Донсков С.И., Мороков В.А. Группы крови человека. Руководство по иммуносерологии

Глава 37.

Достижения последних лет

В этой главе приводятся данные литературы последних лет как дополнение к соответствующим главам.

Системы АВО и Hh

Новые сведения, появившиеся в последние годы, касаются в основном молекулярно-генетических особенностей слабовыраженных вариантов антигенов А и В.

У 3 лиц, имевших генотип А3 / А3 В, выявлены три вида единичных замен нуклеотидов 747>T, 820>Aи 863>T. Индивиды Ах и А3В имели одну и ту же мутацию 863>T. Аллель А х на фенотипическом уровне проявлял себя как подгруппа А3В у лица с генотипом А х / В101 и Ах у гетерозиготного индивида, имевшего генотип А х / О01 (Li и соавт. [41]).

Hosseini-Maaf и соавт. [28] нашли 7 не связанных родством лиц со слабовыраженным антигеном В. Молекулярно-генетическое исследование позволило выявить семь новых аллелей гликозилтрансферазного гена В и единичные аминокислотные замены (М 189 V, I 192 T, F 216 I, D 262 С, A 268 T, V 174 0

иL 232 P). Одна из них (F 216 I) явилась результатом гибридизации аллелей В

иO 1v. Авторы пришли к выводу, что молекулярная основа слабых форм антигена В гетерогенна и обусловлена мутациями в последнем экзоне локуса АВО. Кодируемая такими мутантными аллелями В-гликозилтрансфераза обладает низкой активностью.

Врезультате изучения фукозилтрансферазных генов у жителей Штирии (Австрия) идентифицировано 14 новых аллелей FUT1, FUT2 и FUT3. Они кодируют соответственно антиген H, статус выделительства и антигены Lewis. Выявлено 5 новых вариантов аллеля FUT2, 3 из которых характеризуются как ранее неизвестные. Впервые выявленая мутация G 412 A (Gly 138 Ser) локализована в каталитическом домене фермента. Найден новый, несекреторный, аллель, являющийся результатом нонсенс-мутации G 428. Другой аллель FUT2 может являться результатом внутригенного кроссинговера. Анализ гена FUT3 позволил выявить семь ранее неизвестных аллелей, частично обусловленных новыми мутациями G 41 A (Arg 14 His), 1063>G (Arg 354 Ser), G 735 C (молча-

щая). Мутация G 41Aлокализовалась в цитоплазматическом домене, в то время как мутация 1063>G  − в каталитическом (Matzhold и соавт. [47]).

991

Исследован характер изменений экспрессии антигенов АВО и резус при аллогенной трансплантации костного мозга (Л.П. Порешина и соавт. [1]). Показано исчезновение антигенов А, В и D у реципиентов, которым трансплантировали костный мозг доноров O(I)Rh −. Все реципиенты Rh +, имевшие до трансплантации группу кровиA(II), B(III) иAB(IV), после трансплантации стали O(I)Rh −. У реципиентовA(II) после трансплантации костного мозга от донора A(II) отмечалось восстановление ранее ослабленной экспрессии антигена А. Пересадка костного мозга реципиенту O(I) от донора А2В(IV) изменила группу крови реципиента сначала на B(III), а затем на А2В(IV). Таким образом, в процессе приживления костного мозга у реципиентов меняется не только группа крови, но и степень экспрессии групповых антигенов.

Л.Н. Тарасова и С.Г. Владимирова [2] показали, что у лиц, имеющих группу крови O(I), существенно снижен уровень фактора Виллебранда по сравнению с уровнем этого фактора у лиц, имеющих группу кровиA(II), B(III) иAB(IV).

Система MN

Система MN пополнилась еще одним часто встречающимся антигеном – ENDA (MNS44). Антитела IgM, открывающие его, были найдены в сыворотке крови англичанки, имевшей фенотип M +s + Mur + DANE + M(g −). С помощью молекулярно-генетических методов исследования у женщины выявлен новый гибридный гликофориновый аллель GYP(A-B-A), кодирующий антиген DANE. Вторая хромосома несла аллель M k . Авторы пришли к заключению, что аминокислотная замена Ile 46 на гликофорине А наAsn 45 на гликофорине GP.Dane не является обязательным условием для экспрессии антигена DANE (Velliquette и

соавт. [72]).

Системы Р и GLOB

Описано 20 индивидов с редким фенотипом р, у всех найдена нонсенсмутация 2911 > T в гене галактозилтрансферазы – A4GALT. Тем самым установлен еще один вариант генетических нарушений, приводящих к появлению редкого фенотипа р (Hellberg и соавт. [27]).

Система Rh

Новые публикации, касающиеся системы Rh, посвящены двум аспектам. Все больше сведений о новых вариантах гена RHD, обусловливающих фенотипическую мозаику этой системы. К настоящему времени общее число вариантов приближается к 170. Носители парциального или слабовыраженного антигена D подвержены анти-D-аллоиммунизации. В серии других сообщений приводятся случаи необычной сенсибилизации реципиентов к часто встречающимся антигенам Rh.

992

Marechal и соавт. [46] исследовали нуклеотидные последовательности гена RHD, кодирующего вещество D, у 333 французских доноров и выявили 12 новых вариантов аллеля D, при которых определение резус-принадлежности серологическими методами было затруднено. Носители мутации Leu 214 Phe оказались способными продуцировать анти-D-антитела после переливания им D-положительных эритроцитов. Авторы полагают, что молекулярногенетические исследования крови лиц с необычными вариантами антигена D позволят уменьшить риск развития аллоиммунизации при проведении гемотрансфузионной терапии (Marechal и соавт. [46]).

Esteban и соавт. [22] установили, что среди испанцев наиболее частой из парциальных антигенов D является категория D VI. При детальном изучении 20 образов эритроцитов категории D VI обнаружен ранее неописанный гибридный ген RHD-Ce(3-5)-D. Происхождение экзона 2 в этом гене установить не удалось. Гибрид был представлен гаплотипом CDe, продуцирующим редко встречающийся антиген BARC (Rh52).

Flegel и соавт. [25] также нашли новые варианты гена RHD. Антиген, кодируемый аллелем DCS-1, содержал две аминокислотные замены: T 667 G и G 676 C, вызванные мутациями в экзоне 5. Проведено сравнение DCS-1 с вариантами DFV и DCS-2 с соответствующими одиночными аминокислотными заменами: F 223 V и A 226 P. Все указанные варианты сочетались с гаплотипом cDE. Плотность антигенных эпитопов D составила приблизительно 3000 на один эритроцит для категории DCS-1, 800  − для категории DCS-2 и 9300  − для DFV. На эритроцитах DCS-1 и DCS-2 отсутствовали некоторые эпитопы D, выявляемые моноклональными анти-D-антителами. Эритроциты DFV экспрессировали почти нормальный антиген D, в этом образце крови выявлены аллоиммунные антитела anti-LW a системы LW.

Описана 28-летняя женщина из Ливана, группа крови которой при рутинном исследовании определена как A(II)D −. Она имела анти-D-антитела,

ванамнезе – две неразвившиеся беременности из-за внутриутробной гибели плодов. Отец женщины и два ее брата были D −. Солгасно результатам молекулярно-генетического исследования, пациентка и ее упомянутые родственники оказались D +, поскольку содержали значительные фрагменты гена RHD. При последующием анализе с использованием РНК-ПЦР выявлено 5 транскриптов гена RHD, при этом самым длинным оказался транскрипт,

вкотором отсутствовали нуклеотидные последовательности экзона 8, замещенные нуклеотидными цепями из интрона 7. Секвенирование ДНК позволило выявить делецию большого участка величиной 995 пар нуклеотидов, которая затронула часть интрона 7, весь экзон 8, а также интрон 8 гена RHD. Данный аллель RHD (delEx8) кодировал слабый антиген D, выявляемый только адсорбцией – элюцией. Таким образом, пациентка, ее отец и братья имели фенотип Del.

993

Аллель с делецией большого участка гена RHD нашли Richard и соавт. [62]. Lomas-Francis и соавт. [45] описали два случая полиаллоиммунизации у реципиентов негроидов. Негритянка, больная β-талассемией, имела фенотип D +,

всыворотке ее крови ранее были выявлены антитела анти-hr B, анти-E, анти-M, а также тепловые поливалентные аутоантитела. Во время операции ей были перелиты по жизненным показаниям 4 дозы эритроцитов, 2 из которых были серологически несовместимы. Одновременно были предприняты усилия по поиску доноров D +hr B − и  −D −. Когда позднее они были найдены, в пробах с сывороткой крови больной клетки указанных редких фенотипов давали положительные реакции. Дальнейшее детальное изучение специфичности антител показало, что у больной в дополнение к ранее имевшимся образовались анти-D -ан- титела. Другой реципиент, мужчина, больной серповидно-клеточной анемией, был D + и имел антитела анти-hr B, анти-С, анти-Е и анти-K. После трансфузий серологически совместимых эритроцитов в дополнение к перечисленным антителам образовались анти-D-антитела.

Эритроциты обоих лиц содержали парциальный антиген D категории DIIIa, встречающийся среди негроидов с частотой около 4 %. Эритроциты этой категории дают отчетливо выраженные положительные реакции с реагентами анти-D, поэтому таким пациентам переливают Rh-положительные эритроциты, которые им противопоказаны. У негроидов нередко образуются антитела анти-hr B. После их идентификации гемотрансфузионную терапию обычно продолжают с использованием эритроцитов ccDEE, так как эритроциты этой группы являются одновременно е- и hr B-отрицательными. Это приводит к образованию у некоторых больных антител к другому часто встречающемуся антигену – Hr B (Rh34) в сочетании с анти-Е-антителами или без последних. Реципиентам, имеющим такие антитела, можно пере-

ливать эритроциты только от доноров Rhnull и с некоторыми делециями, поскольку только они не содержат антиген Hr B (Rh34). Авторы публикации указывают на высокую частоту парциальных антигенов D среди негроидов,

всвязи с чем у некоторых D-положительных реципиентов могут образоваться антитела анти-D.

Win и соавт. [80] наблюдали 2 женщин с генотипом DIIIce / Cce S (одна латиноамериканского происхождения, другая – негритянка), у которых после

нескольких родов появились антитела анти-hr B (Rh19) и анти-Hr B (Rh34). У одной из женщин выработались также анти-D-антитела в сочетании с анти-Ce. Эритроциты новорожденных давали положительную прямую реакцию Кумбса, однако клинических проявлений гемолитического заболевания у них не отмечалось. Указанные антитела относятся к клинически значимым, поэтому для женщин были зарезервированы эритроциты чрезвычайно редких доноров − ccddEE и Rhnull, однако трансфузии женщинам не понадобились.

994

Опубликованы данные о распределении вариантов гена RHD у жителей Африки. Так, в Конго (Браззавиль) среди 110 лиц, представителей народности теке, эритроциты которых давали отрицательные реакции с анти-D-антителами, 7 были отнесены к слабому DIV-типу по результатам ПЦР. Среди остальных 103 выявлены лица с делецией RHD, наличием RHD-псевдогена и гибридного аллеля RHD-СЕ-D. Среди лиц D + идентифицированы аберратные RHD, DAU, DIV a, слабый DIV3-тип. Идентифицирован новый, характерный для негроидов, вариант RHD, получивший обозначение DAU-7. Среди D − преобладали лица с делецией RHD (Touinssi и соавт. [69]).

Среди жителей Западной Индии парциальные антигены D встречаются с частотой 0,15 %. Из известных категорий в указанной популяции наиболее часто представлен антиген DFR (Kulkarni и соавт. [37]).

Ye и соавт. [84] провели молекулярно-генетический анализ аллеля RHD у китайцев D– (лица Del из выборки исключены). Выявлено 8 вариантов. Один из них проявлялся точковой мутацией, другой представлял собой гибрид RHD / CE. Чаще присутствовал гибридный аллель RHD(1)-CE(2-9)-D(10) и ранее описан-

ный RHD(711delC).

Другая группа китайских исследователей (Yan и соавт. [82]) провели обширные популяционные исследования. Среди 305 672 обследованных 99,94 % были D +, остальные 0,06 % – D −, 37 человек имели варианты антигена D, среди которых преобладал слабый D, встречались также парциальные антигены D VI3 и D V. Выявлено 3 новых аллеля, обусловленных единичными нуклеотидными заменами. Авторы отметили, что у китайцев по сравнению с европейцами и неграми имеются существенные отличия в отношении как частоты антигена D, так и его химической структуры.

Polin и соавт. [59] исследовали с помощью ПЦР кровь 23 300 лиц, которые по результатам первичного обследования были тестированы как резусотрицательные. У 94 обнаружены RHD-специфические маркеры экзонов 4, 7 и 10, свидетельствующие о том, что эти лица в действительности являются резус-положительными. Слабые антигены D (n=55) и фенотип Del (n = 19) идентифицированы в 74 образцах. Такие лица как реципиенты входят в группу повышенного риска аллоиммунизации антигеном D, а как доноры представляют опасность, если их кровь будет перелита резус-отрицательным реципиентам. Авторы предлагают ввести ПЦР-генотипирование в рутинную практику для всех доноров, эритроциты которых в серологических реакциях оказываются D-отрицательными.

Немецкие исследователи (Duscher и соавт. [21]) нашли, что полиморфизм гена RHCE столь же выражен, как и полиморфизм гена RHD. При ДНКгенотипировании 122 доноров с измененной экспрессией антигенов С, с, Е и е выявлено 34 аллеля гена RHCE. Постоянно определялись три аминокислотные замены: Met 167 Lys, Gly 96 Ser и Leu 12 Аrg.

995

Другая группа немецких авторов (Bugert и соавт. [10]) также провели исследования в этом направлении. Генотипирование и секвенирование 10 экзонов гена RHCE у 43 лиц с ослабленной экспрессией антигенов С, с, Е и е позволили выявить 22 аллеля, 10 из которых ранее не были известны. Преобладали одиночные аминокислотные замены, выявлены также гибридные аллели RHCE-D-CE с участием различных сегментов экзона 5 гена RHCE. Установлено, что указанные варианты встречаются в Северной Германии с ча-

стотой 0,012 – 0,2 %.

На молекулярном уровне исследована регуляция функции генов RH (Denomme и соавт. [20]). Так, в проксимальных участках генов RHD и RHCE идентифицированы промоторные 5ʹ-фланкирующие регионы величиной 1246 пар нуклеотидов. Последние регулируют экспрессию пептидов RhD и RhCE в цис-положении. В указанном регионе промоторную функцию выполняют участок величиной 105 пар нуклеотидов и мотив (55 пар), участвующий в транскрипции.

Отмечен полиморфизм локуса RHCE у жителей Карибского бассейна (Noizat-Pirenne и соавт. [50]). Обнаружены парциальные антигены hr′ (с), а также редкий аллель RHCE*ceAR, свойственный негроидам, который кодирует парциальный антиген hrʺ (е). На эритроцитах лиц, гомозиготных по этому редкому аллелю, отсутствует часто встречающийся антиген Hr S (Rh18).

Peyrard и соавт. [54] описали 21-летнюю женщину, больную талассемией, с фенотипом B(III)CcDeekk. В сыворотке ее крови выявлены антитела анти-с, анти-се, анти-Fy b, анти-Jk a и анти-S. Антитела анти-с + се, выделенные путем адсорбции – элюции, реагировали с эритроцитами лиц ceAR / ceEK, ceEK / ceEK

и ceAR / ceBI. С эритроцитами лиц ceAR / ceAR, ceMO / ceMO и ce s(340)/ ce s(340) эти антитела не реагировали. Известно, что эритроциты лиц, имеющих какой-либо из 6 перечисленных генотипов, содержат парциальные антигены hr′ (с). Таким образом, установлено, что редкий аллель RHCE*ceAR наряду с парциальным антигеном hrʺ (е) кодирует парциальный антиген hr′ (с). Авторы высказали предположение, что на эритроцитах лиц, имеющих геноти-

пы ceAR / Ce, ceAR / ceAR, ceMO / ceMO и ce s(340)/ce s(340), отсутствует эпитоп,

свойственный нормальному антигену hr′ (с) и некоторым парциальным антигенам hr′ (с).

Описан 40-летний негроид с серповидно-клеточной анемией, которому многократно производили гемотрансфузии (Pham и соавт. [55, 56]). Больной имел фенотип DСcee, при этом антигены С, с, е и се на его эритроцитах были нормально выражены и выявлялись как с использованием поликлональных, так и моноклональных антител. На основании серологических и генетических исследований установлен генотип больного – (С)ce s / DCe. Сыворотка его крови содержала антитела к антигенам D, c, E, e, V, Js a и S. Фракция со специфичностью анти-с была выделена адсорбцией – элюцией. Антитела

996

реагировали интенсивнее с эритроцитами с +се +, чем с +се–. Отрицательные реакции были получены с эритроцитами лиц, гомозиготных по гену (С)ce s. Таким образом, было показано, что упомянутый аллель (С)ce s, свойственный негроидам, кодирует парциальный антиген hr' (с) и другие слабовыраженные антигены системы резус у негроидов. Авторами выявлены два варианта аллеля (С)ce s, кодирующих слабые варианты антигена hrʺ (е) и других антигенов.

Среди негроидов часто встречался парциальный антиген rh′ (С) (Tournamille и соавт. [70]), кодируемый аллелями (С)ce s и R N. Среди 177 случайно отобранных лиц у 49 выявлены необычные варианты антигена С. Среди больных серповидно-клеточной анемией, имеющих парциальный антиген С, 30 % содержали анти-С-антитела, появившиеся после повторных гемотрансфузий. Авторы указывают на необходимость идентификации парциального антигена С у больных серповидно-клеточной анемией и переливания им С-отрицательных эритроцитов во избежание развития аллоиммунизации к этому антигену.

Получены убедительные доказательства качественных различий антигенов Hr B и hr B (Pham и соавт. [57]). В частности, у Hr B-отрицательных лиц выявлены антитела анти-hr B, а у hr B-отрицательных – анти-Hr B. Среди сенсибилизированных были как гомозиготы, так и гетерозиготы по редкому алле-

лю (С)ce s.

Hue-Roye и соавт. [29] уточнили молекулярную основу антигена Be a (Berrens, Rh36). В середине 1950-х годов этот антиген был включен в систему Rh из-за его связи с ослабленной экспрессией антигенов с, е и f. Молекулярногенетическое обследование 4 Be a-положительных членов одной семьи со слабовыраженным антигеном hr′ (с) выявило мутацию F 668 G в экзоне 5 гена RHCE*ce. Последняя приводила к замене пролина на аргинин в положении 221 протеина Rhce. Авторы высказали предположение, что такая замена оказывает влияние на пространственную структуру и электрическй заряд данного участка протеина Rhce, что ослабляет экспрессию антигенов c, e и f (ce) у

лиц Be(a + ).

Убедительно показана принадлежность антигена Crawford к системе Rh (Flegel и соавт. [24]). Этот антиген обусловлен аллелем ceCF, кодирующим полипептид RHce с аминокислотными заменами Trp 17 Сys, Gln 233 Glu и Leu 245 Val. Авторы считают его одним из вариантов гена ce s, свойственного негроидам. Фенотип ceCF встречается у них с частотой 0,056 % .

Вариант гена ce, кодирующий выработку некоторого количества D-эпитопов, найден Chen и соавт. [11] в Швейцарии у 11 доноров и 1 больного с фенотипом cde. Эритроциты этих лиц, обработанные бромелином, давали положительные реакции с некоторыми моноклональными анти-D-антителами. Фенотип, получивший обозначение ceSL(по аллелю ceSL), встречался с частотой 1 : 675 среди

997

жителей окрестностей г. Берна. У жителей других районов Швейцарии, а также в Южной Германии он не выявлен.

Описан вариант аллеля ce, получивший обозначение ceRA (Noizat-Pirenne

исоавт. [50, 52]). Этот генный комплекс кодирует слабый антиген hrʺ (е), при этом отсутствует ассоциированный с ним антиген hr S (Rh19). При молекулярно-генетических исследованиях выявлены мутации G 50 и G 540 в экзонах 1 и 4 гена RHСЕ. Последние приводят к аминокислотным заменам Trp 16 Cys и Gly 180 Arg во внутримембранном домене RHCE-полипептида

свыраженными изменениями экспрессии антигенов, которые на нем расположены. Антиген hrʺ (е) не выявлялся на эритроцитах пробанда многими образцами анти-е-антител даже при проточной цитофлюориметрии. Авторы полагают, что именно аминокислотная замена Gly 180 Arg обусловливает повышенный риск аллоиммунизации антигеном hrʺ (е). Они рекомендуют учитывать это при подборе эритроцитов реципиентам, особенно негроидам с серповидно-клеточной анемией.

Группой исследователей из Аргентины (Cotorruelo и соавт. [14]) проведены молекулярно-генетические исследования у 148 лиц, унаследовавших гаплотип Dce. С помощью ПЦР исследованы экзоны 1 и 5, а также интрон 2 гена RHCE. Установлено присутствие нуклеотидов С 48 в экзоне 1 и G 733 в экзоне 5 RHCE. Авторы считают важным присутствие определенных нуклеотидов в положении 48 в экзоне 1. Ими идентифицированы варианты алле-

ля RHce в виде гаплотипов Dce (C 48), Dce s (G 48), Dce (G 48) и Dce s (C 48).

Присутствие G в позиции 733 экзона 5 коррелировало с появлением антигена VS (Rh20), свойственного негроидам. Авторы объясняют присутствие аллелей Dcе s (G48) и Dce s (C 48) среди жителей Аргентины метисацией с негроидами.

Продолжены молекулярно-генетические исследования редкого антигена JAL (Rh48), открытого более 30 лет назад. Последний найден как среди европеоидов, так и среди негроидов. Позднее JAL-положительные индивиды обнаружены среди жителей Карибского бассейна. Hustinx и соавт. [31], Westhoff

исоавт. [78] провели молекулярно-генетические исследования крови 17 JAL-положительных лиц. Оказалось, что у европеоидов антиген JAL является продуктом гена Се, тогда как у представителей других рас – продуктом локуса се. У всех обследованных в экзоне 3 имелась мутация 374>T, ведущая к аминокислотной замене Arg 114 Trp в RhCE-полипептиде. У африканцев в гене се обнаружена точковая мутация 735>G, обусловливающая аминокислотную замену Leu 245 Val. Этот аллель оказался сцепленным с нормальным геном RHD и парциальным вариантом RHD*DAU. Авторы высказали предположение, что в результате аминокислотной замены Arg 114 Trp участок полипептидной цепи протеина RHCE утрачивает пространственную жесткость в области аминокислот, определяющих С- и с-специфичность.

998

Изменения затрагивают аминокислоты в позиции 226, определяющей Е- и е-специфичность. В результате изменяется экспрессия антигенов С, с, е,

а также V и VS (Westhoff и соавт. [78]).

Из 17 упомянутых лиц JAL + 3 оказались аллоиммунизированными в результате гемотрансфузий. В сыворотке их крови определялись антитела, напоминающие анти-с + анти-е. Детальное изучение антител позволило установить их специфичность. Они были направлены к новому часто встречающемуся антигену, антитетичному JAL (Daniels и соавт. [19], Lomas-Francis и соавт. [43, 44]). Антиген получил обозначение CEST и был включен в систему Rh как RH57. Таким образом, система Rh пополнилась еще одним антигеном.

Coghlan и соавт. [13] установили молекулярную основу редкого антигена LOCR (Rh55). У 5 неродственных лиц LOCR + выявлена замена нуклеотидов G 286 A в гене RHCE. Интересен тот факт, что возникновение антигена Rh26 также связано с аминокислотной заменой в этой позиции. Возникло предположение, что антигены LOCR и Rh26 могут быть антитетичны. Однако в серологических реакциях лишь некоторые, но далеко не все эритроциты Rh26– имели фенотип LOCR +.

Система Lutheran

Karamatic Crew и соавт. [33] получили новые данные о генетических механизмах возникновения нулевого фенотипа Lutheran. При обследовании 3 лиц Lunull рецессивного типа авторы выявили четыре вида генетических изменений, способствовавших инактивации гена LU. У одного из обследованных выявлены мутация 691>T в экзоне 6 с образованием стоп-кодона (Arg 231 STOP), а также делеция экзонов 3 и 4 гена LU. Двое других лиц оказались гомозиготными по мутациям 711>A в экзоне 6 (Cys 237 STOP) и 364>T в экзоне 3 (Arg 121 STOP). Таким образом, во всех 3 случаях причиной фенотипа Lunull явились точковые мутации с образованием стоп-кодонов.

Появилось сообщение об успешном выявлении антител анти-Lu b с использованием магнитизированных частиц, предварительно сенсибилизированных рекомбинантным протеином Lu b через стрептавидин (Seltsam и соавт. [65]). Антитела обнаружены во всех 13 использованных сыворотках антиLu b. Последние имели при использовании указанного метода с эритроцитами Lu(a −b + ) более высокий титр, чем в стандартных серологических тестах.

Поскольку антитела анти-Lu b не вызывают ГБН и посттрансфузионных реакций, использование столь чувствительного метода скрининга указанных антител не представляется перспективным. Тем не менее упомянутый метод может оказаться полезным при дифференцировке антител в мультиспецифических сыворотках.

999

Используя новейшие фаговые рекомбинантные технологии, группа французских и канадских исследователей впервые получила моноклональные антитела анти-Lu a IgG1 (Richard и соавт. [63]).

Системы Kell и Kx

Yuan и соавт. [86] описали 12-летнего нигерийского мальчика, которому были произведены множественные гемотрансфузии в связи с серповидноклеточной β-талассемией. Больной имел фенотип Js(a +b −) по системе Kell, в сыворотке его крови содержались антитела анти-Js b. Из-за отсутствия донора Js(a +b −) по жизненным показаниям ему было перелито несколько доз серологически несовместимых эритроцитов. После трансфузий гемолиза in vivo не отмечено. Однако последующее изучение приживаемости меченных Cr51 эритроцитов in vivo и тесты с монослоем моноцитов in vitro показали, что антитела способны снижать продолжительность циркуляции перелитых эритроцитов. Авторы считают антитела anti-Js b клинически значимыми

ирекомендуют избегать трансфузий эритроцитов Js(b + ) больным, имеющим anti-Js b-антитела.

Lee-Stroka и соавт. [40] выявили вариант антигена K. У 53-летнего мужчины с фенотипом K + эритроциты реагировали с тремя образцами поликлональных и двумя образцами моноклональных анти-K-антител. В то же время были получены отрицательные реакции с одним образцом поликлональных

идвумя другими образцами моноклональных анти-K-антител. Молекулярногенетическими исследованиями выявлена точковая мутацияA577 T с заменой треонина на серин в положении 193 Kell-гликопротеина. Авторами даны рекомендации подвергать производимые реагенты анти-K тестированию на их способность выявлять описанный выше вариант антигена K.

Аналогичные данные получены другой группой исследователей (Poole и соавт. [60]), которые установили, что мутация 577>T и расположение серина в позиции 193 ведут к появлению необычного антигена K, выявляемого не всеми образцами как поликлональных, так и моноклональных анти-K-антител. Авторы отметили, что и ген K в данном случае не всегда выявляется в стандартной процедуре генотипирования (идентифицируется мутация 578>Tв гене KEL, ведущая к аминокислотной замене Thr 193 Met), что может привести к ошибочным результатам.

Kormoczi и соавт. [35] исследовали молекулярно-генетический механизм

возникновения фенотипов Ko и Kel у жителей Австралии. Произведено генотипирование лиц с фенотипом Kk и KK. В 14 случаях были выявлены расхождения в результатах серологических и молекулярно-генетических исследований. Так, у лиц с фенотипом KK установлен генотип KEL*1 / KEL*2. Выявлено 8 ранее неизвестных молчащих аллелей K o и два – K el. Проведенные исследования позволили уточнить частоту распределения аллелей K и k у австралийцев.

1000