8.Жгутики и реснички. Их строение, функции, методы выявления.

1)Жгутики: имеют крючок, базальное тело, длинный нитевой отросток(белок флагеллин). По расположению и количеству жгутиков выделяют: монотрихи- имеют один жгутик, лофотрихи- пучок жгутиков с одной стороны, амфитрихи- пучок с 2 сторон, перитрихи- имеют жгутики со всех сторон. Функции: увеличивают поверхность клетки, участвуют в обмене веществ, адгезия(прикрепление), передвижение. Выявление: препарат обрабатывают порошком танином, он оседает на жгутики и они увеличиваются в объеме, после этого окрашивают препарат и они становятся видны.

2)Реснички(пили) - короткие нити, в большом количестве окружающую бактериальную клетку. Пили 1 типа обеспечивают прикрепление к определенному субстрату. Пили 2 типа обеспечивают перенос генетической информации от донорской клетки к реципиенту.

9.Споры. Их роль и особенности строения. Спорообразование. Способность сохранения вида в неблагоприятных условиях среды.

Спора – это способ сохранения вида бактерии в неблагоприятных условиях среды. Споры имеют прочную оболочку, содержащая кальций. Внутри споры нет молекул воды, чтобы не начинался метаболизм.

Спорообразование: начинается формирование спорогенной зоны(утолщенный участок цитоплазмы с нуклеотидом). Спорогенная зона изолируется от остальной части цитоплазмы, покрывается плотной оболочкой в состав которой входят белки, липиды и т.д.

Выявление: споры кислоустойчивы, окрашивается по методу Ацески и методу Циля-Нильсена в красный, а отмирающая клетка – в синий.

10. Техника приготовления мазков. Простые и сложные методы окраски. Методы окрашивания мазков. Тинкториальные свойства микроорганизмов. Окраска по Грамму.

Техника приготовления мазков:

1)Стекло обезжириваем, с другой стороны обозначаем место препарата.

2)Бактериальной петлей наносим исследуемый материал на предметное стекло(из жидкой среды – каплю, из твердой среды перед нанесением добавляем каплю воды).

3)Нанесенный материал высушиваем и фиксируем.

4)Окрашивает.

Методы: простой(1 краситель)-позволяет выявить форму бактерий и взаимное расположение; сложный метод(2 красителя)-кроме формы и распределения выявляются отдельные структуры.

Для того, чтобы изучить морфологию микроорганизмов, готовят препарат, окрашивают его, микроскопируют и выявляют морфологические и тинкториальные(отношение к красителям)свойств. грамположительная – фиолетовый, грамотрицательная - розоватый.

Окраска по Грамму:

1)Наносим генциан-виолет(фиолетовый цвет) на 1 минуту. Пинцетом снимаем бумагу с г/в.

2)Наносим раствор Люголя(содержит йод) на 1 минуту, для усиления действия г\в.

3)Раствор Люголя промываем водой и наносим спирт на 20-30 секунд. Если бактерия грамположительная, то спирт фиксирует его и препарат окрашивается в фиолетовый цвет, а грамотрицательные бактерии бесцветны.

4)Наносим раствор Фуксина на 1 минуту: грамположительные – фиолетовые, грамотрицательные – розоватые.

11.Световой микроскоп, его основные характеристики. Виды световой микроскопии(темнопольная, фазово-контрастная, люминсцентная) Иммерсионная микроскопия, принцип, ее порядок проведения. Электронная микроскопия, атомно-силовая микроскопия.

Световая микроскопия обеспечивает увеличение до 2-3 тысяч раз, цветное и подвижное изображение живого объекта. Основными характеристиками любого микроскопа являются разрешающая способность и контраст.

Разрешающая способность - это минимальное расстояние, на котором находятся две точки, когда их можно разглядеть. 

Контраст изображения - это различие яркостей изображения и фона. Увеличительная способность микроскопа равна произведению показателя увеличения окуляра на показатель увеличения объектива.

Темнопольная микроскопия -при помощи специального устройства все поле зрения затемняется, по краям остается кольцевое отверстие через которое проходят лучи света и объект становится видным на темном фоне.

Фазово-контрастная микроскопия - фазово-контрастное приспособление дает возможность увидеть в микроскоп прозрачные объекты. Они приобретают высокую контрастность изображения, которая может быть позитивной или негативной. Позитивным фазовым контрастом называют темное изображение объекта в светлом поле зрения, негативным — светлое изображение объекта на темном фоне.

Люминсцентная - свечение веществ, возникающее после воздействия на них каких-либо источников энергии: световых, электронных лучей, ионизирующего излучения.

Иммерсионная микроскопия - в отличии от световой сухой при этой микроскопии на препарат наносят каплю масла. Иммерсионное масло имеет коэффициент оптической плотности равной плотности стекла, поэтому создается единая оптическая система и объект лучше освещен.

Электронная микроскопия -вместо света пучок электрона, позволяет рассмотреть более мелкие детали.

Атомно-силовая микроскопия - позволяет сканировать бактерии.