Раздел 1. Научные основы микробиологии

Тема 1. Предмет, методы и цели микробиологии.

При подготовке к практическому занятию необходимо изучить правило поведения в микробиологической лаборатории, устройство микроскопа , методы стерилизации, методы культивирования и приготовления микробиологических препаратов.

Изучив данную тему студент должен знать методы микрокопирования и выращивания микроорганизмов, уметь на практике готовить микробиологические препараты и выращивать микроорганизмы, владеть методами работы с микроскопом и методами выращивания микроорганизмов.

.

Лабораторная работа № 1: Правила поведения в микробиологической лаборатории. Биологический микроскоп. Приготовление препаратов микроорганизмов. Условия выращивания микроорганизмов. Питательные среды. Стерилизация.

1. К работе в микробиологической лаборатории допускаются лица, знакомые с правилами поведения в ней.

2. Каждый студент должен иметь индивидуальную спец. одежду (халат, обувь).

3. Не разрешается выходить за пределы лаборатории в халате.

4. Личные вещи студентов должны находиться в специально приспособленном месте.

5. Недопустимо в лаборатории курение и прием пищи.

6. При попадании исследуемого материала на поверхность лабораторной мебели их обрабатывают дезинфицирующим раствором, находящимся на рабочем месте. Руки обрабатывают дезинфицирующим раствором, находящимся рядом с раковиной, затем тщательно моют с мылом.

7. Предметы, необходимые для работы, приготовляют на рабочем месте до ее начала: банка с дезинфицирующим раствором для отработанного материала и пипеток, банка с ватой, пинцет, красители, фиксирующие жидкости, стерильные пипетки, пробирки, стекла предметные, покровные, спиртовки, спички. Иметь при себе тетрадь и цветные карандаши для записи занятий и зарисовки препаратов.

8. По окончании работы исследуемый отработанный материал помещают в специальные емкости для обеззараживания. Пинцет, бактериологическую петлю прокаливают на пламени спиртовки. Рабочее место убирают и протирают дезинфицирующим раствором. Руки обрабатывают раствором, затем, моют с мылом.

Устройство биологического микроскопа.

Биологический микроскоп состоит и трех основных частей: механической, осветительной и оптической.

Механическая часть, штатив, состоит из ножки, тубуса, тубусодержателя, предметного столика и винтов.

Ножка – подковообразной формы, служит опорой микроскопа.

Тубус – зрительная трубка микроскопа. В верхнее отверстие вставлен окуляр, в нижнее вставлен «револьвер» с ввинченными объективами. Вращая «револьвер» можно установить любой объектив под тубусом. (рис. 1)

Рис. 1 Микроскоп биологический МБИ –1 : 1 – объектив, 2 – окуляр, 3 – конденсор, 4 – зеркало, 5 – тубус, 6 – тубосодержатель, 7 – предметный столик, 8 – «револьвер», 9 – клемма, 10 – макровинт, 11 – микровинт, 12 – винт конденсора, 13 – ножка.

Тубусодержатель – используется в качестве ручки для переноса микроскопа.

Предметный столик служит для размещения изучаемого препарата, который закрепляется на нем зажимами. В центре предметного столика находится отверстие для прохождения лучей света, освещающих препарат. Предметный столик может передвигаться незначительно с помощью двух винтов, симметрично расположенных на краях столика.

Винты – макрометрический и микрометрический.

Макрометрический – передвигает тубус вверх и вниз для установления его на необходимом расстоянии от препарата. Микрометрический – служит для точной установки тубуса.

Осветительная часть микроскопа представлена зеркалом, конденсором и ирис-диафрагмой.

Зеркало служит для направления лучей к конденсору и имеет плоскую и вогнутую поверхности. При работе с конденсором пользуются плоскими зеркалами, без конденсора – вогнутыми.

Для освещения объектов применяются специальные осветители ОИ-7 и ОИ-19.

Конденсор – служит для лучшего освещения препарата, что достигается собиранием отраженных лучей от зеркала и направлением их на препарат.

С помощью винта конденсор передвигается вверх и вниз. При работе с малыми увеличениями конденсор опускают, а при работе с большими увеличениями – поднимают.

Ирис-диафрагма – регулирует поток света на конденсор.

Оптическая часть микроскопа состоит из объективов и окуляров.

Объектив имеет систему линз, заключенных в металлическую оправу. Линза, обращенная к предмету, называется фронтальной. Чем больше кривизна фронтальной линзы, тем короче фокусное расстояние и больше увеличение. Объектив дает действительное, увеличенное, обратное изображение предмета.

Микроскопы модели МБИ-1, МБИ-3 имеют три объектива, которые дают разное увеличение: 8,40,90.

Объективы подразделяют на сухие и иммерсионные.

Объективы 8 и 40 – сухие, между их фронтальной линзой и препаратом находится воздух. При работе с иммерсионным объективом 90 для устранения светорассеивания расстояние между фронтальной линзой объектива и препаратом заполняют кедровым (иммерсионным) маслом, имеющим одинаковый показатель преломления света со стеклом.

Окуляр состоит из двух линз, заключенных в металлическую оправу. Верхняя линза называется глазной, нижняя – собирательной. Обычно окуляры дают увеличение в 7,10,15 раз. Окуляр увеличивает изображение, данное объективом. Таким образом, микроскоп дает обратное увеличенное изображение предмета, равное произведению увеличений объектива и окуляра. С помощью биологического микроскопа можно рассмотреть предмет размером не менее 0,2 мкм.