- •Практическое занятие Тема: «Культивирование бактерий»
- •1.Составьте схему бактериологического метода исследования по следующему образцу:
- •2.Составьте алгоритм приготовления питательной среды.
- •Краткая характеристика питательной среды
- •Техника приготовления
- •3.Зарисуйте в тетрадь технику посева на плотные питательные среды.
- •4.Запишите алгоритм культивирования микроорганизмов.
- •5.Запишите культуральные свойства в тетрадь.
- •Знакомство со схемой лабораторного диагноза эшерихиоза по схеме.
5.Запишите культуральные свойства в тетрадь.
Культуральные признаки микробов определяются характером роста их на питательных средах. Будучи постоянными, для каждого вида микроба, они являются важным диагностическим признаком.
Колония – это потомство одной клетки, видимое скопление огромного количества микроорганизмов на питательной среде.
1. Размеры колонии. Она может быть очень мелкой, мелкой, средней и большой. Диаметр измеряется в миллиметрах и может находиться в диапазоне от 0,1 до 5 и более. Колонии, не превышающие 1 мм в диаметре, называются точечными.
2. Цвет, а также способность к выделению красящего пигмента в окружающую среду.
3.Поверхность. Здесь определяют, является ли она гладкой, шероховатой, бугристой или же вовсе складчатой.
4. Профиль колонии: кратерообразная, выпуклая, конусовидный или просто плоский.
5. Структура колонии. Она может быть однородной, струйчатой, крупнозернистой или мелкозернистой.
6. Оптические свойства: прозрачная, полупрозрачная, непрозрачная, флуоресцирующая, матовая или блестящая;
7. Консистенция. Колония может быть вязкой или жидкой, тестообразной или пленчатой, маслянистой или хрупкой.
8.Край колонии: ровный, лопастной, ризоидный, волнистый, зубчатый и т. д.
Изучение роста кишечной палочки на среде Эндо по муляжу (зарисовать).
На среде Эндо кишечная палочка образует выпуклые колонии малиново-красного цвета с металлическим блеском или без него.
Среда Эндо – дифференциально-диагностическая среда. Кроме питательной основы, среда содержит 1% лактозу и насыщенный спиртовой раствор основного фуксина, обесцвеченного перед добавлением к агару раствором сульфита натрия. Свежеприготовленная среда Эндо бесцветна или слегка розовая.
При росте на этой среде кишечная палочка разлагает лактозу, образуются кислые продукты, они восстанавливают фуксин из бесцветного соединения в красный и поэтому вырастают колонии, окрашенные в малиново-красный цвет.
Изучение характера роста стафилококков на желточно-солевом агаре (ЖСА) по муляжу (зарисовать)
Посев на желточно-солевом агаре проводят для определения лецитовителлазы (лецитиназы). Для приготовления ЖСА к 10% солевому агару, расплавленному и остуженному до 60 градусов, добавляют 10% желточной взвеси (1 желток асептично взбалтывают в 200 мл физиологического раствора), агар тщательно смешивают и разливают в чашки.
St.aureus образует на желточно-солевом агаре непрозрачные круглые, слегка выпуклые колонии золотистого или желтого цвета. Среда вокруг колоний мутнеет за счет расщепления липовителлина (комплекс жира и белка), содержащегося в желтке ферментом лецитиназой. В результате действия фермента от липовителлина отрываются жирные кислоты, степень дисперсности белка уменьшается, происходит преципитация его, что приводит к помутнению среды. Освобождение жирных кислот сопровождается образованием “радужного” ореола вокруг колоний (лецитиназоположительные стафилококки).
St.epidermidis на желточно-солевом агаре образует колонии белого цвета или лимонно-желтые с ровным краем, среднего размера. Среда вокруг колоний не изменена (лецитиназоотрицательные стафилококки).
