Температура культивирования.

В соответствии с оптимальными температурами роста различают три группы микроорганизмов: психрофилы - холодолюбивые, оптимум развития в зоне +5 - +20^оС, мезофилы – оптимум развития выше +25 - +35^оС, термофилы – оптимум развития выше +45^оС. Необходимая температура обеспечивается термостатами.

Аэрация.

По отношению к кислороду микроорганизмы делятся на аэробы (использующие кислород как окислитель) и анаэробы (не использующие кислород). Для успешного выращивания важен не сам кислород, а окислительно – восстановительный потенциал питательных сред. Этот потенциал rH₂ для аэробных микроорганизмов должен быть не ниже 10 единиц, а для анаэробных – не выше 5.

Стерилизация.

Питательные среды, разлитые в колбы и пробирки, закрывают ватными пробками и подвергают стерилизации.

Стерилизацию проводят в автоклаве при давлении 1 атм в течении 20-30 мин. При этом погибают как вегетативные формы, так и споры бактерий, дрожжей и плесеней.

Для сред, заметно изменяющих свои свойства при автоклавировании, применяют стерилизацию текучим паром дробным методом.

Жидкие питательные среды, не выдерживающие нагрева, стерилизуют фильтрованием через специальные бактериологические фильтры.

Стерилизацию посуды, ваты, песка и др. проводят в сушильных шкафах при температуре 160-170^оС в течении 1,5 –2 ч.

Мелкие предметы (бактериологические иглы, предметные стекла, шпатели) стерилизуют фламбированием, т.е обжигом в пламени горелки.

Задания для самостоятельной работы

1.Выпишите классификацию питательных сред для культивитрования микроорганизмов.

2.Приведите виды стерилизации питательных сред, микробиологической посуды и инвентаря.

3.Изучите правила поведения в микробиологической лаборатории.

Вопросы по собеседованию и самоконтролю (уо-1)

1.Из каких частей состоит микроскоп?

2.Какие объективы называются сухими, какие иммерсионными? Для чего используется кедровое масло?

3.Чему равняется общее увеличение микроскопа?

4.Чем регулируется степень освещенности препарата?

5.Какие препараты готовят для рассмотрения микроорганизмов в живом состоянии?

6.Из каких этапов состоит приготовление окрашенного препарата?

7. Какие способы окраски Вы знаете?

8.Какие 10 химических элементов (органогенов и зольных элементов) должны входить в состав питательной среды?

9.Какие питательные среды называются искусственными, какие естественными?

10.Как классифицируются среды?

11.Чем отличаются способы выращивания аэробных и анаэробных микроорганизмов?

12.Какие оптимальные температуры выращивания у холодолюбивых, теплолюбивых и мезофильных микроорганизмов?

13.Какие способы стерилизации Вы знаете?

Тестовые задания к теме 1.

(Тесты, соответствующие теме1 из АПИМ)

Тема 2. Морфология и систематика микроорганизмов

Изучив тему, студент должен знать морфологию грибов, дрожжей и бактерий. Уметь морфологически идентифицировать бактерии, дрожжи и грибы Владеть методами приготовления препаратов дрожжей, грибов, бактерий и методами их идентификации

Морфология микроорганизмов изучает их внешний вид, форму и особенности строения, а также способность к движению, спорообразованию, способы размножения.

Знание морфологических признаков играет большую роль в распознавании и классификации микроорганизмов.

При изучении материала данного раздела следует обратить внимание на разделение микроорганизмов, выделенных в царство «Протиста» на высшие и низшие на основе особенностей их клеточной организации, отражающей уровень эволюции.

Высшие протисты (эукариоты) существенно отличаются от низших (прокариотов). .

При изучении морфологии бактерий (прокариотов) необходимо обратить внимание на формы и размеры бактерий, строение клеточной стенки, цитоплазматической мембраны, цитоплазмы и ее включений, на подвижность и размножение бактерий, возможное спороношение.

При изучении форм и размеров бактерий следует выяснить виды кокковых, палочковидных, извитых, архебактерий и антиномицетов.

При изучении морфологии грибов (эукариотов) следует уяснить, что они обширная и разнообразная группа растительных микроорганизмов, не содержащая хлорофилла и не способная к синтезу органических веществ из углекислого газа (т.е. хемоорганотрофы).

Прежде всего, надо выяснить возможные места обитания грибов, их применение в промышленности для получения органических кислот, витаминов, ферментов, антибиотиков, а также условия их спонтанного размножения, вызывающего порчу товаров, болезни растений, животных и человека.

Морфологию грибов следует изучать со строения мицелия, отметив его деление на субратный и воздушный части, их функции, строение гифов и их значение при идентификации грибов, а также строение грибной клетки.

Особое внимание следует уделить способам размножения грибов: вегетативному и бесполому, т.к. они наиболее часто встречаются при порче товаров. Надо запомнить, как выглядят оидии и органы открытого и закрытого бесполого размножения, которые используют при распознавании грибов и лежат в основе их классификации.

Следует знать также принцип разделения грибов на совершенные и несовершенные по их способам размножения.

Систематика грибов предполагает разделение царства Mycota на два отдела: слизевые грибы (миксомицеты) и истинные грибы (эумицеты). Истинные грибы распределены на шесть классов: хитридиомицеты, оамицеты, зигомицеты, аскомицеты, базидиомицеты и дейтеромицеты (несовершенные грибы).

При изучении дрожжей надо отметить их широкое распространение в природе и на пищевых субстратах, а также большое применение в промышленности.

Следует знать, что они относятся к классу сумчатых грибов, подклассу голосумчатых, представляют неподвижные одноклеточные микроорганизмы округлой, овально-яйцевидной; реже цилиндрической и лимоновидной форм с размерами не более 10-15 мкм. Строение их клеток сходно со строением грибной клетки, некоторые из них выделяют слизь (хлопьевидные дрожжи). Надо обратить внимание на более распространенный вегетативный способ размножения почкованием и размножение спорами у диких форм дрожжей.

Следует уделить внимание роду сахаромицес (Saccharomyces), объединяющую как природные, так и культурные виды, применяемые широко в промышленности.

Особый интерес представляют дрожжи сахаромицес церевизия (выработана в мире более 2 блн. т.), применяемые в пивоварении, хлебопечении, квасоварении, в производстве спирта. Надо обратить внимание на то, что пищевые дрожжи, применяемые как добавки к питанию, характеризуются полностью инактивированными ферментами.

Препараты из дрожжей представляют большой интерес для получения экологически безопасных продуктов питания, эффективных кормов для животных, парфюмерно-косметических изделий с высокой биологической активностью.