40.Вирулентные и умеренные фаги. Лизогения.

-Вирулентные фаги взаимодействуют с клеткой по продуктивному типу, происходит лизис(растворение клетки и ее систем) бактерии, происходит освобождение новых бактериофагов.

-Умеренные фаги взаимодействуют с клеткой по интегративному типу, лизиса бактерии не происходит. ДНК фагов встраивается в хромосому бак. клетки, в таком случае геном фага называют профаг.

Сама бактериальная клетка называется – лизогенной при проникновении в нее фага. Сосуществование фага и клетки называется лизогенией.

41.Титр фага. Методы определения.

Титр фага(бактериофага) – это наименьшее количество бактериофагов, вызывающих лизис бактерии.

Методы определения:

1)по Фишеру: дно чашки делят на 30 квадратов. В центр каждого квадрата вносят исследуемые бульонные культуры. Результат учитывают примерно через сутки инкубирования в термостате.

2)титрование в жидкой среде по Аппельману: в ряд пробирок с МПБ(мясопептонный бульон) вносят индикаторную культуру и по 1 мл фагосодержащего материала. После инкубирования учитывают результаты: «+»-лизис индикаторной культуры(осветление среды), «-»-рост индикаторной культуры(потемнение среды).

3)метод агаровых слоев по Граица: в пробирке с растворенным полужидким агаром вносят индикаторную культуру и 1 мл фагосодержащего материала, перемешивают и выливают в чашки с МПА(мясопептонный агар). После инкубации подсчитывают число негативных колоний на чашке и делают пересчет на 1 мл неразведенного метариала.

42.Принцип получения культуры фагов. Применение в медицине.

Получение: При получении препаратов фагов используют проверенные производственные штаммы фагов и соответственно типичные культуры микроорганизмов. Бактериальную культуру в жидкой питательной среде, находящуюся в фазе размножения, заражают взвесью фага. Лизированную фагом культуру (обычно на следующий день) фильтруют через бактериальные фильтры. Готовый препарат фага представляет собой прозрачную жидкость желтоватого цвета. 

Применение в медицине:

-Фаготерапия: применение бактериофагов для лечения инфекционных заболеваний.

-Фагопрофилактика: применение бактериофагов с целью профилактики инфекционных заболеваний у людей, бывших в контакте с больными, но статус которых еще не известен.

-Фаготипирование: используется при внутривидовой идентификации бактерий, то есть определение фаготипа.

-Генная инженерия.

43.Организация генетического аппарата у бактерий. Генотип и фенотип.

Бактерии являются прокариотами. Обычно имеют единственную кольцевую ДНК. Область локализации ДНК называется нуклеоид, не окруженный мембраной. В связи с этим новосинтезированная мРНК сразу доступна для связывания с рибосомами, а транскрипция и трансляция сопряжены.

Помимо хромосомы, в клетках бактерий часто находятся плазмиды - также замкнутые в кольцо ДНК, способные к независимой репликации. В них кодируются механизмы устойчивости к антибиотикам, разрушения специфических веществ и т. д. В ДНК бактерий выделяются транспозоны – самоинтегрирующийся фрагмент ДНК, способный перемещаться из одной части хромосомы к другой, или во внехромосомные ДНК (в том числе в другие клетки). Они содержат гены, детерминирующие синтез токсинов, ферментов обеспечивающих устойчивость к антибиотикам и белков, обеспечивающих другие признаки. IS-последовательности - участки, которые кодируют свой перенос внутри клетки. Это простейший тип мигрирующих генетических элементов. IS-последовательность может выступать в роли отдельной транспозоны.

Генотип – совокупность всех генов организма. Фенотип – совокупность всех признаков организма.