Донсков С.И., Мороков В.А. Группы крови человека. Руководство по иммуносерологии

как правило, были кровными родственниками (Swanson и соавт. [46], Okubo и

соавт. [29], Massaquoi [21]).

На эритроцитах Gy(a −) отсутствуют антигены Ну и Jo a (Moulds и соавт. [26], Laird-Fryer и соавт. [18]), а также Do a и Do b. Подобная фенотипическая зависимостьуказываланато,чтоперечисленныеантигенымогутвходитьводнусистему.

Hy

Первый образец сыворотки, содержащей анти-Ну-антитела, получили Schmidt и соавт. [40]. Позднее были найдены другие образцы антител указан-

ной специфичности (Moulds и соавт. [26], Beattie, Castillo [3], Hsu и соавт. [12]).

Носителями антител во всех случаях были негроиды, имевшие фенотип Ну −. Moulds и соавт. [26] отметили фенотипическую связь антигенов Ну и Gy a.

Негроиды Ну − имели слабый антиген Gy a [фенотип Ну −Gy(a + w)], тогда как у европеоидов Ну − и монголоидов Ну − антиген Gy a отсутствовал.

Индивиды Ну −Gy(a −) вырабатывали анти-Gy a-антитела, индивиды Ну −Gy(a + w) – анти-Ну-антитела.

Сыворотки анти-Gy a не содержали антител анти-Ну. Троекратная адсорбция сывороток анти-Gy a эритроцитами Ну −Gy(a + w) полностью истощала активность анти-Gy a-антител. Элюаты с указанных эритроцитов вели себя в серологических реакцияхтакже,какантителаисходныхнеадсорбированныхсыворотоканти-Gy a.

Все лица Ну −Gy(a + w) были Do(a −b + w), антиген Do a у них отсутствовал, антиген Do b был выражен слабо (Banks и соавт. [1]).

У 7 лиц Ну −Gy(a + w), обследованных с использованием молекулярнобиологических методов, была найдена замена нуклеотида G 232 T в экзоне 2, ведущая к аминокислотной замене Gly 108 Val (Rios и соавт. [37, 38]). У указанных индивидов обнаружена мутация C 898 G в экзоне 3, которая приводила к аминокислотной замене Leu 300 Val и, соответственно, уменьшала экспрессию антигенов Gy a и Do b.

Joa

О выявлении антигена Jo a (Joseph) впервые сообщили Jensen и соавт. [14], которые нашли антитела, идентифицировавшие этот антиген у 2 пациентов – американских негров. Обе сыворотки реагировали со всеми исследованными эритроцитами.

Третий образец анти-Jo a-антител обнаружили Morel и соавт. [24] у больного с серповидно-клеточной анемией.

Все три носителя анти-Jo a-антител получали многократные гемотрансфузии. Laird-Fryer и соавт. [18] выявили у 5 негритянок антитела, обозначенные как анти-Jc a. Позднее было показано, что эти антитела и антитела анти-Jo a реагиру-

ют с одним и тем же антигеном (Weaver и соавт. [52]).

Частота встречаемости антигена Jo a очень высока. Jensen и соавт. [14] при обследовании 3000 жителей Нью-Йорка, преимущественно европеоидов, а также

731

7689 американских негров не нашли ни одного человека с фенотипом Jo(a −). Позднее было установлено, что антиген Jo a отсутствует на эритроцитах лиц

Hy −Gy(a −) и Hy −Gy(a + w), что свидетельствовало о фенотипической связи этих антигенов и возможной принадлежности к одной групповой системе. Вместе с тем все лица, имевшие анти-Jo a-антитела, были Gy(a + )Hy + Jo(a −) (Laird-Fryer и

соавт. [18], Weaver и соавт. [51], Brown и соавт. [4]). Тем самым было показано, что антигены Gy a, Ну и Jo a полностью различаются между собой.

Антиген Ну несколько отличался от антигена Jo a. Если антиген Jo a отсутствовал на эритроцитах Hy −Gy(a −) и обнаруживался только на эритроцитах Hy + Gy(a + ), то антиген Ну присутствовал на эритроцитах и Gy(a + )Jo(a + ), и Gy(a + ) Jo(a −) (Spring и соавт. [43]).

Weaver и соавт. [51] нашли 4 человек Ну −Gy(a −)Jo(a −).

Banks и соавт. [1] выявили пять человек Jo(a −)Do(a + wb + w) негров, одного испанца Jo(a −)Do(a + wb −).

Биохимия и молекулярная генетика

Banks и соавт. [1], Spring и соавт. [42, 43] посредством перекрестной иммунопреципитации показали, что антигенные детерминанты Do a, Gy a, Hy и Jo a расположены на одном и том же экстрацеллюлярном гликопротеине (рис. 16.1), имеющем мол. массу 46,75–57,5 кДа. Обработка эритроцитов эндогликозилазой F приводила к уменьшению мол массы гликопротеина до 11 кДа, что свидетельствовало о N-гликозилировании изучаемого субстрата. Вместе с тем протеин Dombrock не подвергался О-гликозилированию.

Рис. 16.1. Строение гликопротеина

Dombrock.

732

Впроцессе иммунопреципитации предположительно выделялись также димеры указанных соединений.

Вэкспрессии антигенов Gy a и Ну участвуют дисульфидные связи. При обработке сульфгидрильными реагентами мол. масса гликопротеина уменьшалась до 40–50 кДа и он быстрее мигрировал в полиакриламидном геле в присутствии додецил-сульфата.

Gubin и соавт. [9] провели скрининг базы данных, включающих около 5000 нуклеотидных последовательностей хромосом, полученных из дифференцирующихся эритроидных клеточных линий. Оказалось, что синтез ГФИассоциированных протеинов кодируют гены, расположенные на хромосоме 12.

Идентифицирован фрагмент ДНК, который, по-видимому, и является геном Dombrock. Трансфекция этого фрагмента в эритролейкемические клетки K562 приводила к экспрессии на их поверхности антигенов Do a, Gy a, Hy и Jo a (Gubin

исоавт. [9]).

Локус DO имеет величину 14 кб, состоит из трех экзонов (рис. 16.2) и кодирует синтез протеина, состоящего из 314 аминокислот (рис. 16.3). Экзон 1 кодирует аминокислоты в позиции 1–45, экзон 2 – в позиции 49–285, экзон 3 – в позиции 286–314, включая ГФИ-ассоциированный фрагмент из 17 аминокислот

(Reid, Lomas-Francis [35]).

Рис. 16.3. Аминокислотная последовательность гликопротеина Dombrock.

Обследование индивидов Do(a + ) и Do(a −) с использованием молекулярногенетических методов показало, что антигенные различия Do a / Do b обусловлены нуклеотидной заменойA793 G в экзоне 2 гена DO (Gubin и соавт. [9], Rios и соавт. [36]). Последняя приводит к аминокислотной заменеAsn 265Asp (табл. 16.4). Два других замещения нуклеотидов, приводящие к появлению аминокислотных остатковTyr 126 и Leu 208, также связаны с различиями Do a / Do b. Антигенные различия

Hy +/Hy −иJo(a + )/Jo(a −)обусловленызаменамиGly108ValиThr117Ile.

733

Таблица 16.4

Молекулярная основа антигенов Dombrock

РНК-транскрипты гена DO обнаруживали в селезенке, лимфатических узлах, костном мозге и эмбриональной печени; в тимусе и лейкоцитах периферической крови они отсутствовали (Gubin и соавт. [9]). Они не выявлялись в течение первых 4 дней культивирования клеток периферической крови человека в присутствии эритропоэтина (Gubin и соавт. [9]).

Антитела системы Dombrock

После открытия антигенов Do a и Do b [23, 45] последовала серия сообщений о выявлении новых образцов антител анти-Do a (Webb и соавт. [53], Williams, Crawford [54], Polesky и соавт. [31], Moulds и соавт. [25], Kruskall и соавт. [17], Judd, Steiner [15], Roxby и соавт. [39], Strupp и соавт. [44]) и анти-Do b (Strupp

исоавт. [44], Yvart и соавт. [55], Moheng и соавт. [22], Halverson и соавт. [11], Shirey и соавт. [41]).

Частота анти-Do a-антител в исследованных выборках практически не отличалась от частоты антител анти-Do b и соответствовала ожидаемой, рассчитанной по частоте генов. На основании этого исследователи пришли к выводу, что антигены Do a и Do b одинаковы по своей способности вызывать аллоиммунизацию (Issitt, Anstee [13]). Антитела Dombrock чаще сопутствовали антителам другой специфичности, однако известны также сыворотки, содержащие моноспецифические анти-Do a-антитела (Moulds и соавт. [25], Roxby и соавт. [39])

имоноспецифические анти-Do b-антитела (Shirey и соавт. [41]). О выявлении естественных антител Dombrock не сообщалось.

Polesky и соавт. [31] наблюдали женщину, у которой анти-Do a-антитела образовались во время первой беременности. Ребенок имел фенотип Do(a + ).

Антитела анти-Do a и анти-Do b относятся к классу IgG, не обладают способ-

ностью связывать комплемент (Polesky, Swanson [30], Moulds и соавт. [25],Yvart

исоавт. [55]). Их ни разу не описывали как причину ГБН. В отдельных случаях эти антитела обусловливали положительную прямую антиглобулиновую пробу с эритроцитами новорожденных без гемолитической реакции (Polesky и соавт. [31], Moulds и соавт. [25],Yvart и соавт. [55]).

Вместе с тем анти-Do a-антитела вызывали как острые, так и замедленные посттрансфузионные реакции, особенно у больных с серповидно-клеточной анемией (Kruskall и соавт. [17], Judd, Steiner [15], Strupp и соавт. [44]). Такие же реакции вызывали и анти-Do b-антитела (Strupp и соавт. [44], Moheng и соавт. [22], Halverson и соавт. [11], Shirey и соавт. [41]).

734

Тесты на приживление эритроцитов in vivo, а также эксперименты с монослоем моноцитов in vitro, показали, что антитела Dombrock ускоряют разруше-

ние эритроцитов, несущих антигены Dombrock (Polesky, Swanson [30], Shirey и соавт. [41]).

Водном случае, описанном Gudino и соавт. [10], у пациента, имевшего анти-Do a-антитела, приживаемость эритроцитов Do(a + ) была нормальной. Переливание ему Do a-положительных эритроцитов не вызвало реакции.

Внекоторых случаях антитела анти-Do a и анти-Do b выявляли post factum, когда трансфузии уже были выполнены. В отдельных случаях эти антитела трактовали как слабые аллогенные, не имеющие клинического значения, ауто-

иммунные или HLA-антитела (Kruskall и соавт. [17], Judd, Steiner [15], Strupp и соавт. [44], Halverson и соавт. [11]).

Впротивоположность антигенам Do a и Do b антиген Gy a более иммуногенен

ивыраженно проявляет себя при разногруппной беременности женщин Gy(a −) (Swanson и соавт. [46], Race, Sanger [32], Clark и соавт. [6], Okubo и соавт. [29]).

Антитела анти-Gy a, анти-Ну и анти-Jo a естественного происхождения не описаны (Daniels [7]). Однако могут быть исключения. Ellisor и соавт. [8] выявили анти-Gy a-антитела у пожилого мужчины, которому не проводили гемотрансфузий. Через 3 мес. антитела исчезли. Эритроциты этого человека, фенотип которого был определен как Gy(a −), адсорбировали анти-Ну-антитела, которые можно было затем элюировать. Стандартные эритроциты Gy(a −) такой способностью не обладали.Этодаетоснованияполагать,чтофенотипGy(a −)можетбытьприобретенным (Reid и соавт. [34]). Процесс подобной трансформации, по-видимому, может сопровождаться появлением соответствующих транзиторных антител.

Антитела анти-Gy a, анти-Ну и анти-Jo a, как правило, относятся к классу IgG (Swanson и соавт. [46], Clark и соавт. [6], Moulds и соавт. [26], Beattie, Castillo [3], Hsu и соавт. [12], Jensen и соавт. [14], Morel и соавт. [24], Brown и соавт. [4], Ellisor и соавт. [8], Barrett и соавт. [2]). Один образец анти-Gy a-антител содержал фракцию IgAи, как удалось установить с помощью антиглобулиновой пробы, связывал комплемент (Clark и соавт. [6]). Один образец анти-Ну-антител, вызывавший прямую агглютинацию эритроцитов, помимо IgG, содержал фрак-

цию IgМ (Barrett и соавт. [2]).

Beattie и Castillo [3] описали случай гемолитической посттрансфузионной реакции у мужчины, имевшего анти-Ну-антитела, которому были перелиты две дозы эритроцитов Ну +.

Описан также реципиент с наличием анти-Gy a-антител, которому были произведены трансфузии 10 доз эритроцитов Gy(a + ) (Mak и соавт. [20]). Какихлибо проявлений несовместимости при этом авторы не наблюдали.

Убольного с транзиторными анти-Gy a-антителами приживаемость эритроцитов Gy(a + ) in vivo была нормальной (Hsu и соавт. [12]). В аналогичных исследованиях ускоренную элиминацию эритроцитов in vivo вызывали антитела анти-Ну (Hsu и соавт. [12]) и анти-Jo a (Viggiano и соавт. [50]).

735

ВпоследниегодыRaoисоавт.[33]получилимышиныеМКА,реагирующиесо всеми антигенами Dombrock, но дающие слабые реакции с эритроцитами Gy(a −).

Биологическая функция

Продукт аллеля Do b содержит аминокислотную последовательность Arg – Gly – Asp, характерную для молекул клеточной адгезии. Аллель Do a кодирует в том же участке фрагмент с другой последовательностью аминокислот, Arg – Gly –Asn, что может повлиять на адгезивную способность субстрата.

Экзон 2 локуса DO содержит участок, характерный для генов, контролирующих синтез аденозиндифосфатрибозилтрансферазы (АДФ-трансферазы) (Koch-Nolte, Haag [16]). Возможно, гены Dombrock способны модифицировать этот фермент и такимобразомвлиятьнаегофункциональнуюактивность(Gubinисоавт.[9]).

Spring и соавт. [42, 43], Telen и соавт. [47] наблюдали у больных пароксизмальной холодовой гемоглобинурией две популяции эритроцитов, одна из которых была лишена ГФИ-ассоциированных протеинов и не содержала антигенов Dombrock. Эти эритроциты были более чувствительны к комплементу.

Список литературы

1.Banks J.A., Hemming N., Poole J. Evidence that Gy a, Hy and Jo a antigens belong to the Dombrock blood group system // Vox Sang. – 1995. – V. 68. – P. 177–182.

2.Barrett V.J., O’Brien M.M., Moulds J.J. et al. Anti-Holley detected in a primary immune response // Immunohematology. – 1996. – V. 12. – P. 62–65.

3.Beattie K.M., Castillo S. A case report of a hemolytic transfusion reaction caused be antiHolley // Transfusion. – 1975. – V. 15. – P. 476–480.

4.Brown D. Reactivity of anti-Jo a with Hyred cells [Abstract] // Transfusion. – 1985. –

V.25. – P. 462.

5.Chandanayingyong D., Sasaki T.T., Greenwalt T.J. Blood groups in Thais // Transfusion. – 1967. – V. 7. – P. 269–276.

6.Clark M.J., Poole J., Barnes R.M. et al. Study of the Gregory blood group in an English family // Vox Sang. – 1975. – V. 29. – P. 301–305.

7.DanielsG.L.HumanBloodGroups.–2-nded.–Oxford:BlackwellScience,2002.–560 p.

8.EllisorS.S.,ReidM.E.,AvoyD.R.etal.Transientanti-Gy ainanuntransfusedman:serologic characteristics and cell survival study // Transfusion. – 1982. – V. 22. – P. 166–168.

9.Gubin A.N., Njoroge J.M., Woida U. et al. Identification of the Dombrock blood group glycoprotein as a polymorphic member of the ADP-ribosyltransferase gene family // Blood. – 2000. – V. 96. – P. 2621–2627.

10.Gudino M., Kranwinkel N., Lenart S., Harrison L. Successful transfusion of Dombrock ([Do(a + )] red blood cells to a patient with anti-Do(a) [Abstract] // Transfusion. – 1986. –

V.26. – P. 546.

11.Halverson G., Shanahan E., Santiago I. et al.The first reported case of anti-Do b. causing an acute hemolytic transfusion reaction // Vox Sang. – 1994. – V. 66. – P.206–209.

12.Hsu T.C.S., Jagathambal K., Sabo B.H., Sawitsky A. Anti-Holley (Hy): characterization of another example // Transfusion. – 1975. – V. 15. – P. 604–607.

13.Issitt P.D., Anstee D.J. Applied Blood Group Serology. – 4-th ed. – Durham, NC, USA: Montgomery Sc. Publ., 1998. – 1208 p.

14.Jensen L., Scott E.P., Marsh W.L. et al. Anti-Jo a: an antibody defining a high-frequency erythrocyte antigen // Transfusion. – 1972. – V. 12. – P. 322–324.

736

15.Judd W.J., Steiner E.A. Multiple hemolytic transfusion reactions caused by anti-Do a // Transfusion. – 1991. – V. 31. – P. 477–478.

16.Koch-Nolte F., Haag F. Mono (ADP-ribosyl) transferases and related enzymes in animal tissues: emerging gene families //Adv. Exp. Clin. Biol. – 1997. – V. 419. – P. 1–13.

17.Kruskall M.S., Greene M.J., Strychrz D.M. et al. Acute hemolytic reaction due to antiDombrock (Do a) [Abstract] // Transfusion. – 1986. – V. 26. – P. 554.

18.Laird-Fryer B., Moulds M.K., Moulds J.J. et al. Subdivision of the Gy a –Hy phenotype [Abstract] // Transfusion. – 1981. – V. 21. – P. 633.

19.Lewis M., Kaita H., Giblett E.R., Anderson J.E. Genetic linkage analysis of the Dombrock (Do) blood group locus // Cytogenet. Cell Genet. – 1978. – V. 22. – P. 313–318.

20.Mak K.H., Lin C.K., Ford D.S. et al. The first example of anti-Gy a detected in Hong Kong // Immunohematology. – 1995. – V. 11. – P. 20–21.

21.MassaquoiJ.M.Twofurtherexamplesofanti-Gy a //Transfusion.–1975.–V.15.–P.150–151.

22.Moheng M.C., McCarthy P., Pierse S.R. Anti-Do b implicated as the cause of a delayed hemolytic transfusion reaction // Transfusion. – 1985. – V. 25. – P. 44–46.

23.Molthan L., Crawford M.N., Tippett P. Enlargement of the Dombrock blood group system: the finding of anti-Do b // Vox Sang. – 1973. – V. 24. – P. 382–384.

24.Morel P., Myers M., Marsh W.L., Bergren M. The third example of anti-Jo a: inheritance of the Jo a red cell antigen [Abstract] // Transfusion. – 1976. – V. 16. – P. 531.

25.Moulds J., Futrell E., Fortez P., McDonald C. Anti-Do a: further clinical and serological observations [Abstract] // Transfusion. – 1978. – V. 18. – P. 375.

26.MouldsJ.J.,PoleskyH.F.,ReidM.,EllisorS.S.ObservationontheGy a andHyantigensand the antibodies that define them // Transfusion. – 1975. – V. 15. – P. 270–274.

27.Nakajima H., Moulds J.J. Do a (Dombrock) blood group antigen in the Japanese: tests on further population and family samples // Vox Sang. – 1980. – V. 38. – P. 294–296.

28.Nakajima H., Skradski K., Moulds J.J. Do a (Dombrock) blood group antigen in Japanese // Vox Sang. – 1979. – V. 36. – P. 103–104.

29.Okubo Y., Nagao N., Tomita T. et al. The first examples of the Gy(a −) Hy– phenotype and anti-Gy a found in Japan // Transfusion. – 1986. – V. 26. – P. 214–215.

30.Polesky H.F., Swanson J. Studies on the distribution of the blood group antigen Do a (Dombrock) and the characteristics of anti-Do a //Transfusion. – 1966. –V. 6. – P. 268–270.

31.PoleskyH.F.,SwansonJ.,SmithR.Anti-Do a stimulatedbypregnancy//VoxSang.–1968.– V. 14. – P. 465–466.

32.Race R.R., Sanger R. Blood Groups in Man. – 6-th ed. – Oxford: BSP, 1975. – 659 p.

33.Rao N., Udani M., Nelson J. et al. Investigations using a novel monoclonal antibody to the glycosylphosphatidylinositol-anchored protein that carries Gregory, Holley, and Dombrock blood group antigens // Transfusion. – 1995. – V. 35. – P. 459–464.

34.Reid M.E., Ellisor S.S., Sabo B. Absorption and elution anti-Hy from one of four Gy(a −) human red blood cell samples // Transfusion. – 1982. – V. 22. – P. 528–529.

35.Reid M.E., Lomas-Francis C. The Blood GroupAntigen: FactsBook. – 2-nd ed. – London: Academic Press, 2004. – 561 p.

36.Rios M., Hue-Roye K., Lee A.H. et al. DNA analysis for Dombrock polymorphism // Transfusion. – 2001. – V. 41. – P. 1143–1146.

37.Rios M., Hue-Roye K., Miller J.L. et al. Molecular basis associated with the Dombrock null phenotype [Abstract] // Blood. – 2000. – V. 96. – P. 452a.

38.Rios M., Hue-Roye K., Oyen R., Reid M. Molecular basis of the Gy(a + w) Hy– phenotype [Abstract] // Transfus. Clin. Biol. – 2001. – V. 8 (Suppl.). – 14S.

39.Roxby D.J., Paris J.M., Stern D.A., Young S.G. Pure anti-Do a stimulated by pregnancy // Vox Sang. – 1994. – V. 66. – P. 49–50.

737

40.Schmidt R.P., Frank S., Baugh M. New antibodies to high incidence antigenic determinants (anti-So, anti-El, anti-Hy and anti-Dp) [Abstract] // Transfusion. – 1967. – V. 7. – P. 386.

41.Shirey R.S., Boyd J.S., King K.E. et al.Assessment of the clinical significance of anti-Do b // Transfusion. – 1998. – V. 38. – P. 1026–1029.

42.Spring F.A., Reid M.E. Evidence that the human blood group antigens Gy a and Hy are carried on a novel glycosylphosphatidylinositol-linked erythrocyte membrane glycoprotein

//Vox Sang. – 1991. – V. 60. – P. 53–59.

43.SpringF.A.,ReidM.E.,NicholsonG.EvidenceforexpressionoftheJo a bloodgroupantigen on the Gya / Hy-active glycoprotein // Vox Sang. – 1994. – V. 66. – P. 72–77.

44.StruppA.,CashK.,UelingerJ.DifficultiesinidentifyingantibodiesintheDombrockblood group system in multiply alloimmunized patients //Transfusion. – 1998. –V. 38. – P. 1022– 1025.

45.SwansonJ.,PoleskyH.F.,TippettP.,SangerR.A’new’bloodgroupantigen,Do a //Nature.– 1965. – V. 206. – P. 313.

46.Swanson J., Zweber M., Polesky H.F.Anew public antigenic determinant Gy a (Gregory) // Transfusion. – 1967. – V. 7. – P. 303–307.

47.Telen M.J., Rosse W.F., Parker C.J. et al. Evidence that several high-frequency human blood group antigens reside on phosphtidylinositol-linked erythrocyte membrane protein // Blood. – 1990. – V. 75. – P. 1404–1407.

48.Tippett P. Genetics of the Dombrock blood group system // J. Med. Genet. – 1967. – V. 4. –

P.7–11.

49.Tippett P., Sanger R., Swanson J., Polesky H.F. The Dombrock blood group system // Proc. 10-th Congr. Europ. Soc. Haematol. – 1965. – V. II. – P. 382–384.

50.Viggiano E., Jacobson G., Zurbito F. A Chromium51 survival study on a patient with anti- ‘Jo a / Jc a’[Abstract] // Transfusion. – 1985. – V. 25. – P. 446.

51.Weaver T., Kavitsky D., Carty L. et al. An association between the Jo a and Hy phenotypes [Abstract] // Transfusion. – 1984. – V. 24. – P. 246.

52.WeaverT.,LaceyP.,CartyL.etal.EvidencethatJo a andJc a aresynonymous//Transfusion.– 1986. – V. 26. – P. 561.

53.WebbA.J.,LockyerJ.W.,ToveyG.H.Thesecondexampleofanti-Do a //VoxSang.–1966.–

V.11. – P. 637–639.

54.Williams C.H., Crawford M.N. The third example of anti-Do a // Transfusion. – 1966. –

V.6. – P. 310.

55.Yvart J., Cartron J., Fouillade M.T. et al. Un nouvel exemple d’anti-Do b // Rev. Franc. Transfus. Immunohemat. – 1977. – V. 20. – P. 395–400.

738

Глава 17.

Система Colton

Система Colton (Колтон) представлена тремя антигенами. Два из них, Co a (частый) и Co b (редкий), находятся в антитетичных отношениях. Третий антиген, Со3, присутствует на всех эритроцитах, за исключением эритроцитов лиц с нулевым фенотипом, Co(a −b −) (табл. 17.1). Групповые детерминанты Colton расположены на белке, получившем название аквапорин-1 (AQP-1).

Генный локус СО картирован на коротком плече хромосомы 7. Нулевой фенотип Co(a −b −) может быть обусловлен моносомией по хромосоме 7. Антигенные различия Colton обусловлены одиночными мутациями гена СО, приводящими к замене аланина в позиции 45 валином.

Таблица 17.1

Антигены Colton

Негликозилированный вариант AQP-1 имеет мол. массу 28 кДа, гликозилированный – от 40 до 60 кДа (Denker et al [14]. Количество молекул AQP-1 на одну клетку составляет 120–160 тыс.

Методом ПЦР с использованием олигонуклеотидных праймеров исследована кДНК клеток эмбриональной печени человека. Это позволило сначала установить аминокислотную последовательность N-терминального участка аквапо- рина-1, а затем изолировать кДНК аквапорина-1 из библиотеки генов костномозговых клеток человека. Найден участок ДНК величиной 807 пар нуклеотидов, кодирующий синтез полипептида из шести трансмембранных доменов (рис. 17.1 и 17.2). N- и С-терминальные участки полипептида расположены внутри клетки (Preston, Agre [43]). Полипептид, несущий антигены Colton, состоит из 269 аминокислот (рис. 17.3).

Обе половины молекулы аквапорина (по три трансмембранных домена в каждой) имеют участки NPA со сходной последовательностью аминокислот. Согласно предложенной трехмерной модели, участки NPA между трансмембранными доменами образуют канал транспорта воды и функционируют как

739

единое целое (см. рис. 17.2) (Jung и соавт. [24], Murata и соавт. [37], De Groot и соавт. [12]).

Рис. 17.1. Размещение антигенов Colton на мембране эритроцита.

Рис. 17.2. Трехмерная модель аквапорина. Кружками обозначены участки NPA.

Рис. 17.3. Аминокислотная последовательность молекулы, несущей антигены Colton.

Первая экстрацеллюлярная петля молекулы аквапорина может быть N-гликозилирована и, подобно протеину полосы 3, обладать АВН-антигенной активностью (Smith и соавт. [52]).

Ген AQP-1 локализован в позиции 7р14, имеет величину 17 кб и представлен четырьмя экзонами (рис. 17.4), кодирующими аминокислоты в позициях 1–128, 129–183, 184–210 и 211–269 (Moon и соавт. [34], Umenishi, Verkman [57]).

740