геному
- •Определение терминов: «Ген»
- •Один ген – один фермент
- •Концепция гена 1960-х годов
- •Основные атрибуты гена остались незыблемыми
- •Хорошо забытое старое
- •Нобелевская премия
- •Нобелевская премия
- •Выделение нуклеиновых кислот
- •Фенольный метод выделения ДНК
- •Взаимодействие ДНК с поверхностью стекла
- •Щелочной метод выделения бактериальных плазмид
- •Формы
- •Электрофоретическая подвижность
- •Сортировка микрочастиц в четырехпараметрическом проточном цитометре
- •Пример разделения метафазных хромосом человека с помощью двухлазерного проточного цитометра
- •Первые два класса систем рестрикции-модификации
- •Эндонуклеазы рестрикции класса II (рестриктазы) – основной инструмент генной инженерии
- •Номенклатура рестриктаз класса II
- •Субстратная специфичность рестриктаз класса II
- •Формы разрывов ДНК, образующихся под действием рестриктаз класса II
- •Два способа «затупления» липких концов ДНК
- •Механизм
- •Линкер
- •Создание новых сайтов рестрикции на концах клонируемых молекул ДНК без использования рестриктаз
- •Щелочная фосфатаза и полинуклеотидкиназа
- •ДНК-зависимые ДНК- полимеразы
- •Коррекция неправильно включенного нуклеотида 3’→5’-экзонуклеазой ДНК- полимеразы
- •Обратные транскриптазы (ОТ)
- •Три стратегии синтеза кДНК обратной транскриптазой
- •Синтез
- •Терминальная трансфераза в синтезе гомополимеров и клонировании
- •Векторы
- •Емкости векторов разных классов
- •Свойства, которыми должен обладать любой вектор
- •Плазмидный вектор pUC18
- •Предотвращение образования плазмидного вектора без вставки с помощью щелочной фосфатазы

Плазмидный вектор pUC18
Полилинкер
bla – Ген β-лактамазы, селектируемый маркер
(устойчивость ампициллину)
ori – Точка начала репликации (origin)
lacZ ‘ – N-концевая часть гена β-галактозидазы (кодирует146 из 1021 АК- остатков), селектируемый
маркер (хромогенный субстрат X-Gal)
lacI – Ген Lac-репрессора (Индуктор – IPTG)

Предотвращение образования плазмидного вектора без вставки с помощью щелочной фосфатазы
5’
5’
5’
Лигирование, трансформация
Соседние файлы в папке Генная инженерия