Лабораторная работа № 2: «Морфология микроорганизмов»

2.1 Морфология дрожжей

Дрожжи – это оклеточные неподвижные организмы размером в поперечнике от 3 до 5 мкм, длиной от 6 до 10-15 мкм.

Форма клеток дрожжей чаще круглая, овально-яйцевидная, эллипсоидальная, иногда встречаются цилиндрические и лимонообразные. (рис. 2)

Рис.2 Морфология дрожжей

2.2 Морфология бактерий.

Бактерии – одноклеточные организмы малых размеров: от долей микрометра до 10 мкм. Существуют три основные формы бактерий: шариковидная, палочковидная и извитая.

Шариковидные бактерии или кокки, различаются размерами и взаимным расположением клеток.

Микрококки – кокки. располагающиеся в виде отдельных клеток или небольшими скоплениями.

Рис.3 Формы бактерий.

а - шариковидные: 1 – микрококки; 2 – стрептококки; 3 – сарцины; 4 – стафиликокки; б – палочковидные: 5 – палочки без спор; 6 – палочки со спорами; в – извитые: 7- вибрионы; 8 – спириллы; 9 – спирохеты.

Стрептококки – кокки, располагающиеся в виде цепочки.

Сарцины - кокки, объединенные по 8 клеток в виде пакетов или кубов.

Стафилококки – кокки в виде скоплений, напоминающие грозди винограда.

Палочковидные бактерии различаются соотношением длины и ширины, способностью к спорообразованию, расположением в виде отдельных клеток или цепочками.

Палочки, образующие споры, называют бациллами.

В клетке образуется одна спора, которая может располагаться в центре, тогда клетка принимает форму веретена, и ближе к концу – клетка имеет форму барабанной палочки.

Споры под микроскопом имеют вид округлых или овальной формы блестящих зерен. После отмирания клетки спора освобождается. (рис. 3)

Извитые, или изогнутые, бактерии различаются по толщине, длине и степени изогнутости.

Бактерии размножаются делением клетки пополам. У некоторых бактерий после деления клетки не отделяются друг от друга и образуют сцепления разных форм.

План занятия.

1. Ознакомиться с морфологией бактерий.

2. Приготовить препараты «раздавленная капля» из различных видов бактерий.

3. Приготовить окрашенные препараты простым способом.

4. Приготовить окрашенные препараты по Граму.

5. Промикроскопировать готовые препараты бактерий, окрашенные «простым способом».

Методические указания.

1. Промикроскопировать окрашенные препараты микрококков, стрептококков, стафилококков, сарцин, палочек без спор, палочек со спорами с иммерсионным объектовом 90 и зарисовать их. Споры при окрашивании простым способом не прокрашиваются, т.к. оболочка их мало проницаема для краски, и выглядят как светлое пятно в клетке.

2.3 Морфология грибов Плесневые грибы

Плесневые грибы образуют тело, которое называется мицелием, или грибницей. Тело представляет собой тонкие ветвящиеся и переплетающиеся нити, которые называются гифами, и различные органы размножения (иногда они отсутствуют). Длина гиф бывает довольно различной, толщина - от 10 до 15 мкм. (рис 4, 5, 6)

Рис. 4 Плесневые грибы. а – Penicillium: 1 – конидиеносец; 2 – ветви; 3 – стеригмы; 4 – конидии; б – Botrytis: 1 – конидиеносец; 2 – ветви; 3 - конидии; в – Alternaria: 1 – конидиеносец; 2 – многклеточная конидия

Рис. 5 Плесневые грибы. а – Rhizopus: 1 – спорангиеносец; 2 – спорангий со спорами; 3 – столон; б – Trichotecium: 1 – кондиеносец; 2 – конидия; в – Fusarium: 1 – кодиеносец; 2 – конидии; г - Cladosporium: 1 – конидиеносец; 2 – конидии; д – Sterighmatocustis (Asp. niger) - конидиеносец с головкой; 1 и 2 стеригмы с конидиями; е – Monilia.
Рис 6. Плесневые грибы. а – Oidium: 1 – оидии; 2 – гифа; б – Mucor: 1 – спорангиеносец со спорангием (2) и спорангиоспорами (3); 4 – колонка; в – Aspergillus: 1 – конидиеносец со стеригами (2) и конидиями (3).

Мицелий грибов бывает одноклеточным (представляет одну сильно разветвленную клетку) и многоклеточным (в гифах имеются поперечные перегородки).

Грибы развиваются обычно на поверхности субстрата, т.е. нуждаются в кислороде. Часть гиф гриб внедряет в субстрат для получения питания, другая часть развивается в воздухе (воздушный мицелий)

Воздушный мицелий бывает пушистым, паутинистым, ватообразным, бархатистым, кожистым, что обусловлено характером сплетения гиф. Окраска мицелия тоже бывает различной. Эти признаки называются культуральными и служат для распознавания грибов. Но основными признаками для характеристики и распознавания грибов являются различия в способах и органах размножения (морфологические признаки).

План занятия.

1. Ознакомиться с морфологией грибов [1].

2. Приготовить препараты грибов «раздавленная капля» из Oidium, Aspergillus, Mucor, Penicillium, Botrytis, Alternaria и микроскопировать их.

Методические указания.

1. Культуры указанных грибов предварительно вырастить в чашках Петри на сусло-агаре.

2. При исследовании гриба Oidium снять бактериальной иглой белый стелющийся налет мицелия с субстрата, осторожно распрямить его в капле стерильной воды на предметном стекле и приготовить препарат «раздавленная капля». Обратить внимание на многоклеточность мицелия и на способ размножения его оидиями, образующимися на концах гифив в виде бесцветных клеток прямоугольной и округло-прямоугольной формы.

3. При приготовлении препарата гриба Мисоr надо накладывать покровное стекло осторожно, чтобы не разрушить спорангии. Обратить внимание на одноклеточность мицелия и на простое неветвящееся строение спорангиеносцев и их единичное расположение. Спорангии, сидящие на верхушках крупные, шарообразные, с массой спор, видных через прозрачную оболочку. Спорангиоспоры – одноклеточные, округлые, элипсовидные, гладкие, бесцветные или сероватые. В препарате всегда много спор, свободно лежащих (из лопнувших спорангиев).

4. Для приготовления препарата Aspergillus надо взять окрашенный мицелий. Обратить внимание на многоклеточность гифов мицелия и на органы размножения – конидиеносцы. Конидиеносец – простой, одноклеточный, неветвящийся. На конце – булавовидное вздутие, на ней расположены стеригмы и на них одноклеточные споры в виде цепочек – конидий.

5. Для приготовления препарата Penicillium рекомендуется брать более молодую, зеленую часть грибницы – на границе с белыми краями. При микроскопировании найти многоклеточные гифы, кистевидно разветвленные на концах. На концах стеригмы (2-4 шт), а на стеригмах цепочки одноклеточных конидий, имеющих голубовато-зеленую окраску с различными оттенками.

Для идентификации гриба, вызывающего порчу продукта, после изучения его культурных и морфологических признаков, с помощью сокращенного определителя «ключа», устанавливают родовое название гриба.